詳細(xì)介紹
ELISA試劑盒優(yōu)點:
1,、*抗體----高效,、靈敏、特異
2,、規(guī)范包被操作----吸附均勻,,吸附性好,空白值低,,孔底透明度高
3,、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,可靠性強
4,、購買本公司的ELISA試劑盒,,免費代測
5、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),,規(guī)范,,高效
6、適用于體液,、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7,、可檢測動物類型豐富:人,、猴、大鼠,、小鼠,、豚鼠,、黃金地鼠、兔,、豬,、犬、牛,、綿羊,、山羊、鵝,、雞,、蝦、河蟹,、鱸魚,、斑馬魚等
8、可檢測指標(biāo)齊全:炎癥因子,、血管生成素,、動脈粥樣硬化因子、趨化因子,、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶,、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟(jì),、實惠,、可靠,完善,、穩(wěn)定的實驗體系,,科研隊伍,良好的實驗設(shè)備,、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果,,是您可靠的合作伙伴。
檢測原理:
產(chǎn)品僅用于科研試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),。往預(yù)先包被抗體的包被微孔中,,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
Porcine endothelial nitric oxide synthase (eNOS) ELISA Kit | FS-P5757 |
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操作要點:
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,,體液(如血清),、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份,。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清,、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物),。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本,;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑、蒸餾水,、去離子水,、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,,即加標(biāo)本,,加酶結(jié)合物,加底物,。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),,即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后??乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,,這一保溫過程稱為溫育。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種,。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的最后一步溫育反應(yīng),此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物,。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀,。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定,。
ELISA試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,。有時本底較高,,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉,。
2. 產(chǎn)品僅用于科研在ELISA中,,進(jìn)行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,,如聚氯乙烯,、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板,、試管、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,,在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng),,觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時,。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,,在其它試驗條件相同時,,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度,。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml,。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度,。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全,、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,,應(yīng)注意防護(hù),。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,,以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 ,。
Nitrite reductase亞硝酸還原酶種屬: Inocybe│fastigiata (Schaeff.) Quél.黃毛銹傘
Glycine decarboxylase甘氨酸脫羧酶種屬: Dechloromonas│sp.脫氯單胞菌
Serine Glyoxylate Aminotransferase絲氨酸乙醛酸轉(zhuǎn)氨酶種屬: Sporolactobacillus│terrae土乳芽胞桿菌
Staphylococcal Enterotoxin B金黃色葡萄球菌腸毒素B種屬: Pantoeacitrea檸檬泛菌
Staphylococcal Enterotoxin C金黃色葡萄球菌腸毒素C種屬: Micromonospora│auratinigra金黑小單孢菌
Staphylococcal Enterotoxin E金黃色葡萄球菌腸毒素E種屬: Deinococcus│xibeiensis西北奇異球菌
Bone Morphogenetic Protein Receptor IB骨成型蛋白受體1B種屬: Bacteroides dorei Bakir et al. 2006 emend. Hahnke et al. 2016DSMZ17855, Type strain
Prostaglandin H2前列腺素H2種屬: Bifidobacterium│pseudolongum subsp. pseudolongum假長雙歧桿菌假長亞種
glycine betaine甘氨酸甜菜堿種屬: Achromobacter│denitrificans木糖氧化產(chǎn)堿菌反硝化亞種
vomitoxin嘔吐毒素種屬: Pantoeastewartiisubsp.stewartiiPantoeastewartiisubsp.stewartii
hydroxysteroid dehydrogenase 羥基類固醇脫氫酶種屬: Streptomyces│olivaceiscleroticus橄欖色菌核鏈霉菌
hydroxysteroid dehydrogenase羥基類固醇脫氫酶種屬: Eupenicillium│lassenii拉森正青霉
Acetolactate Synthase乙酰乳酸合成酶種屬: Lactobacillus│algidus低溫乳桿菌
Super Oxidase Dimutase超氧化物歧化酶種屬: Salmonella│panama巴拿馬沙門氏菌
種屬: RoseivivaxhaloduransRoseivivaxhalodurans
豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶ELISA檢測試劑盒大鼠活化蛋白C(APC)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Acetobacter pasteurianus
人周期素依賴性激酶5(CDK5)ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: Mrakia blollopis
植物玉米素核苷(ZR)ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: Mucor aromaticus Povah
人Dickkopf 1(DKK1)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Bacillus subtilis
人羥賴氨酸(Hyl)ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: Deinococcus radiodurans
牛鋅金屬硫蛋白(Zn-MT)ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: Saccharomycodes ludwigii
人α-內(nèi)肽(α-EP)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Lujinxingia carchariae gen. nov. sp. nov.
小鼠酮酸脫氫酶E1(PDH E1) ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: Arthrobacter psychrochitiniphilus