詳細介紹
組成及試劑配制:
1,、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,,請臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,,同時反復顛倒/搓動以助溶解,,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,,100 U/L,,50 U/L,25 U/L,,12.5 U/L,,6.25 U/L,3.12 U/L,,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,,其余濃度以此類推,。
3、 樣品稀釋液:1×20ml,。
4,、 檢測稀釋液A:1×10ml。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
250 mL | FS-P013305 |
使用方法:
一,、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標準品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照,。 2. 標記6個離心管,,分別為7,6,,5,,4,3,,2,。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同),。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。 5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩1分鐘,,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。 6. 換槍頭,,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。 7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用,。 | 二,、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,, 多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),, 一個是NC(樣品制備陰性對照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC,。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL,。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三,、設置qPCR反應(20 μL體系,,在樣品制備室進行) 10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照,。如果做2-3次重復,,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復,。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測,、DNA甲基化檢測,、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片,、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE,、SILAC、iTRAQ,、TMT,、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取,、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA,、CHIP,、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色,、特殊染色,、組織切片、免疫組化,、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS,、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞,、細胞模型,、動物模型構建
IL-31/FITC 熒光標記白細胞介31抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
TGF- Beta1/RBITC 紅色熒光羅丹明標記TGF-β1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Annexin A9 膜粘連蛋白9抗體 0.2ml
Rabbit mouse IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗小鼠IgM 0.1ml
GPR106 G蛋白偶聯(lián)受體106抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG/FITC FITC標記的兔抗人IgG 0.3ml
TGF- Beta1/RBITC 紅色熒光羅丹明標記TGF-β1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
IL-13(Human Interleukin 13) ELISA KIT 人白介13Multi-class antibodies: 48T
KiSS1R/GPR54 G蛋白偶聯(lián)受體54抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Morphine 抗體 0.2ml
LMP7/PSMB99Human low molecular-weight protein/proteasome beta-type subunit) ELISA Kit 人低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白體9 96T
RASSF8 RAS家族關聯(lián)結構域蛋白8抗體 0.2ml
CRLF2 胸腺基質(zhì)細胞生成受體抗體 0.2ml
KiSS1R/GPR54 G蛋白偶聯(lián)受體54抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit human IgM/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗人IgM 0.1ml
GMPPB GDP甘露糖焦磷化B抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Alpha casein α酪蛋白抗體 0.2ml
KLF5/FITC 熒光標記腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgM/Cy3 Cy3標記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml
SLC24A5/FITC 熒光標記可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白SLC24A5抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
非凍型血液DNA保存液小鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)elisa檢測試劑盒
小鼠骨鈣(OC/BGP)elisa檢測試劑盒
小鼠PDGFA相關蛋白1(PDAP1)elisa檢測試劑盒
小鼠纖溶-抗纖溶復合物(PAP)elisa檢測試劑盒
小鼠脊髓灰質(zhì)炎病受體相關蛋白2(PVRL2)elisa檢測試劑盒
小鼠硒蛋白P(SEPP1)elisa檢測試劑盒
小鼠血小板活化因子(PAF)elisa檢測試劑盒
小鼠白介3介導的核因子(NFIL3)elisa檢測試劑盒
小鼠核糖核苷H(RNASEH)elisa檢測試劑盒
小鼠分泌型磷脂A2(sPLA2)elisa檢測試劑盒
小鼠Sestrin 2蛋白 (SESN2) elisa檢測試劑盒
小鼠蛋白酪磷N型受體(PTPRN)elisa檢測試劑盒
小鼠肺表面活性物質(zhì)相關蛋白D(SP-D)elisa檢測試劑盒
小鼠煙酰腺二核苷磷(NADPH)elisa檢測試劑盒
小鼠呼吸道合胞病IgG(RSV-IgG) elisa檢測試劑盒
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋,。手動劇烈振蕩管體15秒后,,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液,,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,,使其*溶解,,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度,。