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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：人皰疹病毒8型染料法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-P013529
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一,、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有,，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA,，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì),。因此,，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中,，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油,。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上,，執(zhí)行擴(kuò)增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次,，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。 4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油,；否則,，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器,、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭,；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解,，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè),；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理,。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照,。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),，并單獨(dú)存放,。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記,。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用,。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄,。
Human elongin A,EloA ELISA Kit 人延伸蛋白AMulti-class antibodies： 48T
Sox2 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
ASGPR(Human asialoglyco protein receptor) ELISA Kit 人去唾液糖蛋白受體 96T
Phospho-eNOS (Ser1177) 磷化一氧化氮合成3(內(nèi)皮型)抗體 0.1ml
Bcl 2 like 13 protein Bcl2樣凋亡蛋白13抗體 0.2ml
Sox2 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
5-HT(Human 5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit 人5羥色胺Multi-class antibodies： 48T
LIX1 LIX1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh KLHL8 Kelch樣蛋白8抗體 0.2ml
PGI(Human prostacycline) ELISA Kit 人前列環(huán) 96T
Protein A 重組金黃色葡萄球菌蛋白A抗體 0.1ml
Cullin 4B CUL4B蛋白抗體 0.1ml
LIX1 LIX1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Donkey human IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml
GFM1 延伸因子G1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Aromatase 芳香化抗體 0.1ml
IFN- Gamma/FITC(Interferon Gamma) 熒光標(biāo)記抗大,、小鼠IFN-γ抗IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/AP 性磷(AP)標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.1ml
CD4/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記CD4抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
人皰疹病毒8型染料法熒光定量PCR試劑盒50次普通變形桿菌種屬: Proteus│vulgaris提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
芽孢桿菌種屬: Bacillus│atrophaeus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 防霉。培養(yǎng)基: CM0002生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
雌(E)ELISA試劑盒6-氨基-1-己 97%4-氟 99%油鈉(>98%,BR )
雌二受體(ER)ELISA試劑盒烯基基硅 98%1-氟-4- 98%四甲基化銨(>99%,BR)
雌二(E2)ELISA試劑盒丁炔二 98%4-氟酚 99%1-辛磺鈉(>98%,BC )
垂體腺苷環(huán)化激活肽(PACAP)ELISA試劑盒4-溴-2-氟 99%4－羥基－環(huán)己甲乙酯 98%2,3,5三甲(>97%,植物級(jí))
垂草扁桃(VMA)ELISA試劑盒甲基基硅 98%膽甲酯 97%3-吲哚丁(>98%,植物級(jí))
串珠(HSPG2)ELISA試劑盒2,6-二氟 97%?；敲撗跄?98%乙鈣一(>98%,BR)
穿孔/成孔蛋白(PRF1/PFP)ELISA試劑盒炔乙酯 99%甘膽鈉 98%三鈣(>98%,BR)
穿孔/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒2-氟-4-羥基 99%甘氨脫氧膽鈉 97%DL-硒代蛋氨(USP)
穿孔(PF)ELISA試劑盒N-甲基-1-萘鹽鹽 97%鵝去氧膽鈉 97%蜜二糖
遲現(xiàn)抗原4(VLA4)ELISA試劑盒炔 98%膽鈉 98%草鈉(>98%，BC)
程序性死亡因子4(PDCD4)ELISA試劑盒三基銻 97%1-乙基-2-吡酮 99%鎢鈉二(>98%,BR)
程序性死亡因子配體1(PD-L1/CD274)ELISA試劑盒2-(硅基)乙 98%γ -丁內(nèi)酯 AR, ≥99%丁二酐(>98%,BR)
程序性死亡-1(PD-1)ELISA試劑盒海藻 CPγ -丁內(nèi)酯 >99.9% (GC)四乙基化銨(>98%,BR)
成纖維生長(zhǎng)因子8(FGF8)ELISA試劑盒海藻 藥用級(jí)N-甲基吡咯酮 AR,99.0%吐溫60
成纖維生長(zhǎng)因子6(FGF6)ELISA試劑盒纖維粉 粒徑：90μmN-甲基吡咯酮 CP,98.0%甲噻;賽拉
成纖維生長(zhǎng)因子4(FGF4)ELISA試劑盒纖維粉 粒徑：50μmN-甲基吡咯酮 for HPLC, ≥99.5%酵母多糖 A(>98% (HPLC),BC)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,；
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL,；空白孔不加,。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。
6.每孔加入底物A,、B各50μL，37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。
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