詳細(xì)介紹
檢測(cè)原理:
產(chǎn)品僅用于科研試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被抗體的包被微孔中,,依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度,。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
Rat beta defensin (beta -Defensins) ELISA Kit | FS-R4497 |
ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn):
1,、*抗體----高效、靈敏,、特異
2,、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,,空白值低,,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,,可靠性強(qiáng)
4,、購(gòu)買本公司的ELISA試劑盒,免費(fèi)代測(cè)
5,、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),規(guī)范,,高效
6,、適用于體液、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測(cè)動(dòng)物類型豐富:人,、猴,、大鼠、小鼠,、豚鼠,、黃金地鼠、兔,、豬,、犬、牛,、綿羊,、山羊、鵝,、雞,、蝦、河蟹,、鱸魚,、斑馬魚等
8,、可檢測(cè)指標(biāo)齊全:炎癥因子,、血管生成素,、動(dòng)脈粥樣硬化因子、趨化因子,、生長(zhǎng)因子基質(zhì)金屬蛋白酶,、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟(jì),、實(shí)惠,、可靠,完善,、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,,科研隊(duì)伍,良好的實(shí)驗(yàn)設(shè)備,、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,是您可靠的合作伙伴。
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操作要點(diǎn):
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液,、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份,。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清,、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物),。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑,、蒸餾水、去離子水,、自配的緩沖液,;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,,加酶結(jié)合物,,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),,即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后,。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,,這一保溫過程稱為溫育,。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動(dòng)洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種,。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的后一步溫育反應(yīng),,此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中,。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定,。
冷解糖芽孢桿菌 種屬:Bacillus psychrosaccharolyticus 描述 菌體桿狀,,單個(gè)或呈鏈狀,產(chǎn)芽孢,;菌落較小,,淡酪黃色,半透明,,表面光滑,,邊緣圓整
食瓊脂類芽孢桿菌 種屬:Paenibacillus agaridevorans 描述 細(xì)胞桿狀、具運(yùn)動(dòng)性,、產(chǎn)芽孢,橢圓,,不膨大,;培養(yǎng)38小時(shí)后為革蘭氏陰性;菌落酪白色,,緊貼培養(yǎng)基生長(zhǎng),,邊緣圓整,略凸起
埃特*瘤菌 種屬:Rhizobium etli 描述 菌體桿狀,,具圓端,,成堆排列;菌落呈乳白色,半透明,,邊緣圓整,,表面有光澤,分泌粘狀物質(zhì)
金黑小單胞菌 種屬:Micromonospora auratinigra 描述 菌落較小,,淡桔黃色,,無光澤,基內(nèi)菌絲多分叉,肉色,,孢子單生,,圓或橢圓形,長(zhǎng)于氣生菌絲上,,氣生菌絲斷裂
苜蓿中華根瘤菌 種屬:Sinorhizobium meliloti 描述 菌體桿狀,,具圓端,成堆排列,;菌落呈乳白色,半透明,,邊緣圓整,表面有光澤,,分泌粘狀物質(zhì)
木糖氧化產(chǎn)堿桿菌 種屬:Alcaligenes xylosoxidans 描述 革蘭氏陰性菌,,短桿狀,無芽孢,,菌落淺黃色,,形態(tài)規(guī)則,近圓形,,中央略突起,,可在草甘膦濃度為500mmol/L M9限制性培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好。對(duì)安卞青霉素(Ap),、霉素(Cm),、四環(huán)素(Tc)、卡那霉素(Km)均有抗性,。在pH3-9均能生長(zhǎng)良好,。
岸濱芽孢桿菌 種屬:Bacillus lisoralis 描述 菌落圓形,乳白色,,混濁不透明,,表面光滑濕潤(rùn),邊緣整齊,。
人葡萄球菌 種屬:Staphylococcus hominis 描述 革蘭氏陽性球菌,,球形或稍呈橢園形,直徑1.0um左右,,排列成葡萄狀,。無鞭毛,不能運(yùn)動(dòng),。無芽胞,,不形成莢膜。在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,,需氧或兼性厭氧,,28-38℃均能生長(zhǎng),,在瓊脂平板上形成圓形凸起,邊緣整齊,,表面光滑,,濕潤(rùn)的菌落。
沙地芽孢桿菌 種屬:Bacillus aquimaris 描述 桿狀,,末端圓,。單個(gè)或呈短鏈排列。1.2~1.5×2.0~4.0微米,。能運(yùn)動(dòng),。革蘭氏陽性。芽孢1.0~1.2×1.5~2.0微米,,橢圓形,,中生或次端生。液化明膠慢,、胨化牛奶,、水解淀粉、不還原硝酸
