聯(lián)系電話
賽爾瑞成（北京）生命科學(xué)技術(shù)有限公司
中級會(huì)員·8年
- 聯(lián)系人：
- 尤女士
- 電話：
- 010-57325063
- 手機(jī)：
- 18513354055
- 傳真：
- 010-57325063
- 地址：
- 北京市昌平區(qū)超前路甲1號北控宏創(chuàng)科技園5號樓6層
- 網(wǎng)址：
- www.cell-regen.com
掃一掃訪問手機(jī)商鋪
M15化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞是采用大腸桿菌M15菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞，可用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化,。它能表達(dá)lac阻遏蛋白,，抑制T5強(qiáng)啟動(dòng)子的表達(dá),。同時(shí),，pREP4還
賦予宿主菌株卡那霉素抗性,。pREP4是從pACYC改造而來的,，含有p15A復(fù)制子,。它能夠與所有帶ColE1復(fù)制起點(diǎn)的質(zhì)粒共存。
主要特點(diǎn)
使用pUC19質(zhì)粒檢測,，轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108,，-80℃保存幾個(gè)月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。
recA1和endA1突變阻止對克隆DNA的修飾或?qū)λ拗骶旧獶NA的重組,，提高純化
質(zhì)粒的產(chǎn)量和質(zhì)量,。
M15化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞操作方法
1、取100μl冰上融化的M15感受態(tài)細(xì)胞,，加入目的DNA并用指尖輕輕敲打管底混勻(避免用槍吸打),，冰上靜置25分鐘。
2,、42℃水浴熱激45秒,，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率,。
3,、向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基（2YT或LB），混勻后37℃,，200rpm復(fù)蘇60分鐘,。
4、5000rpm離心一分鐘收菌,，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上,。
5、將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng),。
M15感受態(tài)細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞使用注意事項(xiàng)
1,、感受態(tài)細(xì)胞一般在冰上融化,。
2、混入目的DNA時(shí)應(yīng)輕柔操作,。
