詳細介紹
組成及試劑配制:
1,、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,,請臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),,分別配制成200 U/L,,100 U/L,50 U/L,,25 U/L,,12.5 U/L,6.25 U/L,,3.12 U/L,,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,,其余濃度以此類推。
3,、 樣品稀釋液:1×20ml,。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml,。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
50次 | FS-P013466 |
使用方法:
一,、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標準品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照,。 2. 標記6個離心管,,分別為7,6,,5,,4,,3,2,。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同)。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩1分鐘,,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。 5. 換槍頭,,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。 6. 換槍頭,,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用,。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品,,必須設(shè)置N+2個提取,, 多出的一個是PC(樣品制備陽性對照), 一個是NC(樣品制備陰性對照),。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,,以此作為PC,。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,,則PC和NC的體積也必須是200μL,。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒,。 | 三,、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行) 10. 如果只做1次重復(fù),,則標記N+9個PCR管,,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照,。如果做2-3次重復(fù),,則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù),。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測,、DNA甲基化檢測,、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片,、表達譜芯片,、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC,、iTRAQ,、TMT、Label-free,、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取,、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot,、Co-ip EMSA,、CHIP、免疫熒光,、ELISA
6.病理檢測:HE染色,、特殊染色、組織切片,、免疫組化,、流式細胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS,、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞,、細胞模型、動物模型構(gòu)建
Leptin/FITC 熒光標記瘦抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SSTR2 /FITC 熒光標記生長抑受體2(SSTR2)抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AGFG1 艾滋病病毒復(fù)制結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
Rabbit Guinea pig IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
GPR70 G蛋白偶聯(lián)受體70抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗羊IgG 0.1ml
SSTR2 /FITC 熒光標記生長抑受體2(SSTR2)抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
PGE1(Human Prostaglandin E1) ELISA Kit 人前列腺EMulti-class antibodies: 48T
LPLUNC1 鼻咽癌癌基因抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh KLF9/BTEB1 轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體 0.1ml
CG ELISA Kit 大鼠絨毛膜促性腺 96T
PSME3 蛋白體激活因子PA28γ抗體 0.2ml
CNDP1 肌肽二肽1抗體 0.1ml
LPLUNC1 鼻咽癌癌基因抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit pig IgG/Cy5 Cy5標記的兔抗豬IgG 0.1ml
GCP2 粒細胞趨化蛋白2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh APOE4/Apolipoprotein E4 載脂蛋白E4抗體 0.2ml
IL-4R/FITC 熒光標記白細胞介4受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MG IgG/Bio 生物標記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml
Melamine/HRP 辣根過氧化物標記抗三聚胺抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
流行性出血熱病毒RT-PCR試劑盒弗勞地拘櫞桿菌種屬: Citrobacter│freundii提供形式: 其他安全等級: 3模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌種屬: Yersinia│enterocolitica提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 血清學(xué)分群(型) 41,42 生物1培養(yǎng)基: CM0116生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
福氏志賀氏菌種屬: Shigella│flexneri提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: B 4b IV 6...培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)ELISA試劑盒甲乙酯 ≥99%, FCC2-氨基-3-甲 98%化羅丹明110,;羅丹明110
可溶性腫瘤壞死因子受體2(sTNF-R2)ELISA試劑盒乙二雙(2-氨基乙基)四乙 AR2-溴-3-硝基吡啶 98%羅丹明123
可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)ELISA試劑盒乙二雙(2-氨基乙基)四乙 用于分子生物學(xué), ≥99.0%4-基甲 99%曲美布汀
可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒無甲 AR,,98%N-二甲基氮雜環(huán)丁-3- 98%6-羧基四甲基羅丹明;6-TAMRA
可溶性血小板內(nèi)皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒乙二縮雙(鄰氨基酚) 98%4-溴-2-甲氧基酚 98%6-羧基四甲基羅丹明琥珀酰亞酯,6-TAMRA, SE
可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)ELISA試劑盒乙二縮雙(鄰氨基酚) CP3-溴甲 99%卵清蛋白,;雞蛋白蛋白
可溶性血管內(nèi)皮粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒十七 AR,95.0%α-溴 97%米替福新
可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒靛藍二磺鈉 Biological stain3-溴-4-甲基吡啶 97%米替福新(標準品)
可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒三化 AR,97.0%N-Boc-4-甲 97%1-PP1萘
可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體1(sVEGF R1)ELISA試劑盒式碳鉛 AR,99.0%2,8-雙(三氟甲基)-4-羥基喹啉 99%阿利克侖半富馬鹽
可溶性胸苷激1(TK1)ELISA試劑盒式碳鉛 ACS3-溴磺酰 98%氟尼考,氟甲砜霉
可溶性腺苷環(huán)化(sAC)ELISA試劑盒發(fā)煙硝 AR二乙基膦?;沂宥□?95%氟尼考(標準品)
可溶性因子受體(sCKR)ELISA試劑盒間酚 IND2-溴-4-氟甲 98%埃博霉 D
可溶性間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒鹽萘乙二 AR,98%4-溴楊 97%左亞葉鈣;甲酰四氫葉鈣
可溶性髓系觸發(fā)受體-1(sTREM-1)ELISA試劑盒黑色(溶) Biological stain4-溴-2-(三氟甲基)甲 97%阿法替尼雙馬來鹽
可溶性瘦受體(sLR)ELISA試劑盒鹽萘乙二 ACS, >98%3-溴 98%胞鈉;5-胞苷二單鈉鹽
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,,室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋,。手動劇烈振蕩管體15秒后,,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液,,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀,?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,,測定RNA溶液 濃度和純度。