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詳細介紹
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,，各區(qū)實驗服、儀器,、耗材應(yīng)獨立使用,，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭,；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解,，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測,；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理,。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照,。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),，并單獨存放,。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記,。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用,。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：鵝源性成分PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號：FS-P013346
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一,、試劑準備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有,，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA,，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計,。因此,，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中,，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油,。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上,，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min,。 3．結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油；否則,，直接取5-10μl電泳檢測,。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加,。
4.除空白孔外,，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A,、B各50μL,，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值。
Phospho-PKM2 (Tyr105) /FITC 熒光標記磷化丙酮激M2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TDAG51/FITC 熒光標記TDAG51抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADAMTSL3 整合樣金屬蛋白與樣2蛋白抗體 0.2ml
Rabbit chicken IgM/Cy7 Cy7標記的兔抗雞IgM 0.1ml
GCDFP15 特異性囊腫病液體蛋白15抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgG/AP 性磷(AP)標記的兔抗雞IgG 0.1ml
TDAG51/FITC 熒光標記TDAG51抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
AT(Human trypsin) ELISA Kit 人抗胰蛋白Multi-class antibodies： 48T
Mitofilin/IMMT 線粒體內(nèi)膜蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh LPAP 細胞磷蛋白磷相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
RBP(Human Retinol binding protein) ELISA Kit 人視黃醇結(jié)合蛋白 96T
RanBP1 RAN結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
COMT 兒茶酚O甲基移位抗體 0.1ml
Mitofilin/IMMT 線粒體內(nèi)膜蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit Monkey IgG/Gold 膠體金標記的兔抗猴IgG 2ml
GADD153 GADD153抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Anei-ATX/Autotaxin 自分泌運動因子抗體 0.1ml
IRS P53 /FITC 熒光標記胰島受體底物p53蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit horse IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗馬IgM 0.1ml
Phospho-SGK1 (Ser78)/FITC 熒光標記磷化糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
鵝源性成分PCR試劑盒人（TM）elisa檢測試劑盒
人平足蛋白（PDPN）elisa檢測試劑盒
人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4（GLUT4）elisa檢測試劑盒
人信號調(diào)節(jié)蛋白α（SIRPA）elisa檢測試劑盒
人轉(zhuǎn)化生長因子α（TGF-α）elisa檢測試劑盒
人可溶性OX40L蛋白（sOX40L）elisa檢測試劑盒
人骨成型蛋白5（BMP-5）elisa檢測試劑盒
人白介12 p35（IL-12 p35）elisa檢測試劑盒
人雷帕霉靶蛋白（mTOR）elisa檢測試劑盒
人磷甘油變位2（PGAM2）elisa檢測試劑盒
人球蛋白G Fc片段（Fcγ）elisa檢測試劑盒
人內(nèi)脂（VF）elisa檢測試劑盒
人皮膚反應(yīng)因子/炎性因子（SRF/IF）elisa檢測試劑盒
人色b5（CYB5A）elisa檢測試劑盒
人血小板內(nèi)皮粘附分子1（PECAM1/CD31）elisa檢測試劑盒
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