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詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1,、酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2,、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,，其濃度為200 U/L,，然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L,，100 U/L,，50 U/L，25 U/L,，12.5 U/L,，6.25 U/L，3.12 U/L,，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可,，其余濃度以此類(lèi)推,。
3、 樣品稀釋液：1×20ml,。
4,、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途,！
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
48T 0.1PCR管 | FS-02R6395 |
使用方法：
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例） 1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,，分別為7,，6，5,，4,，3，2,。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液（用帶芯槍頭,，下同）。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,，充分震蕩1分鐘,，得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用,。 5. 換槍頭,，在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘,，得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用。 6. 換槍頭,，在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,，充分震蕩1分鐘,，得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用,。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用。 | 二,、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,，必須設(shè)置N+2個(gè)提取， 多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽(yáng)性對(duì)照）,， 一個(gè)是NC（樣品制備陰性對(duì)照）,。 可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝）或第5號(hào)（濃度為1×10E5 拷貝/μL,，10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,，以此作為PC。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品,，則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒,。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系,，在樣品制備室進(jìn)行） 10. 如果只做1次重復(fù),，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,，6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍,。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加）
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實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué)：基因芯片,、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè),、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片,、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片,、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE,、SILAC、iTRAQ、TMT,、Label-free,、MRM
4.基因檢測(cè)：DNA/RNA提取、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè)：Western blot,、Co-ip EMSA,、CHIP,、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè)：HE染色,、特殊染色,、組織切片、免疫組化,、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS,、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型：原代細(xì)胞,、細(xì)胞模型,、動(dòng)物模型構(gòu)建
PS(Human phosphatidylserine) ELISA Kit 人磷脂酰絲Multi-class antibodies： 48T
TORC1/CRTC1 環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh KCNN4 鈣激活鉀通道蛋白4抗體 0.1ml
DF-Ab(Human dengue fever antibody) ELISA Kit 人登革熱抗體 96T
PAPSS1 腺苷激1抗體 0.2ml
CSNK1G2 酪蛋白激1γ2抗體 0.2ml
TORC1/CRTC1 環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Phospho-Bcl-2 (p-Ser70) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠磷化Bcl-2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
GIG8/ID2/FITC 熒光標(biāo)記DNA結(jié)合抑制因子2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh CKLF 趨化樣蛋白抗體 0.2ml
Fibronectin (FN) 纖維連結(jié)蛋白(多肽抗原) 0.5mg
rhIL-18 重組人白細(xì)胞介18抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Transferrin(1F10) 轉(zhuǎn)鐵蛋白單克隆抗體 0.1ml
GIG8/ID2/FITC 熒光標(biāo)記DNA結(jié)合抑制因子2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rabbit Goat IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗羊IgG 0.1ml
GPR17 G蛋白偶聯(lián)受體17抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ADM2 中介抗體 0.1ml
Phospho-LKB1 (Thr189) /FITC 熒光標(biāo)記磷化絲/蘇蛋白激抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗雞IgM 0.1ml
Synapsin I /FITC 熒光標(biāo)記神經(jīng)突觸1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
鴨源性核酸檢測(cè)試劑盒48T0.1PCR管五指毛桃Radix Fici simplicissimae
金毛耳草（黃毛耳草）Golden?ear
乙Acetonitrile
川燈心草Sichuan?rushes
二甲基亞砜Two methyl?sulfoxide
香櫞（枸櫞）Citron?（Gou Yuan）
葶藶子（獨(dú)行菜）Semen Lepidii?（Lepidium）
麥白霉Meleumycin
威靈仙（綿團(tuán)鐵線蓮）Clematis?（Clematis?woolly?group）
瓜蔞（栝樓）Trichosanthes?（Trichosanthes kirilowii Maxim
卡那霉Kanamycin
印度獐芽菜India?Swertia japonica
絡(luò)石藤Luo Shiteng
阿里紅Ali red
貓爪草Cat's claw
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞,，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,，蓋緊管蓋,。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層,。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液，每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),，清洗RNA沉淀,。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度,。
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