Fbg人血纖蛋白原ELISA試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品：抗異質(zhì)型核糖核蛋白抗體/抗RA33抗體ELISA試劑盒 anti-hnRNP-ab/anti-RA33-abHuman anti-hnRNP-ab/anti-RA33-ab ELISA Kit抗乙型肝炎病毒核心抗體ELISA試劑盒 HBcAbHuman anti-hepatitis B virus core antibody，HBcAb ELI

服務(wù)：

我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,，比如在檢測范圍,、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,，而量身定制檢測試劑盒，有效控制檢測試劑成本,。公司產(chǎn)品僅用于科研并可提供免費代測,。

產(chǎn)品名稱：Fbg人血纖蛋白原ELISA試劑盒
英文名稱：Human Fibrinogen,Fbg ELISA Kit
貨號：A097114
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T。

主要成分：酶標板,試劑,標準品等

性狀：盒裝液體

試劑盒保存：2-8℃低溫保存,。

標本：血清、血漿,、細胞上清液,、尿液、體液,、灌洗液,、腦脊髓、心房水,、胸房水,、組織等。

標本的采集與保存：

1,、血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2 小時或4oC 過夜,，然后1000×g 離心20 分鐘，取上清即

可,，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20oC 或-80oC 保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2,、血漿：用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本,，并將標本在采集后的30 分鐘內(nèi)于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘，

取上清即可檢測,，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20oC 或-80oC 保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3,、組織勻漿：

1） 取適量組織塊,，于預(yù)冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液，稱重后備用（組織塊較大需先剪碎后再勻漿）,；

2） 可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果：首先將組織塊移入玻璃勻漿器,，加入5-10mL 預(yù)冷PBS 進行充分研磨，該過程需在冰上進行（有條件實驗室可選用機器勻漿）,；得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進一步處理（超聲破碎過程中注意冰浴降溫,；反復(fù)凍融法可重復(fù)2 次）。

3） 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘,，留取上清即可檢測,。

4,、其它生物標本：請1000×g 離心20 分鐘，取上清即可檢測,，或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
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ELISA試劑盒優(yōu)點：

1,、抗體----高效,、靈敏、特異

2,、規(guī)范包被操作----吸附均勻,，吸附性好，空白值低,，孔底透明度高

3,、先進的優(yōu)化方案----重復(fù)性高，可靠性強

4,、購買本公司的ELISA試劑盒,，免費代測

5、技術(shù)服務(wù)要求：專業(yè),，規(guī)范,，高效

6、適用于體液,、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本

7,、可檢測動物類型豐富：人,、猴、大鼠,、小鼠,、豚鼠、黃金地鼠,、兔,、豬、犬,、牛,、綿羊、山羊,、鵝,、雞、蝦,、河蟹,、鱸魚,、斑馬魚等

8、可檢測指標齊全：炎癥因子,、血管生成素,、動脈粥樣硬化因子、趨化因子,、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶,、脂肪因子等等

9、經(jīng)濟,、實惠,、可靠，完善,、穩(wěn)定的實驗體系，優(yōu)秀的科研隊伍,，先進的實驗設(shè)備,、準確可靠的實驗結(jié)果，是您可靠的合作伙伴,。

注意事項：

1加樣：

①實驗樣本過多時,，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差,；

②加酶試劑后,，用吸水紙吸干孔外試劑；

③作定量試驗時,，使用加樣器加注試劑,，并經(jīng)常校正其準確性，此外,，要做到一份樣本一個移液頭,，防止交叉污染。

2.溫育：

①如有兩種溫度,，盡量使用較低的溫育溫度,、較長反應(yīng)時間的條件；

②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察,；

③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)",，因此盡量采用水浴,；

3.洗板：

①手工洗板時,，拍板時要垂直，避免交叉污染,，用力不能過猛,，防止抗原抗體復(fù)合物脫離,；

②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出,；

③為了洗滌效果好,，實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,，或適當增加洗板的次數(shù),；

4.顯色：

ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液,；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑,。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min,。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光,。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械,。

5.判定：

讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,，定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm,；定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果,，酶標儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進行測試,。

