詳細介紹
檢測原理:
產(chǎn)品僅用于科研試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被抗體的包被微孔中,,依次加入標本,、標準品、HRP標記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,,并在酸的作用下轉化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度,。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
Rabbit type III procollagen (P III NP) ELISA Kit | FS-R5580 |
ELISA試劑盒優(yōu)點:
1、*抗體----高效,、靈敏,、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,,吸附性好,,空白值低,孔底透明度高
3,、良好的優(yōu)化方案----重復性高,,可靠性強
4、購買本公司的ELISA試劑盒,,免費代測
5,、技術服務要求:專業(yè),,規(guī)范,高效
6,、適用于體液,、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液,、尿液等多種類型的樣本
7,、可檢測動物類型豐富:人、猴,、大鼠,、小鼠、豚鼠,、黃金地鼠,、兔、豬,、犬,、牛、綿羊,、山羊,、鵝、雞,、蝦,、河蟹、鱸魚,、斑馬魚等
8,、可檢測指標齊全:炎癥因子、血管生成素,、動脈粥樣硬化因子,、趨化因子、生長因子基質金屬蛋白酶,、脂肪因子等等
9,、經(jīng)濟、實惠,、可靠,完善,、穩(wěn)定的實驗體系,,科研隊伍,良好的實驗設備,、準確可靠的實驗結果,,是您可靠的合作伙伴,。
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操作要點:
1)標本的采取和保存:可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清),、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液,、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清,、尿液),,有些則需經(jīng)預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本,;
2)試劑的準備:所需試劑,、蒸餾水、去離子水,、自配的緩沖液,;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標本,,加酶結合物,,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應,,即加標本和加酶結合物后,。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間,,這一保溫過程稱為溫育,。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種,。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的最后一步溫育反應,,此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,,然后將板正確放入酶標比色儀的比色架中,。儀器準備為酶標儀。
7)結果判斷:分定性判定和定量判定,。
Thioredoxin硫氧化還原蛋白種屬: Klebsiella│pneumoniae肺炎克雷氏伯桿菌
Egg albumin卵白蛋白種屬: Bacillus│thuringiensis serovar. silo蘇云金芽孢桿菌silo亞種
yolk antibody卵黃抗體種屬: 20μlpCAMBIA1301
ovomucoid卵類粘蛋白種屬: Bacillus│thuringiensis serovar. darmstadiensis蘇云金芽孢桿菌達姆斯塔丁斯亞種
ovalbumin specific IgG卵清蛋白特異性IgG種屬: Escherichia│coli大腸埃希氏菌DH5a/pET20b/PasecA N39H
Transferrin from hen egg white卵清轉鐵蛋白種屬: Auricularia│auricula (Hook. f.) Underw.黑木耳(木6)
Immunoglobulin A免疫球蛋白A種屬: Avipoxvirus│Quail pox virus鵪鶉痘病毒
Immunoglobulin E免疫球蛋白E種屬: Escherichia│coli大腸埃希氏菌DH5α/pBH10-CDRW
Immunoglobulin G免疫球蛋白G種屬: Tistrella│bauzanensis替斯崔納菌(加詞待譯)
Immunoglobulin G1免疫球蛋白G1種屬: Cercospora│glandulosa Ellis & Kellerm.臭椿尾孢菌
Immunoglobulin G2免疫球蛋白G2種屬: Drechmeria│coniospora圓錐掘氏梅里霉
Immunoglobulin M免疫球蛋白M種屬: Rhodopseudomonas pseudopalustrisRhodopseudomonas pseudopalustris
Brain derived neurotrophic facor腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子種屬: Fusarium│oxysporum var. redolens尖孢鐮孢芬芳變種
rudimental bovine serum albumin check-up牛血清白蛋白種屬: Tricholoma│album (Schaeff.) P. Kumm.乳白蘑菇
Cortisol皮質醇種屬: Pseudoxanthomonas│sp.假黃色單胞菌
兔子Ⅲ型前膠原肽ELISA檢測試劑盒人瘤病毒16型E7抗體9-Aminominocycline hydrochloride別名: 分子式: C23H29ClN4O7性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
HER2抗體Minocycline hydrochloride別名: 分子式: C23H28ClN3O7性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
人胎盤泌乳素抗體Nisoldipine別名: 分子式: C20H24N2O6性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
熱休克蛋白27抗體Ropivacaine mesyla別名: 分子式: C18H30N2O4S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
高遷移率族蛋白A1抗體Mepivacaine hydrochloride別名: 分子式: C15H23ClN2O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
磷化HER2受體抗體Quetiapine別名: 分子式: C21H25N3O2S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
熱休克蛋白-20抗體Mizolastine別名: 分子式: C24H25FN6O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
羥乙基淀粉抗體Avanafil別名: 分子式: C23H26ClN7O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
ELISA試驗時,,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,,待檢樣品應作一式二份,,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,,說明有非特異性反應,,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉,。
2. 產(chǎn)品僅用于科研在ELISA中,,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯,、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板,、試管,、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,,觀察其顯色反應是否均一性,,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間,。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時,。蛋白質包被適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1,、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,,觀察陽性標本的OD值,。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質來說通常為1~10μg/ml,。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份),。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度,。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉,、安全、有明顯地顯色反應,,而本身無色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護,。有條件者應使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后,,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,,以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 ,。