詳細(xì)介紹
檢測原理:
產(chǎn)品僅用于科研試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被抗體的包被微孔中,,依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計(jì)算樣品濃度,。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
Mouse mucin / mucin 5AC (MUC5AC) ELISA Kit | FS-M5427 |
ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn):
1,、*抗體----高效、靈敏,、特異
2,、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,,空白值低,,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,,可靠性強(qiáng)
4,、購買本公司的ELISA試劑盒,免費(fèi)代測
5,、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),,規(guī)范,高效
6,、適用于體液,、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動物類型豐富:人,、猴,、大鼠,、小鼠、豚鼠,、黃金地鼠,、兔、豬,、犬,、牛、綿羊,、山羊,、鵝、雞,、蝦,、河蟹、鱸魚,、斑馬魚等
8,、可檢測指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素,、動脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶,、脂肪因子等等
9,、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠,、可靠,,完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,,科研隊(duì)伍,,良好的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,是您可靠的合作伙伴,。?
操作要點(diǎn):
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清),、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液,、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清,、尿液),,有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本,;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑,、蒸餾水、去離子水,、自配的緩沖液,;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,,加酶結(jié)合物,,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),,即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后,。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,,這一保溫過程稱為溫育,。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種,。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的最后一步溫育反應(yīng),,此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中,。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀,。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定。
fatty acid-binding protein脂肪酸結(jié)合蛋白種屬: Postia│stiptica柄生波氏孔菌
adipocyte fatty acid-binding protein脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白種屬: Sporosarcina│koreensis韓國芽孢八疊球菌
fatty acid-binding protein脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白種屬: Rhynchophoma│sp.喙殼霉
Lipofuscin脂褐素種屬: Paenibacillus│jamilae加米那類芽孢桿菌
Lipofuscin脂褐質(zhì)種屬: Phyllosticta│arida Earle干枯葉點(diǎn)霉
Lipid Sialic acid脂類唾液酸種屬: Hebeloma│nudipes (Fr.) Kalchbr.光柄滑銹傘
adiponectin Receptor 1脂聯(lián)素受體1種屬: Hypsizygus│ulmarius (Bull.) Redhead#榆生離褶傘
adiponectin Receptor 2脂聯(lián)素受體2種屬: Boletus│luridus Schaeff.黃褐色牛桿菌
lipoteichoic acids脂磷壁酸種屬: Bacillus│cereus Frankland and Frankland#蠟狀芽孢桿菌
acyl-CoA synthetase脂酰-CoA合成酶種屬: Gymnopilus│junonius (Fr.) P.D. Orton橙鱗傘6
Lipoxin A4脂氧素A4種屬: Monacrosporium│rutgeriense狂帶單頂孢
Bilirubin直接膽紅素種屬: Theileria│sergenti瑟氏泰勒蟲(成縣株)
Inter Alpha-Globulin Inhibitor H1中間α球蛋白抑制因子H1種屬: Ganoderma│atrum J. D. Zhao L. W. Hsu & X. Q. Zhang#黑靈芝
Inter Alpha-Globulin Inhibitor H4中間α球蛋白抑制因子H4種屬: Agrocybe│pediades (Fr.) Fayod平田頭菇10-6
Intermediary elements中介素種屬: Craterellus│humphik咖啡色喇叭菌
小鼠粘蛋白/粘液素5ACELISA檢測試劑盒FAM29蛋白抗體Cryptanoside A別名: Sarverogenin 3-O-oleandroside分子式: C30H42O10性狀: Powder純度: 98.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 古鉤藤,;強(qiáng)心苷,;甾苷;植物提取物,;天然產(chǎn)物,;天然產(chǎn)物庫
MaFF相關(guān)蛋白抗體Aspergillon A別名: 分子式: C22H32O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 對照品;標(biāo)準(zhǔn)品,;微生物代謝產(chǎn)物,;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
凝血因子7抗體Citrostadienol別名: 分子式: C30H50O性狀: Powder純度: 93.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 豆甾烷,;中藥對照品,;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物,;天然產(chǎn)物,;天然產(chǎn)物庫
FEM1B抗體Otophylloside B 4'''-O-β-D-oleandropyranoside別名: 分子式: C56H90O19性狀: Powder純度: 97.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 孕甾烷;植物提取物,;天然產(chǎn)物,;天然產(chǎn)物庫
纖維母細(xì)胞生長因子3抗體Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside別名: 分子式: C56H90O19性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 孕甾烷;植物提取物,;天然產(chǎn)物,;天然產(chǎn)物庫
纖維母細(xì)胞生長因子4抗體Bufotalin別名: 分子式: C26H36O6性狀: Powder純度: 98.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 蟾酥;強(qiáng)心苷,;中藥對照品,;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物,;天然產(chǎn)物,;天然產(chǎn)物庫
FRA-1蛋白抗體Tauroursodeoxycholic acid別名: TUDCA; 牛磺熊脫氧膽分子式: C26H45NO6S性狀: Powder純度: 96.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 膽烷,;中藥對照品,;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物,;天然產(chǎn)物,;天然產(chǎn)物庫
精神發(fā)育遲滯相關(guān)蛋白抗體Timosaponin B-II別名: Timosaponin BII; 知母皂苷BII分子式: C45H76O19性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 知母;甾苷,;中藥對照品,;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物,;天然產(chǎn)物,;天然產(chǎn)物庫
ELISA試驗(yàn)時(shí),,注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件,,待檢樣品應(yīng)作一式二份,,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉,。
2. 產(chǎn)品僅用于科研在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,,如聚氯乙烯、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板、試管,、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,,據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間,。吸附溫度,,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1,、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值,。選擇OD值而蛋白量少的濃度,。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份),。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價(jià)廉,、安全,、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,,應(yīng)注意防護(hù),。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時(shí)間,,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,,尤其是H2O2在臨用前加入 ,。