詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產品名稱:豬鏈球菌2型探針法熒光定量PCR試劑盒
產品貨號:FS-P013463
產品規(guī)格: 50次
產品分類:純化試劑盒
產品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,,而不能從無到有,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設計的引物,。可以是DNA也可以是RNA,,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計,。因此,,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油,。 2.調整好反應程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,,各區(qū)實驗服、儀器,、耗材應獨立使用,,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭,;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解,,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測,;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理,。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照,。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),,并單獨存放,。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,,并應避免在PCR反應管上進行任何標記,。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用,。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄,。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加,。
4.除空白孔外,,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板),。
6.每孔加入底物A、B各50μL,,37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,,在450nm波長處測定各孔的OD值,。
Human ox-LDL ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白Multi-class antibodies: 48T
SSTR3 生長抑受體3抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat human IgM whole serum 羊抗人IgM抗血清 1ml
CETP ELISA Kit 大鼠酯轉移蛋白 96T
NANOGP8 干細胞轉錄因子NANOGP8抗體 0.2ml
BAP31 BAP31蛋白抗體 0.1ml
SSTR3 生長抑受體3抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
HDV IgG(Human Hepatitis D virus IgG) ELISA Kit 人丁型肝炎IgGMulti-class antibodies: 48T
Ku-80 DNA修復Ku-80抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Laminin 1+2 層粘連蛋白1+2抗體 0.1ml
GR- Alpha(Human glucocorticoid receptor- Alpha) ELISA Kit 人糖皮質受體α 96T
PTBP1 核糖核結合蛋白1抗體 0.2ml
Cyclin B3 周期B3抗體 0.2ml
Ku-80 DNA修復Ku-80抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit pig IgG/APC APC標記的兔抗豬IgG 0.1ml
GPR78 G蛋白偶聯(lián)受體78抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APOE/Apo E2 載脂蛋白E抗體 0.1ml
IL-5R Alpha/CD125/FITC 熒光標記白介-5受體α鏈抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MG IgG/AP 性磷(AP)標記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml
PS-1/FITC 熒光標記早老蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
豬鏈球菌2型探針法熒光定量PCR試劑盒分枝桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium cosmeticum提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應用領域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法
分枝桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium parmense提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應用領域: 研究存儲條件: 真空冷凍干燥法
龜分支桿菌龜型亞種種屬: Mycobacterium│Mycobacterium chelonae subsp chelonae提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應用領域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法
乙型副傷寒沙門氏菌種屬: Salmonella│paratyphi B提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應用領域: 噬菌體分型用 1var.3 1,4,5 b 1,2培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
冷球蛋白(CG)ELISA試劑盒雙環(huán)己酮草酰二腙 98.0%間甲酚 >99.0% (GC)塞曲司特/西拉達司/塞拉司特
類粘蛋白2(ORM2)ELISA試劑盒溴 AR,,99.5%間甲酚 >98.0%(GC)美托拉宗
類粘蛋白(ORM)ELISA試劑盒二硫化碳 ACS, ≥99.9%間甲酚 分析標準品美托拉宗(標準品)
類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)ELISA試劑盒二硫化碳 for HPLC, ≥99.9%2-甲基-3- 98%西地尼布馬來鹽
類肌腱蛋白c(TNC)ELISA試劑盒銅片 AR,99.5% metals basis2-甲基-3- 分析標準品西他列汀
類肌腱蛋白(TN)ELISA試劑盒化鎘 AR,99.5%鹽芐絲肼 98%維達列汀;維格列汀
類固抗體(SCA)ELISA試劑盒次鈣 technical grade二甲硝咪唑 97%維達列汀;維格列汀(標準品)
類風濕因子(RF)ELISA試劑盒線狀氧化銅 AR4-羥基 98%鄰乙酰楊/阿司匹林
類白抗原G(HLA-G)ELISA試劑盒二磺鈉 IND甲硝唑 分析標準品,,>99.8%(GC)鄰乙酰楊/阿司匹林(標準品)
類白抗原E(HLA-E)ELISA試劑盒二磺鈉 ≥97.0% (HPLC)甲硝唑 99%奧利司他(發(fā)酵)
類白抗原C(HLA-C)ELISA試劑盒2,6-二-O-甲基-β-環(huán)糊精 98%2-溴-5-甲基噻吩 95%奧利司他(發(fā)酵)
類白抗原B27(HLA-B27)ELISA試劑盒1,2-環(huán)己二四乙(DCTA) AR,97.0%4-溴-2-甲基噻吩 98%鹽尼卡地平
類白抗原A(HLA-A)ELISA試劑盒反式-1.2-環(huán)己二四乙 98%2-乙基噻吩 97%鹽尼卡地平(標準品)
雷帕霉靶蛋白(mTOR)ELISA試劑盒二安替比林 AR2-羥基-5-硝基吡啶 98%維地平丁酯/丁維地平
酪氨酰tRNA合成(YARS)ELISA試劑盒二安替比林 CP2-硫脲嘧啶 98%孟魯司特鈉
酪氨酰DNA二酯1(TDP1)ELISA試劑盒二安替比林 98%2-硫脲嘧啶 分析標準品孟魯司特鈉(標準品)