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詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：豬源性成分核酸檢測試劑盒48T0.1PCR管
產(chǎn)品貨號：FS-02R6387
產(chǎn)品規(guī)格：48T 0.1PCR管
產(chǎn)品分類：PCR-熒光探針法
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一,、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有,，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA,，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計,。因此,，擴增不同的基因需要設計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中,，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油,。 2．調(diào)整好反應程序,。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上,，執(zhí)行擴增,。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次,，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應,，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,，以除去石蠟油,；否則，直接取5-10μl電泳檢測,。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服,、儀器,、耗材應獨立使用，不能混用,；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭,；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解,，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測,；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理,。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照,。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),，并單獨存放,。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管,，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置,；不同批號試劑不能混用,。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None,。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄,。
MIP4/CCL18/FITC 熒光標記巨噬細胞炎癥蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TP53/FITC 熒光標記抗P53抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ACADL 酰基A脫氫長鏈抗體 0.1ml
Rabbit Avidin/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗親和 0.1ml
GPR125 G蛋白偶聯(lián)受體125抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Avidin/Bio 生物標記的兔抗親和 0.1ml
TP53/FITC 熒光標記抗P53抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
AMA(Human Monocyte antibody) ELISA Kit 人抗單核細胞抗體Multi-class antibodies： 48T
IL-4 (human) 白介4抗體(人)Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh LRFN3/SALM4 神經(jīng)突觸粘附樣分子4抗體 0.2ml
OH-PYD(Human Hydroxy-Pyridinium crosslinks) ELISA Kit 人羥基膠原交聯(lián) 96T
Ribonuclease 6 核糖核6抗體 0.2ml
CDC14B 細胞分裂周期蛋白14B抗體 0.2ml
IL-4 (human) 白介4抗體(人)Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit Goat IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗羊IgG 0.1ml
phospho-GluR1 (Ser645) 磷化谷受體1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ADH/AVP 抗/血管升壓抗體(和肽) 0.1ml
LPL/FITC 熒光標記脂蛋白脂抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgM/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗雞IgM 0.1ml
Gamma-Synuclein/SNCG /FITC 熒光標記核突觸蛋白-γ抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
豬源性成分核酸檢測試劑盒48T0.1PCR管紫色姜Purple ginger
沙苑子Astragalus complanatus
葉下珠Ye Xiazhu
梨果Rosa roxburghii Tratt fruit
牛黃Bezoar
石椒草Shi Jiaocao
地膽草Elephantopus scaber
吉祥草Auspicious grass
金櫻根Jin Yinggen
伸筋草Lycopodium clavatum
薄芝菌絲體粉Bozhi?mycelium powder
槐米Sophora japonica
雞眼睛Chicken?FS-es
梨葉Rosa roxburghii leaf
珊瑚姜Coral?ginger
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加。
4.除空白孔外,，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）,。
6.每孔加入底物A,、B各50μL，37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值,。
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