詳細介紹
檢測原理:
產(chǎn)品僅用于科研試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),。往預(yù)先包被抗體的包被微孔中,依次加入標本,、標準品,、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度,。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
Niu Shousu (LEP) ELISA Kit | FS-B5870 |
ELISA試劑盒優(yōu)點:
1,、*抗體----高效、靈敏,、特異
2,、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,,空白值低,,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,,可靠性強
4,、購買本公司的ELISA試劑盒,免費代測
5,、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),,規(guī)范,高效
6,、適用于體液,、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7,、可檢測動物類型豐富:人,、猴、大鼠,、小鼠,、豚鼠、黃金地鼠,、兔,、豬、犬,、牛,、綿羊,、山羊,、鵝、雞,、蝦,、河蟹、鱸魚,、斑馬魚等
8,、可檢測指標齊全:炎癥因子、血管生成素,、動脈粥樣硬化因子,、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶,、脂肪因子等等
9,、經(jīng)濟、實惠,、可靠,,完善、穩(wěn)定的實驗體系,,科研隊伍,,良好的實驗設(shè)備、準確可靠的實驗結(jié)果,,是您可靠的合作伙伴,。
?
操作要點:
1)標本的采取和保存:可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清),、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液,、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清,、尿液),,有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物),。大部分ELISA檢測均以血清為標本;
2)試劑的準備:所需試劑,、蒸餾水,、去離子水、自配的緩沖液,;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,,即加標本,加酶結(jié)合物,,加底物,。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標本和加酶結(jié)合物后,??乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育,。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的后一步溫育反應(yīng),,此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物,。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標比色儀的比色架中,。儀器準備為酶標儀,。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定。
salivary amylaseα1唾液淀粉酶α1種屬: Salmonella│niloese尼婁斯沙門氏菌
NADPH-OXNADPH氧化酶種屬: Nocardia │amaemiaeNocardia amaemiae
alkaline phosphatase堿性焦磷酸酶種屬: Aspergillusoryzaevar.effuses(Tirahoschi)Ohara平展米曲霉(米曲霉平展變種)
Cluster of differentiation 10CD10分子種屬: MethylobacteriumplataniMethylobacteriumplatani
Cluster of differentiation 26CD26分子種屬: Sphingopyxis│baekryungensis查樸圖鞘氨醇盒菌
種屬: Streptomyces│yeochonensis麗川鏈霉菌
polyoma Virus多瘤病毒種屬: Streptomyces│libani subsp.rufus黎巴嫩鏈霉菌紅色亞種
Nuclear factor-kappa B P50核轉(zhuǎn)錄因子p50種屬: Microbacterium│paludicola沼澤微桿菌
Vitamin K維生素K種屬: Glaciecola│psychrophila嗜冷居水菌
dopamine transporter多巴胺轉(zhuǎn)運蛋白種屬: Mycobacterium monacense慕尼黑分枝桿菌
Dopamine D2 多巴胺D2種屬: Sphingomonas│rubra紅色鞘氨醇單胞菌
Gamma-aminobutyric acid A receptorγ氨基丁酸A型受體種屬: Flavobacterium│frigoris冷域黃桿菌
glutamic acid decarboxylase65谷氨酸脫羧酶65種屬: Bifidobacterium│pseudolongum subsp. globosum假長雙歧桿菌球形亞種
glutamic acid decarboxylase67谷氨酸脫羧酶67種屬: Mycobacterium│gilvum淺黃分枝桿菌
IIA secreted phospholipase A2IIA分泌型磷脂酶A2種屬: Absidia│psychrophila喜寒梨頭霉
牛瘦素ELISA檢測試劑盒人骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
小鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA Kit,,48T/96T 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,,非食用
豬骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Moraxella catarrhalis
大鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: Pseudomonas
人降鈣素(CT)ELISA Kit,,48T/96T 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,,非食用
小鼠降鈣素(CT)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Trametes ochracea
大鼠降鈣素(CT)ELISA Kit,,48T/96T 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
鮭魚降鈣素(SCT)ELISA Kit,,48T/96T 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,,非食用
ELISA試驗時,,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,,待檢樣品應(yīng)作一式二份,,以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高,,說明有非特異性反應(yīng),,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉,。
2. 產(chǎn)品僅用于科研在ELISA中,,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,,如聚氯乙烯,、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板、試管,、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,,據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間,。吸附溫度,,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1,、1.0和10μg/ml等)進行包被后,,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值,。選擇OD值而蛋白量少的濃度,。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度,。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全,、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,,應(yīng)注意防護,。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時間,,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,,尤其是H2O2在臨用前加入 ,。