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不管是從應(yīng)用還是制備,多克隆抗體與單克隆抗體都有很大區(qū)別
多克隆抗體就是用一種包含多種抗原決定簇的抗原免疫動物，刺激機(jī)體多個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生針對多種抗原表位的不同抗體后,，所獲得的免疫血清實(shí)際上是含有多種抗體的混合物,。由一種抗原決定簇刺激機(jī)體，由一個(gè)B淋巴細(xì)胞接受該抗原刺激所產(chǎn)生的抗體稱之為單克隆抗體。由多種抗原決定簇刺激機(jī)體,，相應(yīng)地就產(chǎn)生各種各樣的單克隆抗體,，這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,。多克隆抗體與單克隆抗體的應(yīng)用比較（1）多克隆抗體的應(yīng)用一種良好的多克隆抗血清含有抗某種抗原不同表位的多種抗體,。由于多克隆抗血清通常包含抗某一抗原的不同表位的抗 -
M15化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞操作方法看似簡單,細(xì)節(jié)很重要
M15化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞是采用大腸桿菌M15菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞，可用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化,。它能表達(dá)lac阻遏蛋白,，抑制T5強(qiáng)啟動子的表達(dá)。同時(shí),，pREP4還賦予宿主菌株卡那霉素抗性,。pREP4是從pACYC改造而來的，含有p15A復(fù)制子,。它能夠與所有帶ColE1復(fù)制起點(diǎn)的質(zhì)粒共存,。主要特點(diǎn)使用pUC19質(zhì)粒檢測，轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108,，-80℃保存幾個(gè)月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變,。recA1和endA1突變阻止對克隆DNA的修飾或?qū)λ拗骶旧獶NA的重組，提高純化質(zhì)粒的產(chǎn)量和質(zhì)量,。M15化學(xué)感受態(tài) -
重組人白介素-11藥物副反應(yīng)（一般不良反應(yīng)）
重組人白介素-11是由造血微環(huán)境基質(zhì)細(xì)胞和部分間葉細(xì)胞產(chǎn)生的多效性細(xì)胞因子,。IL-11通過與細(xì)胞表面特異性受體-配體結(jié)合鏈IL-11Ｒα結(jié)合，并連接到信號傳導(dǎo)鏈可溶性糖蛋白130(gp130)后發(fā)揮其生物學(xué)作用,，可以直接作用于骨髓巨核系祖細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞,、T細(xì)胞,、上皮細(xì)胞和肝細(xì)胞，具有促進(jìn)巨核細(xì)胞和血小板生成,、調(diào)控免疫,、抗炎和保護(hù)黏膜上皮等多種功能。IL-11的促造血功能主要表現(xiàn)在直接刺激造血干細(xì)胞和巨核系祖細(xì)胞的增殖,，誘導(dǎo)巨核細(xì)胞分化成熟,，促進(jìn)高倍性巨核細(xì)胞生成，增加單個(gè)巨核細(xì)胞血小板的產(chǎn)量,，從 -
70年代中期,，Gospodarowicz從腦垂體中純化出一種細(xì)胞生長因子，因其能促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖,，故命名為成纖維細(xì)胞生長因子(fibrobastgrowthfactor,，F(xiàn)GF)。進(jìn)一步研究表明,，F(xiàn)GF按等電點(diǎn)的不同,，可分為堿性成纖維細(xì)胞生長因子(basicfibrobastgrowthfactor，bFGF)和酸性成纖維細(xì)胞生長因子(acidfibrobastgrowthfactor，aFGF),。bFGF的等電點(diǎn)為9.6,，aFGF的等電點(diǎn)為5.6均為不含糖的肽類，有約56%相同氨基酸排列順序
