聯(lián)系電話
賽爾瑞成（北京）生命科學技術(shù)有限公司
中級會員·8年
- 聯(lián)系人：
- 尤女士
- 電話：
- 010-57325063
- 手機：
- 18513354055
- 傳真：
- 010-57325063
- 地址：
- 北京市昌平區(qū)超前路甲1號北控宏創(chuàng)科技園5號樓6層
- 網(wǎng)址：
- www.cell-regen.com
掃一掃訪問手機商鋪
M15化學感受態(tài)細胞是采用大腸桿菌M15菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞，可用于DNA的化學轉(zhuǎn)化,。它能表達lac阻遏蛋白,，抑制T5強啟動子的表達。同時,，pREP4還
賦予宿主菌株卡那霉素抗性,。pREP4是從pACYC改造而來的,，含有p15A復制子,。它能夠與所有帶ColE1復制起點的質(zhì)粒共存。
主要特點
使用pUC19質(zhì)粒檢測,，轉(zhuǎn)化效率可達108,，-80℃保存幾個月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。
recA1和endA1突變阻止對克隆DNA的修飾或?qū)λ拗骶旧獶NA的重組,，提高純化
質(zhì)粒的產(chǎn)量和質(zhì)量,。
M15化學感受態(tài)細胞操作方法
1、取100μl冰上融化的M15感受態(tài)細胞,，加入目的DNA并用指尖輕輕敲打管底混勻(避免用槍吸打),，冰上靜置25分鐘。
2,、42℃水浴熱激45秒,，迅速放回冰上并靜置2分鐘,，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3,、向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基（2YT或LB）,，混勻后37℃，200rpm復蘇60分鐘,。
4,、5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上,。
5,、將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
M15感受態(tài)細胞感受態(tài)細胞使用注意事項
1,、感受態(tài)細胞一般在冰上融化,。
2、混入目的DNA時應輕柔操作,。
