詳細(xì)介紹
檢測原理:
產(chǎn)品僅用于科研試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),。往預(yù)先包被抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度,。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
Rabbit luteotropic hormone (LH) ELISA Kit | FS-R5608 |
ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn):
1,、*抗體----高效、靈敏,、特異
2,、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,,空白值低,,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,,可靠性強(qiáng)
4,、購買本公司的ELISA試劑盒,免費(fèi)代測
5,、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),,規(guī)范,高效
6、適用于體液,、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7,、可檢測動物類型豐富:人,、猴、大鼠,、小鼠,、豚鼠、黃金地鼠,、兔,、豬、犬,、牛,、綿羊、山羊,、鵝,、雞、蝦,、河蟹,、鱸魚、斑馬魚等
8,、可檢測指標(biāo)齊全:炎癥因子,、血管生成素、動脈粥樣硬化因子,、趨化因子,、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9,、經(jīng)濟(jì),、實(shí)惠、可靠,,完善,、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,科研隊(duì)伍,,良好的實(shí)驗(yàn)設(shè)備,、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,是您可靠的合作伙伴,。?
操作要點(diǎn):
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,,體液(如血清),、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份,。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清,、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物),。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本,;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑、蒸餾水,、去離子水,、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,,即加標(biāo)本,,加酶結(jié)合物,加底物,。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),,即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后??乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過程稱為溫育,。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的最后一步溫育反應(yīng),,此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物,。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中,。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀,。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定。
Insulin-like growth factor 1胰島素樣生長因子1種屬: Sporobolomyces│japonicus日本擲孢酵母
Proinsulin胰島素原種屬: Cylindrocarpon│didymum雙生柱孢
Glucagon胰高血糖素種屬: Streptomyces│ochroleucus赭白鏈霉菌
ghcagons-like pepfide 1胰高血糖素樣肽1種屬: Eimeria│maxima巨型艾美爾球蟲(LZ株)
acetyl CoA carbosylase乙酰CoA羧化酶種屬: Namatoctonus│leiosporus光滑孢毒蟲霉
isocitrate dehydrogenase異檸檬酸脫氫酶種屬: Cytospora│atra (Bonord.) Sacc.桑(深色)殼囊孢
stearoyl-CoA desaturase-1硬脂酰輔酶A去飽和酶1種屬: Promicromonospora│vindobonensis維也納原小單孢菌
free haemoglobin游離血紅蛋白種屬: Escherichia│coli大腸埃希氏菌DH5a/phA3(1-308)
free fatty acids游離脂肪酸種屬: Agrocybe│pediades (Fr.) Fayod平田頭菇1-1
Protamine魚精蛋白種屬: Alternaria│napiformis Purkay. & Mallik芫菁鏈格孢
Progesterone孕酮種屬: Fusarium│catenulatum鏈狀鐮孢
Mucin 2粘蛋白2種屬: Micromonospora│fulvoviolacea暗黃紫小單孢菌
Lipoprotein-associated phospholipase A2脂蛋白磷脂酶A2種屬: Fusarium│oxysporum f.sp. cucumerinum J.H. Owen黃瓜枯萎病菌
lipoprotein lipase脂蛋白脂酶種屬: Rhytisma│salicinum (Pers.) Fr.柳樹漆斑病
Lipopolysaccharides脂多糖;內(nèi)毒素種屬: Mycosphaerella│dearnessii M.E. Barr松針座盤孢菌
兔子促黃體激素ELISA檢測試劑盒熱休克蛋白受體家族蛋白7B2抗體Varenicline tartra別名: 分子式: C17H19N3O6性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
Heme結(jié)合蛋白2抗體Cialis別名: Tadalafil; 他達(dá)那非分子式: C22H19N3O4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
肝細(xì)胞粘附分子2抗體Rosiglitazone別名: 分子式: C18H19N3O3S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
氨基己糖苷酶D抗體Losartan別名: 分子式: C22H23ClN6O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
HHLA2蛋白抗體Glyburide別名: Glibenclamide分子式: C23H28ClN3O5S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
羥脯氨抗體Metoclopramide別名: 分子式: C14H22ClN3O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
熱休克蛋白10抗體Amlexanox別名: 分子式: C16H14N2O4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
同源盒蛋白PRH抗體Amiodarone hydrochloride別名: 分子式: C25H30ClI2NO3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:
ELISA試驗(yàn)時(shí),,注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。有時(shí)本底較高,說明有非特異性反應(yīng),,可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉。
2. 產(chǎn)品僅用于科研在ELISA中,,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,,如聚氯乙烯、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板、試管,、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,,據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間,。吸附溫度,,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1,、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值,。選擇OD值而蛋白量少的濃度,。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份),。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價(jià)廉,、安全,、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,,尤其是H2O2在臨用前加入 ,。