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詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：酵母化學感受態(tài)細胞制備試劑盒20次
產(chǎn)品貨號：FS-P013336
產(chǎn)品規(guī)格：20次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,，而不能從無到有，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物,。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp,，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計,。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP,、dCTP,、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二,、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應程序,。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增,。一般：在93℃預變性3-5min,，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次,，zui后在72℃ 保溫7min,。 3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油,，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油,；否則,，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,，各區(qū)實驗服、儀器,、耗材應獨立使用,，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭,；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解,，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測,；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理,。
3.每次實驗應該設(shè)置陰,、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,，并應瞬時離心,。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放,。
6.為防止熒光干擾,，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記,。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置,；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,，淬滅基因選擇None,。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加。
4.除空白孔外,，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）,。
6.每孔加入底物A、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值,。
Collagenase II ELISA Kit 大鼠膠原IIMulti-class antibodies： 48T
Tenascin C/Tn-C 細胞粘合(固生蛋白)抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh GluR1/AMPA 谷受體1抗體 0.1ml
Pro-ANP(Mouse Pro Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit 小鼠前心鈉肽 96T
NDUFV1 NADH脫氫黃蛋白1抗體 0.2ml
Apelin 脂肪炎癥因子Apelin抗體 0.1ml
Tenascin C/Tn-C 細胞粘合(固生蛋白)抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Apaf-1(Human apoptosis protease activating factor-1) ELISA Kit 人凋亡蛋白激活因子1Multi-class antibodies： 48T
HDAC10 組蛋白去乙酰化10抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MEIS1 同源盒蛋白Meis1抗體 0.1ml
ICD(Human isocitrate dehydrogenase) ELISA Kit 人異檸檬脫氫 96T
RAP1GDS1 G蛋白GTP-GDP解離刺激因子1抗體 0.1ml
C1orf192 1號染色體開放閱讀框192抗體 0.2ml
HDAC10 組蛋白去乙酰化10抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit mouse IgG-Fc/Bio 生物標記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
GOLGA7 高爾基體膜相關(guān)蛋白7抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Amphiregulin 雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸細胞源性生長因子)抗體 0.1ml
Integrin Alpha6/CD49f/VLA-6/FITC 熒光標記整合α6抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit horse IgG/Gold 膠體金標記的兔抗馬IgG 0.5ml
phospho-SHC (Tyr349) /FITC 熒光標記磷化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
酵母化學感受態(tài)細胞制備試劑盒20次人線粒體肌1B（CKMT1B）elisa檢測試劑盒
人胸腺表達趨化因子（TECK/CCL25）elisa檢測試劑盒
人脫氫表雄酮S7（DHEA-S7）elisa檢測試劑盒
人胃泌抑制肽（GIP）elisa檢測試劑盒
人基質(zhì)金屬蛋白23B（MMP23B）elisa檢測試劑盒
人角蛋白21-1片段（CYFRA21-1）elisa檢測試劑盒
人纖維介蛋白（FGL2）elisa檢測試劑盒
人TERF1相互作用核因子2（TINF2）elisa檢測試劑盒
人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物（GTEAGE）elisa檢測試劑盒
人纖維蛋白原α（FGα）elisa檢測試劑盒
人?；囸I（A-GHRL） elisa檢測試劑盒
人補體因子H相關(guān)蛋白4（CFHR4）elisa檢測試劑盒
人組織型纖溶原活因子（tPA）elisa檢測試劑盒
人纖維蛋白（FBL）elisa檢測試劑盒
人小泛相關(guān)修飾蛋白2 （SUMO2）elisa檢測試劑盒
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