詳細(xì)介紹
檢測原理:
產(chǎn)品僅用于科研試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被抗體的包被微孔中,,依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度,。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
Rabbit dehydroepiandrosterone sulfate (DHEA-S) ELISA Kit | FS-R5664 |
ELISA試劑盒優(yōu)點:
1、*抗體----高效,、靈敏,、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,,吸附性好,,空白值低,孔底透明度高
3,、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,,可靠性強
4,、購買本公司的ELISA試劑盒,免費代測
5,、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),,規(guī)范,高效
6,、適用于體液,、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等多種類型的樣本
7,、可檢測動物類型豐富:人、猴,、大鼠,、小鼠、豚鼠,、黃金地鼠,、兔、豬,、犬,、牛、綿羊,、山羊,、鵝、雞,、蝦,、河蟹、鱸魚,、斑馬魚等
8,、可檢測指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素,、動脈粥樣硬化因子,、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶,、脂肪因子等等
9,、經(jīng)濟、實惠,、可靠,,完善、穩(wěn)定的實驗體系,科研隊伍,,良好的實驗設(shè)備,、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果,是您可靠的合作伙伴,。
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操作要點:
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液,、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清,、尿液),,有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本,;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑,、蒸餾水、去離子水,、自配的緩沖液,;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,,加酶結(jié)合物,,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),,即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后,。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,,這一保溫過程稱為溫育,。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種,。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的最后一步溫育反應(yīng),,此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中,。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定,。
Haptoglobin結(jié)合珠蛋白種屬: Sporobolomyces│yunnanesis云南擲孢酵母
Metallothionein金屬硫蛋白種屬: Phaeolus│schweinitzii松衫暗孔菌(栗褐暗孔菌)
arginine vasopressin精氨酸加壓素種屬: Nonlabens│tegetincola居墊不滑動菌
Arginase精氨酸酶種屬: Kocuria│gwangalliensis考克氏菌(加詞待譯)
leucine aminopeptidase亮氨酸氨肽酶種屬: Trichoderma harzianum 哈茨木霉
Phosphofructokinase磷酸果糖激酶種屬: Glycomyces│endophyticus內(nèi)生糖霉菌
Phosphofructokinase 1磷酸果糖激酶1種屬: Pleurotus│cystidiosus O. K. Mill.蓋囊菇
phosphoenolpyruvate carboxykinase磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶種屬: Alternaria│azukiae (Hara) T.Y. Zhang & Y.L. Guo小豆交鏈孢霉
phosphatidylcholine磷脂酰膽堿種屬: Cyathus berkeleyanus小孢黑蛋巢(斜面)
phosphatidylinositol磷脂酰肌醇種屬: Crepidotus│badiofloccosus S. Imai褐黃鱗銹耳
phosphatidylethanolamine磷脂酰乙醇胺種屬: Trichoderma│sp.羊肚伴生菌
keratan sulfate硫酸角質(zhì)素種屬: Corynebacterium│urealyticum解脲棒桿菌
Vitellogenin卵黃蛋白原種屬: Cortinarius│lilacinus Peck丁香絲膜菌
Immunoglobulin A免疫球蛋白A種屬: Psathyrella│candolleana (Fr.) Maire薄花邊傘3-4
Immunoglobulin E免疫球蛋白E種屬: Venturia│pirina Aderh.梨黑星
兔子脫氫表雄酮硫酸酯ELISA檢測試劑盒大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,,非食用
人血血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: Trichosporon mucoides
小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Aspergillus niger
大鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: Mrakia frigida
雞煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA Kit,,48T/96T 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,,非食用
人煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: gallinarum
小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA Kit,48T/96T 用途: 研究
大鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: Bacillus subtilis
ELISA試驗時,,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,,待檢樣品應(yīng)作一式二份,,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,,說明有非特異性反應(yīng),,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉,。
2. 產(chǎn)品僅用于科研在ELISA中,,進(jìn)行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,,如聚氯乙烯,、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板,、試管、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,,在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng),,觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時,。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,,在其它試驗條件相同時,,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml,。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份),。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度,。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉,、安全、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護,。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時間,,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,,尤其是H2O2在臨用前加入 ,。