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狗源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒

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更新時間:2022-04-13 10:03:20瀏覽次數(shù):259

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號 FS-P013347 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
狗源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒正在出售的產(chǎn)品:STAT3 (Phospho-Tyr705) Antibody
STAT3 (Phospho-Ser727) Antibody
STAT4 (Phospho-Tyr693) Antibody

詳細(xì)介紹

組成及試劑配制:

1,、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,,請臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),,分別配制成200 U/L,,100 U/L,50 U/L,,25 U/L,,12.5 U/L,6.25 U/L,,3.12 U/L,,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,,其余濃度以此類推。

3,、 樣品稀釋液:1×20ml,。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml,。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途,!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

狗源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒

50次

FS-P013347

 

QQ截圖20201022162313.png 

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標(biāo)記6個離心管,,分別為7,,6,5,,4,,3,2,。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同),。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩1分鐘,,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。

6. 換槍頭,,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照,。放冰上待用,。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品,,必須設(shè)置N+2個提取,,

多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

一個是NC(樣品制備陰性對照),。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC,。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL,。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三,、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,,在樣品制備室進(jìn)行)

10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照,。如果做2-3次重復(fù),,則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù),。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

實驗外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測,、DNA甲基化檢測,、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片,、表達(dá)譜芯片,、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC,、iTRAQ,、TMT、Label-free,、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取,、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot,、Co-ip  EMSA,、CHIP、免疫熒光,、ELISA

6.病理檢測:HE染色,、特殊染色、組織切片,、免疫組化,、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS,、LC-MS、NMR

8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞,、細(xì)胞模型,、動物模型構(gòu)建

apo-B100 ELISA Kit 大鼠載脂蛋白B100Multi-class antibodies: 48T

 TCTP/FITC 熒光標(biāo)記翻譯控制蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh FLAP/5-lipoxygenase activating protein 5脂氧合激活蛋白抗體  0.2ml

P-PKC(Mouse phospho Protein Kinase C) ELISA Kit 小鼠磷化蛋白激C 96T

MDR1 多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體(C端) 0.1ml

phospho-AQP2(Ser264+261) 磷化通道蛋白2抗體 0.1ml

 TCTP/FITC 熒光標(biāo)記翻譯控制蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

IL-16(Human Interleukin 16) ELISA KIT 人白介16Multi-class antibodies: 48T

 GPR78 G蛋白偶聯(lián)受體78抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Morphine 抗體  0.2ml

Alpha2-MG(Human Alpha2 macroglobulin) ELISA Kit 人α2巨球蛋白 96T

Ran 雄受體相關(guān)蛋白24抗體 0.2ml

phospho-c-Abl (Tyr134) 磷化非受體酪激c-Abl抗體 0.1ml

 GPR78 G蛋白偶聯(lián)受體78抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rabbit  Monkey IgG/AP 性磷(AP)標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.1ml

GPR57 G蛋白偶聯(lián)受體57抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh ANGEL1 ANGEL1蛋白抗體  0.2ml

 IRS-4/FITC 熒光標(biāo)記胰島受體底物-4抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  horse IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗馬IgM  0.1ml

 SGK1/FITC 熒光標(biāo)記糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
狗源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)elisa檢測試劑盒

人尿苷二磷葡萄糖神經(jīng)酰葡萄糖基轉(zhuǎn)移(UGCG)elisa檢測試劑盒

人破骨因子1 (OSF)elisa檢測試劑盒

人血漿五聚蛋白3 (PTX 3/TSG-14)elisa檢測試劑盒

N-甲基-D-天氡離子能谷受體2A(GRIN2A)elisa檢測試劑盒

人輔肌動蛋白α4(ACTN4)elisa檢測試劑盒

人原(PT)elisa檢測試劑盒

人葡萄糖氧化(GOD)elisa檢測試劑盒

人前列腺I合(PTGIS)elisa檢測試劑盒

XVIII型膠原α1(COL18α1)elisa檢測試劑盒

人轉(zhuǎn)化生長因子β誘導(dǎo)蛋白(TGFβI)elisa檢測試劑盒

人前列腺D合成(PGDS)elisa檢測試劑盒

人酪2(Tyk-2)elisa檢測試劑盒

人衰老關(guān)鍵蛋白3(FBLN3)elisa檢測試劑盒

人球蛋白E Fc段受體I(FcεR I)elisa檢測試劑盒
PCR實驗步驟:

①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解,。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,,15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,,中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,,于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀,?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘,。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,,測定RNA溶液 濃度和純度,。


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