化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服,、儀器,、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用,；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭,；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作,；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè),；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理,。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰,、陽性對(duì)照,。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心,。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置,；不同批號(hào)試劑不能混用,。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None,。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄,。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：水牛源性成分核酸檢測(cè)試劑盒48T0.2PCR管
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-02R6420
產(chǎn)品規(guī)格：48T 0.2PCR管
產(chǎn)品分類：PCR-熒光探針法
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,，而不能從無到有，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物,。可以是DNA也可以是RNA,，一般20多bp,，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二,、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min,。 3．結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油；否則,，直接取5-10μl電泳檢測(cè),。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL,；空白孔不加,。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。
6.每孔加入底物A,、B各50μL，37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。
6-keto-PGF1a ELISA Kit 大鼠6酮前列腺F1aMulti-class antibodies： 48T
TNFAIP3 壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh GLT8D1 糖基轉(zhuǎn)移8結(jié)構(gòu)域1抗體 0.2ml
F IX (Mouse Fcoagulation factor IX ) ELISA Kit 小鼠因子Ⅸ 96T
NR0B1 腎上腺發(fā)育不全相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
APE1 多功能DNA修復(fù)抗體 0.1ml
TNFAIP3 壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
VCAM-1/CD106(Human Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA kit 人血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1Multi-class antibodies： 48T
GHRF/GHRH 生長(zhǎng)釋放抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Goat IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
SAA(Human Serum amyloid A) ELISA Kit 人血清淀粉樣蛋白A 96T
Retinal S antigen 視網(wǎng)膜S抗原抗體 0.2ml
CTNNBIP1 β鏈接相互作用蛋白1抗體 0.1ml
GHRF/GHRH 生長(zhǎng)釋放抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit Guinea pig IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
Gibberellins 赤霉抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh AFP 甲胎蛋白抗體 0.1ml
LFABP/FABP-1 /FITC 熒光標(biāo)記肝臟型脂肪結(jié)合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgG 兔抗羊IgG 1mg
phospho-STAT1 (Ser727) /FITC 熒光標(biāo)記磷化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
水牛源性成分核酸檢測(cè)試劑盒48T0.2PCR管猴組織蛋白D（CTSD）elisa檢測(cè)試劑盒
猴組織因子（TF）elisa檢測(cè)試劑盒
猴G蛋白β1（GNβ1）elisa檢測(cè)試劑盒
豬乳脫氫B（LDHB）elisa檢測(cè)試劑盒
豬過氧化還原5（PRDX5）elisa檢測(cè)試劑盒
豬丙酮M2型同工（PKM2）elisa檢測(cè)試劑盒
猴GATA結(jié)合蛋白2（GATA2）elisa檢測(cè)試劑盒
猴尿相關(guān)蛋白C（UreC）elisa檢測(cè)試劑盒
猴胸腺基質(zhì)生成（TSLP）elisa檢測(cè)試劑盒
猴抗白蛋白抗體（AAA）elisa檢測(cè)試劑盒
豬血小板親和蛋白2（PKP2）elisa檢測(cè)試劑盒
豬白介16（IL-16）elisa檢測(cè)試劑盒
猴血管緊張II受體2（ANGⅡR2）elisa檢測(cè)試劑盒
豬GATA結(jié)合蛋白4（GATA4）elisa檢測(cè)試劑盒
豬肌聯(lián)蛋白抗體（TTN）elisa檢測(cè)試劑盒
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