詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:洋蔥伯克氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號:FS-P013479
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一,、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計,。因此,,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油,。 2.調整好反應程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min,。 3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,,各區(qū)實驗服、儀器,、耗材應獨立使用,,不能混用,;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭,;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作,;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,,且完成實驗后立即上機檢測,;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰,、陽性對照,。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心,。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),,并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,,應避免裸手直接接觸PCR反應管,,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置,;不同批號試劑不能混用,。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄,。
Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit 人N-乙?;?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯Multi-class antibodies: 48T
srGAP3 精神障礙相關GAP蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat human IgM/HRP 辣根過氧化物標記的羊抗人IgM 0.1ml
ADP(Mouse adiponectin) ELISA Kit 小鼠脂聯(lián) 96T
NKR2B4 CD244自然殺傷細胞受體2B4抗體 0.1ml
Bax Bax 0.1ml
srGAP3 精神障礙相關GAP蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
MTX(Human methotrexate) ELISA Kit 人甲胺喋呤Multi-class antibodies: 48T
PFK2/PFKFB3 6磷果糖激2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Histone H3 (tri methyl K36) 基化組蛋白H3抗體 0.1ml
sPECAM-1/sCD31 ELISA Kit 大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細胞粘附分子1 96T
PSMA4 蛋白體PSMα4/20S Proteasome α4抗體 0.2ml
COMMD8 銅代謝結構域蛋白8抗體 0.2ml
PFK2/PFKFB3 6磷果糖激2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗豬IgG 0.1ml
GLUT12 葡萄糖轉運蛋白12抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APP695 (CT) 淀粉樣肽前體蛋白抗體(C端) 0.1ml
phospho-IKK gamma (Ser376)/FITC 熒光標記磷化核因子κB激gamma抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MG IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml
pre-X protein(NT)/FITC 熒光標記抗乙肝病毒pre-X蛋白抗體(N端)IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
洋蔥伯克氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒50次嗜蟲沙雷氏菌種屬: Serratia│entomophila分離基物: 天牛腸道提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 飼料用纖維、植,、木聚糖等的篩選培養(yǎng)基: 0002生長條件: 26℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法,;真空冷凍干燥法;礦物油法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0305生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
天門冬紫鏈霉菌種屬: Streptomyces│asporaginoviolaceus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
新不倫瑞克沙門氏菌種屬: Salmonella│new-brunswick提供形式: 凍結物安全等級: 2模式菌株: no應用領域: 3,15 l,v 1,7培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 定期移植法
人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA試劑盒亞甲基藍 超純級,Dye content, >90%(HPLC)納米氮化鋁 99.9% metals basis,50nm重去甲腎上腺(標準品)
人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)ELISA試劑盒孔雀石綠 AR氮化鋁 N >33.0%,, D50/2.0 μm6-氨基己
人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)ELISA試劑盒鎂試劑Ⅰ 高純級,90%氮化鋁 N >32.5 % ,,D97/5.0 μm普魯蘭糖;普魯蘭多糖
人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA試劑盒鎂試劑Ⅰ AR納米鋇鐵氧體 30-50nm 球形 99.5%維生 E, 酚
人抗核仁抗體(ANA)ELISA試劑盒鎂試劑Ⅱ AR納米鋇鐵氧體 200nm,99%司他夫定
人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試劑盒甲基紫 AR納米鉍粉 99.9% metals basis,40nm,球形司他夫定(標準品)
人抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒甲基紫 IND(pH 0.1-2.0)三氧化二鉻 60nm 球形,98.0%嗎貝
人抗骨骼肌抗體(ASA)ELISA試劑盒1-亞硝基-2-萘酚 96%納米鐵鈷 40nm 球形 99.5%嗎貝(標準品)
人抗弓形體IgM抗體(anti-tox IgM)ELISA試劑盒橙黃G BS納米碳粉 99.5%,,30nm黃芪甲苷(標準品)
人抗高爾基體抗體(AGAA)ELISA試劑盒橙黃G AR,,≥80.0% (HPLC)四氧化三鈷 30nm 球形,99.5%黃芪甲苷
人抗肝膜抗體(LMA)ELISA試劑盒橙黃G AR,,≥80.0% (HPLC)氧化鏑 40nm 球形,,99.5%那格列奈(標準品)
人抗肝胞質1型抗體(LC1)ELISA試劑盒橙黃G ≥96%(HPLC)石墨 99%,40nm那格列奈
人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA試劑盒油紅O Biological stain納米羥基灰石 nanopowder,<100 nm particle size (BET), ≥97%那格列奈
人抗肝PF4復合物抗體/HIT抗體-IgM(HIT)ELISA試劑盒橙黃Ⅳ Indicator納米四氧化三鐵 99.5%,20nm 球形丁溴東莨菪
人抗肝PF4復合物抗體/HIT抗體(HIT)ELISA試劑盒橙黃Ⅰ Biological stain鎂 99.5%,,50nm,灰色單寧,鞣,丹寧
人抗肝腎微粒體抗體(LKM)ELISA試劑盒橙黃Ⅰ Indicator氧化釹 40nm 球形,,99.5%馬拉韋若
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設置標準品孔和樣本孔,,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL,;空白孔不加,。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板),。
6.每孔加入底物A,、B各50μL,37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),,在450nm波長處測定各孔的OD值。