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重組人干擾素是一種醫(yī)藥品,，適用于治療惡性腫瘤,、亞急性重癥肝炎、肝纖維化（早期肝硬化）,、骨髓增生異常綜合癥,、感染與損傷性疾病、系統(tǒng)性硬皮病,、病毒性疾病,、異位性皮炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等癥狀,。干擾素與細(xì)胞表面受體結(jié)合誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生多種抗病毒蛋白,抑制病毒在細(xì)胞內(nèi)繁殖,，提高免疫功能包括增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能，增強(qiáng)淋巴細(xì)胞對靶細(xì)胞的細(xì)胞毒性和天然殺傷性細(xì)胞的功能,。重組人干擾素主要成份為α2b,，輔料為鹽酸精氨酸、聚山梨酯80,、醋酸鈉專（三水）,、冰屬醋酸。其主要成份α2b系由含有表達(dá)人干擾素α2b基因的大腸桿菌,，經(jīng)
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重組蛋白真核表達(dá)包括酵母表達(dá)系統(tǒng),、桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)、腺病毒表達(dá)系統(tǒng)等,。一般可以正確折疊,，包含各種修改。但是價(jià)格高,，周期長,。重組蛋白真核表達(dá)與原核表達(dá)如何選擇真核表達(dá)：常用酵母、昆蟲,、動物和哺乳動物細(xì)胞,。其優(yōu)點(diǎn)是根據(jù)原核生物蛋白與靶DNA的高度特異性相互作用而設(shè)計(jì)，不存在基因的非特異性激活或抑制,。它可以誘導(dǎo)高達(dá)105倍的高效基因表達(dá),。可以嚴(yán)格控制基因表達(dá),。原核表達(dá)：它的優(yōu)點(diǎn)是可以在短時(shí)間內(nèi)獲得基因表達(dá)產(chǎn)物,，而且成本相對較低,。方法也簡單，可以表達(dá)的蛋白質(zhì)也很多,。但缺點(diǎn)是表達(dá)的蛋白質(zhì)沒有經(jīng)過
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重組人干擾素是一種臨床應(yīng)用于治療疾病的藥物,，該藥適可以治療惡性腫瘤、亞急性重癥肝炎,、肝纖維化(早期肝硬化),、感染與損傷性疾病、骨髓增生異常綜合癥,、病毒性疾病,、系統(tǒng)性硬皮病、異位性皮炎,、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等癥狀,。重組人干擾素有a2b和a1b,a2a三種亞型,區(qū)別是比較大的,應(yīng)該引起注意.它們都是蛋白質(zhì),三級結(jié)構(gòu)相同,一級結(jié)構(gòu)有差別,這導(dǎo)致了它們有系列的差別:1、比活性:干擾素a2b和a2a的比活性(每毫克蛋白質(zhì)中所包含的干擾素的分子數(shù))是10的8次方,a1b亞型是10的7次方,這直接導(dǎo)致了前兩者與和a1
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哺乳動物瞬時(shí)表達(dá)之瞬時(shí)轉(zhuǎn)染與穩(wěn)定轉(zhuǎn)染
哺乳動物瞬時(shí)表達(dá)是生物哺乳動物系統(tǒng)表達(dá)蛋白的方式之一,。它能夠在短期內(nèi)得到一定量的重組蛋白/重組抗體,。哺乳動物瞬時(shí)表達(dá)廣泛地應(yīng)用于基因產(chǎn)物的快速表達(dá)及蛋白質(zhì)的小規(guī)模制備等方面。將DNA導(dǎo)入真核細(xì)胞的方式有兩種：瞬時(shí)轉(zhuǎn)染與穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是用于建立克隆的細(xì)胞系,，這種細(xì)胞系中轉(zhuǎn)染的目的基因整合到染色體DNA中并指導(dǎo)適量目的蛋白的合成。在此我們主要介紹瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,。在瞬時(shí)轉(zhuǎn)染中,，重組DNA導(dǎo)入感染性強(qiáng)的細(xì)胞系以獲得目的基因暫時(shí)高水平的表達(dá)。轉(zhuǎn)染的DNA不必整合進(jìn)宿主染色體,，當(dāng)有大量樣品需要在短時(shí)間內(nèi)分析時(shí)
