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詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：森林腦炎病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號：FS-P013467
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,，而不能從無到有，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設計的引物,。可以是DNA也可以是RNA,，一般20多bp,，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,，擴增不同的基因需要設計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二,、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,，不加或添加石蠟油。 2．調整好反應程序,。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增,。一般：在93℃預變性3-5min,，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次,，zui后在72℃ 保溫7min,。 3．結束反應,，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油,，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,，以除去石蠟油；否則,，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,，各區(qū)實驗服、儀器,、耗材應獨立使用,，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭,；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解,，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測,；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理,。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照,。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,，并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),，并單獨存放,。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管,，并應避免在PCR反應管上進行任何標記,。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用,。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄,。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加。
4.除空白孔外,，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）,。
6.每孔加入底物A、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL，15min內,，在450nm波長處測定各孔的OD值,。
LDL-R/FITC 熒光標記低密度脂蛋白受體抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
SSTR1/FITC 熒光標記生長抑受體1(SSTR1)抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AGFG2 HIV-1病毒復制結合蛋白2抗體 0.2ml
Rabbit Guinea pig IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
GPR71 G蛋白偶聯(lián)受體71抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgG/AP 性磷(AP)標記的兔抗羊IgG 0.1ml
SSTR1/FITC 熒光標記生長抑受體1(SSTR1)抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
sm Actinin- Alpha(Human skeletal muscle Actinin- Alpha) ELISA Kit 人橫紋肌輔肌動蛋白αMulti-class antibodies： 48T
MMP-14 基質金屬蛋白-14抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Intra Acrosomal Protein/SP10 頂端體蛋白10抗體 0.2ml
IGFBP-2 ELISA Kit 大鼠胰島樣生長因子結合蛋白2 96T
PSMD9 蛋白調解因子9抗體 0.2ml
CPA3 肥大細胞羧肽A3抗體 0.2ml
MMP-14 基質金屬蛋白-14抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit pig IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗豬IgG 0.1ml
GATA5 GATA結合蛋白5抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ApoER2 載脂蛋白E2受體抗體 0.1ml
IL-4/FITC 熒光標記抗白介4抗體(人)IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MG IgG/Cy3 Cy3標記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml
Proteasome 20S LMP7 /FITC 熒光標記低分子質量蛋白7抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
森林腦炎病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒花楸本森頓酵母種屬: Bensingtonia│sorbi分離基物: Sorbus pohuashanensis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0013生長條件: 17℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
木賊鐮孢種屬: Fusariumequiseti分離基物: 花菜籽安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 轉化甾體培養(yǎng)基: 14,17生長條件: 25~28℃
肉桂色曲霉種屬: Aspergillus│cinnamomeus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0015生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)ELISA試劑盒亞硝 CP,95%5-基吲哚 99%硬脂紅霉
可溶性脂A2(sPL-A2)ELISA試劑盒四草，二 PT2-異煙 97%精
可溶性間皮相關肽(SMRP)ELISA試劑盒偏 AR肉桂酰 97%亞精
可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ELISA試劑盒鍺試劑 AR3-肉桂 98%亞精鹽
可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒鍺試劑 97%2-芐 99%多球殼菌,；嗜熱菌殺酵母（來源于無孢霉群）
可溶性核因子κB受體活化因子(sRANK)ELISA試劑盒高 99.99% metals basis2--5-甲 99%亞精鹽鹽
可溶性凋亡相關因子配體(sFASL)ELISA試劑盒N-基（釩試劑） AR,95%2--5-甲 97%N-甲?；?DL-精氨酰-4-鹽鹽
可溶性淀粉前體蛋白α(sAPPα)ELISA試劑盒N-基（釩試劑） 98%4-吲哚 98%栗精
可溶性蛋白185(sp185/HER-2)ELISA試劑盒焦銻 AR,99.0%2-基甲 98%精四鹽鹽;鹽精
可溶性彈性蛋白片段(sELAF)ELISA試劑盒1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚 AR,90.0% 2-甲硫基-5-嘧啶-4-甲 95%D-熒光鹽，D-蟲熒光鹽
可溶性半乳糖苷結合凝集3(Lgals3)ELISA試劑盒1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚 98%2--4-硝基吡啶 98%鹽替丁
可溶性白抗原G(sHLA-G)ELISA試劑盒多乙烯多 AR4-基吲哚 98%鹽雷丁(標準品)
可溶性白介7受體(sIL-7R)ELISA試劑盒檸檬二氫 AR,98.0%2--6-氟 98%熒光鈉
可溶性P選擇(sP-selectin)ELISA試劑盒氟氫化 AR,，99.0%2--N,N-二甲基乙酰 97%D-蟲熒光鈉鹽;D-熒光鈉鹽
可溶性OX40L(sOX40L)ELISA試劑盒氟氫化 CP,，98.0%4--2-三氟甲基喹啉 97%2ˊ,7ˊ-二熒光鈉鹽
可溶性E選擇(sE-selectin)ELISA試劑盒N-基硫脲 98%2--4-吡啶 95%天青I;天青B
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