詳細介紹
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2,、 標準品(凍干品): 2瓶,,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,,其濃度為200 U/L,,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),,分別配制成200 U/L,100 U/L,,50 U/L,25 U/L,,12.5 U/L,6.25 U/L,,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,其余濃度以此類推,。
3,、 樣品稀釋液:1×20ml,。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml,。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途,!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
10次 | FS-P013334 |
使用方法:
一,、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標準品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照,。 2. 標記6個離心管,分別為7,,6,5,,4,,3,,2,。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同),。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。 5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩1分鐘,,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。 6. 換槍頭,,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。 7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照,。放冰上待用,。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品,,必須設置N+2個提取,, 多出的一個是PC(樣品制備陽性對照), 一個是NC(樣品制備陰性對照),。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,,以此作為PC,。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒,。 | 三、設置qPCR反應(20 μL體系,,在樣品制備室進行) 10. 如果只做1次重復,,則標記N+9個PCR管,,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,,6個用于PCR陽性對照,。如果做2-3次重復,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍,。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復,。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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實驗外包:
1.基因組學:基因芯片,、SNP檢測,、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片,、LncRNA芯片,、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE,、SILAC,、iTRAQ、TMT,、Label-free,、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot,、Co-ip EMSA、CHIP,、免疫熒光,、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色,、組織切片,、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS,、LC-MS,、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型,、動物模型構建
MAGE-1/HLA-A1 protein /FITC 熒光標記黑瘤抗原-1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Tenascin/TN /FITC 熒光標記細胞粘合抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADAMTS2 整合樣金屬蛋白與2型抗體 0.2ml
Rabbit chicken IgM/AP 性磷(AP)標記的兔抗雞IgM 0.1ml
GOLPH2 高爾基體膜蛋白GP73抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bovine IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗IgM 0.1ml
Tenascin/TN /FITC 熒光標記細胞粘合抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
P I CP(Human procollagen III N-terminal peptide) ELISA Kit 人Ⅰ型前膠原羧基端肽Multi-class antibodies: 48T
influenza B virus nucleoprotein 流感B核蛋白單克隆抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAP4K1 造血祖細胞激1抗體 0.1ml
PLSCR1(Human phospholipid scramblase 1) ELISA KIT 人磷脂爬行1 96T
Rap2A Rap2A抗體 0.2ml
Protective protein 組織蛋白A抗體 0.1ml
influenza B virus nucleoprotein 流感B核蛋白單克隆抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit mouse IgG-Fc/HRP 辣根過氧化物標記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
GOLGA5 高爾基體膜相關蛋白5抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Amphiphysin 神經(jīng)元突觸前膜蛋白抗體 0.2ml
Jab1/FITC 熒光標記Jun激活區(qū)域-連接蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit horse IgG/FITC FITC標記的兔抗馬IgG 0.3ml
phospho-SHC (Tyr427) /FITC 熒光標記磷化SH2結(jié)構域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
3'RACE試劑盒人端粒重復結(jié)合因子2(TERF2)elisa檢測試劑盒
人上皮粘附分子(Ep-CAM/CD326)elisa檢測試劑盒
人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG-1)elisa檢測試劑盒
人生長2(GH2)elisa檢測試劑盒
人氧固醇結(jié)合蛋白樣蛋白1A(OSBPL1A)elisa檢測試劑盒
人生長誘導跨膜蛋白(GHITM)elisa檢測試劑盒
人嗜性白血球相關之RNA解酵家族成員12(EAR12)elisa檢測試劑盒
人速肽受體1(TACR1)elisa檢測試劑盒
人糖蛋白V(GP5)elisa檢測試劑盒
人因子信號轉(zhuǎn)導抑制因子3(SOCS3)elisa檢測試劑盒
人角蛋白10(KRT10)elisa檢測試劑盒
人谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移μ2(GSTμ2/GSTm2)elisa檢測試劑盒
人唾液(SA)elisa檢測試劑盒
人胃蛋白原A(PGA)elisa檢測試劑盒
人纖維母表面抗原(FSP)elisa檢測試劑盒
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,,蓋緊管蓋,。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),,清洗RNA沉淀,。混勻后,,4℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,,測定RNA溶液 濃度和純度。