詳細介紹
檢測原理:
產(chǎn)品僅用于科研試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被抗體的包被微孔中,,依次加入標本,、標準品、HRP標記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度,。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
Monkey heat shock protein 96 (HSP gp96) ELISA Kit | FS-M5842 |
ELISA試劑盒優(yōu)點:
1、*抗體----高效,、靈敏,、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,,空白值低,,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復性高,,可靠性強
4,、購買本公司的ELISA試劑盒,免費代測
5,、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),,規(guī)范,高效
6,、適用于體液,、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液,、尿液等多種類型的樣本
7,、可檢測動物類型豐富:人、猴,、大鼠,、小鼠、豚鼠,、黃金地鼠,、兔、豬,、犬、牛,、綿羊,、山羊、鵝,、雞,、蝦、河蟹,、鱸魚,、斑馬魚等
8、可檢測指標齊全:炎癥因子,、血管生成素,、動脈粥樣硬化因子、趨化因子,、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶,、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟、實惠,、可靠,,完善、穩(wěn)定的實驗體系,,科研隊伍,,良好的實驗設(shè)備、準確可靠的實驗結(jié)果,,是您可靠的合作伙伴,。
?
操作要點:
1)標本的采取和保存:可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清),、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液,、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清,、尿液),,有些則需經(jīng)預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本,;
2)試劑的準備:所需試劑,、蒸餾水、去離子水,、自配的緩沖液,;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標本,,加酶結(jié)合物,,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),,即加標本和加酶結(jié)合物后,。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,,這一保溫過程稱為溫育,。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種,。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的后一步溫育反應(yīng),,此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,,然后將板正確放入酶標比色儀的比色架中,。儀器準備為酶標儀。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定,。
Vitamin B12維生素B12種屬: Microascus│lunasporus新月孢小囊菌
Vitamin B13維生素B13種屬: Tilachlidium│sp.多頭束霉
Ghrelin胃饑餓素種屬: Leuconostoc│gelidum硬明串珠菌
ghcagons-like pepfide 1胰高血糖素樣肽1種屬: Propionibacterium│thoenii特氏丙酸桿菌
Vasoactive Intestinal Peptide血管活性腸肽種屬: Halomonas│kribbensis克利伯研所鹽單胞菌
Substance PP物質(zhì)種屬: Eupenicillium│cryptum隱藏正青霉
Motilin胃動素種屬: Myceliophthora│thermophila嗜熱絲霉
Gastrin胃泌素種屬: Hypocrea│virens變綠肉座菌
Hepatitis A virus甲型肝炎病毒種屬: Nocardioides│marinisabuliNocardioides marinisabuli
Hepatitis D virus丁型肝炎病毒種屬: Salmonella│gallinarum雞沙門氏菌
Herpes simplex virus I單純皰疹病毒I種屬: Amycolatopsis│decaplaninaAmycolatopsis decaplanina
Herpes simplex virus II單純皰疹病毒II種屬: Staphylococcus│pseudintermedius假中間葡萄球菌
Herpes simplex virus III單純皰疹病毒III種屬: Staphylococcuscarnosussubsp.carnosusStaphylococcuscarnosussubsp.carnosus
papilloma virus瘤病毒種屬: Flammeovirga│pacifica太平洋火色桿菌
A Disintegrin And Metalloprotease 7金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白7種屬: Bifidobacterium│ruminantium反芻雙歧桿菌
猴子熱休克蛋白糖蛋白96ELISA檢測試劑盒人蛋白激酶B(PKB)ELISA Kit,,48T/96T 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,,非食用
小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: Bacillus circulans
大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Streptomyces globisporus(Krassilnikov) Waksman
人磷酸肌3激酶(PI3K)ELISA Kit,,48T/96T 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,,非食用
小鼠磷酸肌3激酶(PI3K)ELISA Kit,,48T/96T 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,,非食用
大鼠磷酸肌3激酶(PI3K)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Penicillium chrysogenum
人白介素23(IL-23)ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: Newcastle disease virus
小鼠白介素23(IL-23)ELISA Kit,,48T/96T 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,,非食用
ELISA試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準確性,。有時本底較高,,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉,。
2. 產(chǎn)品僅用于科研在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯,、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板,、試管,、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,,據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間,。吸附溫度,,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時,。蛋白質(zhì)包被適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度,。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml,。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度,。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全,、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,,應(yīng)注意防護,。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時間,,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,,尤其是H2O2在臨用前加入 ,。