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產(chǎn)品屬性：

公司產(chǎn)品僅用于科研組成及試劑配制 :

1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）,。

2. 標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶,。

4. 標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶,。

5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶,。

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶,，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）,。

ELISA試劑盒的組成:

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ELISA技術(shù)的*性：

（一）靈敏度高

雖然酶活性調(diào)節(jié)ELISA方法的靈敏度目前并不十分理想,，但在酶活性放大ELISA中，檢測的靈敏度遠比RIA高,。根據(jù)質(zhì)量作用定律,。即免疫反應(yīng)所形成的免疫復(fù)合物量與反應(yīng)物濃度成正比。推測所檢測的待測物分子數(shù)為1,。已知1個摩爾濃度含6.02×1023個分子,，那么理論推測酶活性放大Elisa方法的zui低檢測限可達1.7×10-24mol/L,。雖然在實際應(yīng)用中由于反應(yīng)條件和試劑純度以及儀器精度等因素的影響，往往達不到這個水平（大于104個分子）,，但表明Elisa在靈敏度方面的改進潛力是很大的,。

（二）特異性強

從免疫反應(yīng)的角度來說，Elisa與RIA的特異性應(yīng)該是,。但在ELISA方法中,，由于作用檢測指示劑的酶與其底物的反應(yīng)有專一性，從而增加了該方法的特異性,。

（三）對儀器設(shè)備要求不高,，測定成本低

Elisa測定在普通實驗室便可進行，常用的儀器設(shè)備包括加樣器,、培養(yǎng)箱,、酶標專用讀數(shù)器等。按現(xiàn)有價格折算,，酶標儀的價格只及液閃儀的1/6至1/4,，因此每測定一個樣本所需成本不及PIA的1/10至1/16。某些定性Elisa方法,，還可在野外進行，操作十分方便,。

（四）方法快速,、簡便

均質(zhì)酶免疫測定方法操作時，所有反應(yīng)試劑均在同一體系內(nèi)進行,，不需任何分離步驟,，操作十分簡便、快速,，數(shù)分鐘便能得出結(jié)果,。某些定性Elisa試劑盒，如國外的某些奶牛發(fā)情鑒定和妊娠診斷Elisa試劑盒,，數(shù)分鐘時間便能完成一次測定,。

（五）試劑保存時間較長

作為檢測指示劑用的酶和酶標記物，在低溫或干燥條件下相對穩(wěn)定,，可保存半年至數(shù)年之久,。

（六）自動化程度高

Elisa由于不存在放射性同位素污染，因此,，除加待測樣本需要人工操作外,，其他各步驟均可用儀器自動化完成。在這種自動化條件下,，平均每人每天可完成2000余個樣本的檢測工作,。

（七）方法種類多

ELISA技術(shù)可以充分利用單克隆抗體的優(yōu)點,，并能利用某些非免疫反應(yīng)試劑（如SPA、凝集素等）的作用,，發(fā)展成為許多新方法,。此外，發(fā)展Elisa技術(shù)還可以從酶及其底物兩方面著手,。這是因為用于ELISA技術(shù)的酶其種類遠遠多于可用作RIA檢測指示劑的放射性同位素,。生物界的酶多種多樣，有希望開發(fā)很多類型的酶用于Elisa,，并建立相應(yīng)的ELISA方法,。相反，自然界的化學(xué)元素是有限的,，放射性同位素的種類更加有限,。第二，由于酶的多樣性,，酶作用底物也有多種多樣,，與此相對應(yīng)的生色源或供氫體的種類也有遠大的開發(fā)和發(fā)展?jié)摿Α?/span>
操作步驟：

1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔,、陽性對照 2 孔,、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）

2.加樣：分別在陰,、陽性對照孔中加入陰性對照,、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,，然后再加待測樣品 10μl,。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,，

3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用,。

5.洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置 30 秒后棄去,，如此 重復(fù) 5 次,，拍干,。

6.加酶：每孔加入酶標試劑 50μl，空白孔除外,。

7.溫育：操作同 3,。

8.洗滌：操作同 5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl,，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色10 分鐘.

10.終止：每孔加終止液 50μl,，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11.測定：以空白空調(diào)零,，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行,。

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