詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1,、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2,、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,,其濃度為200 U/L,,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,,100 U/L,,50 U/L,25 U/L,,12.5 U/L,,6.25 U/L,3.12 U/L,,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,,其余濃度以此類推。
3,、 樣品稀釋液:1×20ml,。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml,。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
50次 | FS-P013449 |
使用方法:
一,、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標(biāo)記6個離心管,,分別為7,,6,5,,4,,3,2,。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同)。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩1分鐘,,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。 5. 換槍頭,,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。 6. 換槍頭,,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用,。 | 二,、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,, 多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),, 一個是NC(樣品制備陰性對照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC,。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒,。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),,則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,,1個用于PCR陰性對照,,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),,則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍,。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片,、SNP檢測、DNA甲基化檢測,、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片,、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片,、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE,、SILAC、iTRAQ,、TMT,、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取,、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA,、CHIP,、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色,、特殊染色,、組織切片、免疫組化,、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS,、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞,、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建
LFABP/FABP-2 /FITC 熒光標(biāo)記肝臟型脂肪結(jié)合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
STAT2/FITC 熒光標(biāo)記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2(STAT2)抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AFP 甲胎蛋白AFP抗體 0.1ml
Rabbit Guinea pig IgG/Bio 生物標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
Gibberellins 磺/β-基乙磺抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗狗IgG 0.3ml
STAT2/FITC 熒光標(biāo)記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2(STAT2)抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
LH(Human luteotropic hormone) ELISA Kit 人促黃體Multi-class antibodies: 48T
Phospho-PKM2 (Tyr105) 磷化丙酮激M2抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh KIF17 驅(qū)動蛋白家族KIF17抗體 0.2ml
T ELISA Kit 大鼠睪酮 96T
PTK9 蛋白酪激9抗體 0.2ml
phospho-CDKN2A (Ser8) 磷化抑癌基因p16抗體 0.1ml
Phospho-PKM2 (Tyr105) 磷化丙酮激M2抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit rat IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.3ml
GAPDH 3-磷甘油脫氫(兔來源組化用抗體) 0.1ml
Rhesus antibody Rh APOA1 載脂蛋白A1抗體 0.1ml
IL-11/FITC 熒光標(biāo)記白介11抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human sIgA/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記兔抗人IgA 0.1ml
Patched/PTCH /FITC 熒光標(biāo)記Hh信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑膜蛋白受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
禽副粘病毒4型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒丁香假單胞菌種屬: Pseudomonas│syringae分離基物: 天牛腸道提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 飼料用纖維、植,、木聚糖等的篩選培養(yǎng)基: 0002生長條件: 26℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法;礦物油法
藤黃色土生單胞菌種屬: Terrimonas│lutea提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
串珠鐮孢種屬: FusariummoniliformeSheldon安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 九二0產(chǎn)生菌培養(yǎng)基: 14,17生長條件: 25-28℃
凝結(jié)芽孢桿菌種屬: Bacilluscoagulans分離基物: 土壤安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 104生長條件: 37℃
原前體蛋白(PIVKA-II)ELISA試劑盒正 ACS, ≥99.5%2,7-二溴芴 98%睪酮,
原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒正 分析標(biāo)準(zhǔn)品1,4-二酞 98%睪酮(標(biāo)準(zhǔn)品)
原(PT)ELISA試劑盒正 農(nóng)殘級4,4'-二聯(lián) 98%鹽丁卡因
血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物(T-TM)ELISA試劑盒 AR,≥99.5% (GC) 9-芴甲 99% 鹽丁卡因(標(biāo)準(zhǔn)品)
受體(TR)ELISA試劑盒 ≥99.5%, FCC, FG雙酚芴 98%甲唑啉鹽鹽/鹽妥拉唑林
敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒松油,異構(gòu)體混合物,CP(R)-3-(3-氟基)-5-羥甲基惡唑-2-酮 98%托特羅定
抗復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒正戊 CP,98%(S)-N-[[3-(3-氟基)-2-氧代-5-惡唑基]甲基]乙酰 98%托特羅定(標(biāo)準(zhǔn)品)
(TM)ELISA試劑盒正戊 >99% (GC)高良姜 98%托吡酯
(Thrombin)ELISA試劑盒4,4,4-三氟乙酰乙乙酯 98%2-羥基-6-甲基吡 98%托吡酯(標(biāo)準(zhǔn)品)
凝溶膠蛋白(GS)ELISA試劑盒乙酰乙甲氧乙酯 96%4--1-甲基-1H-吡唑 97%VX-680/MK0457,,陶扎色替
凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒石墨 99.95% metals basis4--1H-咪唑 97%曲司銨
凝聚(CLU)ELISA試劑盒石墨 99%,40nm1-(2-乙基)-2-甲基-5-硝基-1H-咪唑 98%AG-014699
凝膠原蛋白(gelson)ELISA試劑盒石墨 CP,99.85%1-甲基-D-色氨 96%卡非佐米
尿腫瘤壞死因子相關(guān)誘導(dǎo)凋亡配體死亡受體4(TRAIL-DR4)ELISA試劑盒石墨 D50<400nm,,99.95%2-磺酰 98%CEP-18770
尿游離皮質(zhì)(UFC)ELISA試劑盒石墨 99.95%,,8000目(S)-2-硝基-6,7-二氫-5H-咪唑并[2,1-b][1,3]惡-6- 98%地馬格列
尿微量白蛋白(MAU/ALB)ELISA試劑盒鐿 99.9%,塊狀吡唑-3-甲酰 97%鹽諾拉曲噻
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,,室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋,。手動劇烈振蕩管體15秒后,,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液,,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀,?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度,。