參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng):巴爾通體通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013539
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類(lèi):純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
![9.jpg 9.jpg](https://img76.chem17.com/0052540b3e6e2c7dab4a2c1d7dc87706c8bbd0cfc50cdf4f250abfd4246aed7d1f24f248ac7c8b27.jpg)
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,,而不能從無(wú)到有,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,,一般20多bp,,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二,、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min,。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。 4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器,、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭,;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解,,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理,。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰,、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,,并應(yīng)瞬時(shí)離心,。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放,。
6.為防止熒光干擾,,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記,。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置,;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,,淬滅基因選擇None,。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
Laminin alpha5/FITC 熒光標(biāo)記層粘蛋白α5抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Socs 3/FITC 熒光標(biāo)記細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)抑制蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKR1B1 糖還原抗體 0.2ml
Rabbit horse IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.5ml
GPR158 G蛋白偶聯(lián)受體GPR158蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.3ml
Socs 3/FITC 熒光標(biāo)記細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)抑制蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
sVE-Cadherin (Human Vascular Endothelial-Cadherin Complex) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體Multi-class antibodies: 48T
PAG608 p53活化基因608單克隆抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HSD3B1 滋養(yǎng)層細(xì)胞抗原3β-HSD抗體 0.1ml
T3(Mouse Tri-iodothyronine)ELISA Kit 小鼠狀腺原 96T
Proteasome 20S alpha 3(Ser250) 磷化蛋白體PSMα3抗體 0.1ml
Chordin 原腸胚雙向形成相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
PAG608 p53活化基因608單克隆抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Donkey human IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml
GCAP2 鳥(niǎo)苷環(huán)化激活蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARSF 芳香基酯F抗體 0.2ml
IDE/FITC 熒光標(biāo)記胰島降解抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/HRP 辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.1ml
PKN2 /FITC 熒光標(biāo)記蛋白激N2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
巴爾通體通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次刺糖多孢菌種屬: Saccharopolyspora│spinosa提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 609生長(zhǎng)條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
土地鹽紅菌種屬: Halorubrum│terrestre提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0212生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
香菇種屬: Lentinula│edodes提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 食用培養(yǎng)基: 0017生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
維涅蘭德固氮菌種屬: Azotobacter│vinelandii提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: C*tion (3363). Fixes nitrogen. Preservation (3363).培養(yǎng)基: 0063生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法,;礦物油法;定期移植法
白介6(IL-6)ELISA試劑盒N-2-哌-N'-2-乙磺鈉鹽 99.5%L-亮氨乙酯鹽鹽 99%氫鋁(>98%,BR)
白介5受體alpha(IL5RA)ELISA試劑盒磺鈉 98%L-亮氨甲酯鹽鹽 98%銨三(>98%,BR)
白介-5(IL-5)ELISA試劑盒對(duì)羥基甲鈉 CP,98%4'-甲氧基酮 99%碳鋇(>99%,BR)
白介5(IL-5)ELISA試劑盒對(duì)羥基甲鈉 99%對(duì)酮 96%甲酰(>98%,BR)
白介4受體(IL4R/CD124)ELISA試劑盒N-2-哌-N'-2-乙磺 99%香豆靈甲酯 98%比布里希猩紅(>90%,BS)
白介4(IL-4)ELISA試劑盒魯米諾 98%4-甲基-2-氧戊 98%檸檬鈣,;檸檬鈣四
白介37(IL-37)ELISA試劑盒3-(N-啉)磺鈉 99.5%(T)6-硝基吲唑 98%硫銫(分子生物學(xué)級(jí))
白介35(IL-35)ELISA試劑盒N,,N′-烯酰 CP,97%4-吡啶-4-基甲 98%銅片
白介33(IL-33)ELISA試劑盒N,N′-烯酰 for electrophoresis, ≥99.0% (T)4-甲氧基酮 98%化亞銅(>97%,BR)
白介32(IL-32)ELISA試劑盒N,,N′-烯酰 for molecular biology, ≥99.0% (T)酮 98%化亞銅(>99%,BR)
白介31(IL-31)ELISA試劑盒 嗎啉乙磺,一 分子生物學(xué)級(jí), ≥99% (T)酮 99%2'-脫氧鳥(niǎo)苷5'二二鈉鹽
白介3(IL-3)ELISA試劑盒3-(N-啉)磺 99%L-氨乙酯鹽鹽 98%D-葡萄糖鈉(> 98%,,BR)
白介2誘導(dǎo)的T激(ITK)ELISA試劑盒嗎啉乙磺鈉鹽 99%2-羥基喹喔啉 99%乙二四乙二鈉一鈣鹽
白介2受體(IL-2R)ELISA試劑盒6-甲氧基喹啉 96%牛磺脫氧膽 98%聚蔗糖70
白介2受體(IL2R)ELISA試劑盒3-甲基-2-并噻唑酮腙鹽鹽,,合 98%4-叔丁基芐 99%碳胍(>98%,BR)
白介2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒酚試劑 AR,98.0%2-氨基甲叔丁酯 97%六次甲基四(>99%,,BC)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL,;空白孔不加,。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A,、B各50μL,37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。