解酪蛋白巨大球菌 種屬:Macrococcus caseolyticus 描述 革蘭氏陽性球菌,,球形或稍呈橢園形,,直徑1.0um左右,無鞭毛,,不能運(yùn)動(dòng),。無芽胞,不形成莢膜,。
遲鈍愛得華氏菌 種屬:Edwardsiella tarda 描述 有鞭毛,、能運(yùn)動(dòng)、無莢膜,,革蘭染色陰性兼性厭氧桿菌
紅球菌 種屬:Rhodococcus sp. 描述 好氣,、革蘭氏陽性、多形態(tài)菌,,不游動(dòng)。部分抗酸,。無氣絲(有時(shí)有少量氣絲),。菌落粗糙或光滑、甚至粘液狀,,呈淺橙黃色,、粉色、橙色或紅色,,細(xì)胞壁Ⅳ型
希瓦氏菌 種屬:Shewanella sp. 描述 革蘭氏染色為陰性,,細(xì)胞為桿狀,,大小為0.6-1.0μm×1.0-4.0μm,周身纖毛,,生單鞭毛,,其生長(zhǎng)pH范圍為pH7.0—10.0,適生長(zhǎng)pH為8.0,,生長(zhǎng)溫度范圍為4℃-40℃,,適生長(zhǎng)溫度為20℃-30℃??衫肈-半乳糖,、D-葡萄糖、蔗糖,、丙酸鈉,、L-亮氨酸等多種有機(jī)物為碳源。
嗜麥芽糖寡養(yǎng)單胞菌 種屬:Stenotrophomonas maltophilia 描述 革蘭氏陰性桿菌,,鞭毛染色為鞭毛菌,,每菌鞭毛數(shù)>1。在營(yíng)養(yǎng)瓊脂上易生長(zhǎng),,淡黃或淺黃色菌落,。血平板上呈淡紫綠色溶血。氧化發(fā)酵(OF)試驗(yàn)為葡萄糖非發(fā)酵型,,但氧化產(chǎn)酸能力較差,,有的不顯產(chǎn)酸或開始時(shí)反而微堿,氧化酶試驗(yàn)陰性,。
中文名稱:羅氏小單胞菌
英文名稱:Oerskovia turbata
其他保藏中心編號(hào):
模式菌株:非模式菌株
主要用途:研究,,,分類
特征特性:BN9T (=DSM 10065T=NCIMB 14020)
具體用途:
生物安全等級(jí):4級(jí)
生長(zhǎng)條件:2培養(yǎng)基
培養(yǎng)溫度:15°C
大鼠β-防御素ELISA檢測(cè)試劑盒Salmonella│eastbourne 中文名稱:伊斯特本沙門氏菌Salmonella│eastbourne提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:1,9,12 e,h 1,5培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法 純度:97%
Salmonella│poona 中文名稱:浦那沙門氏菌Salmonella│poona提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:13,22 z 1,6培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法 純度:97%
Salmonella│onderspoort 中文名稱:翁德斯太浦沙門氏菌Salmonella│onderspoort提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:(1),6,14,25 e,h 1,5培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99%
Salmonella│berta 中文名稱:貝塔沙門氏菌Salmonella│berta提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:9,12 f,g,t -培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法 純度:97%
Salmonella│glostrup 中文名稱:格羅斯出浦沙門氏菌Salmonella│glostrup提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:6,8 z10 e,n,z15培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法 純度:97%
Salmonella│budapest 中文名稱:布達(dá)佩斯沙門氏菌Salmonella│budapest提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:1,4,12 g,t -培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Salmonella│ballerup 中文名稱:巴勒盧浦沙門氏菌Salmonella│ballerup提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:29,(Vi) z14 -培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法 純度:98%
Salmonella│manhattan 中文名稱:曼哈頓沙門氏菌Salmonella│manhattan提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:6,8 d 1,5培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法 純度:98%
ELISA試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),,應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。有時(shí)本底較高,,說明有非特異性反應(yīng),,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉,。
2. 產(chǎn)品僅用于科研在ELISA中,,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,,如聚氯乙烯,、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板,、試管、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),,觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),,要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí),。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度,。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml,。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度,。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全,、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時(shí)間,,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,,尤其是H2O2在臨用前加入 ,。