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詳細(xì)介紹
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
48T 0.2PCR管 | FS-02R6440 |
組成及試劑配制:
1,、酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2,、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,，其濃度為200 U/L,，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L,，100 U/L,，50 U/L，25 U/L,，12.5 U/L,，6.25 U/L，3.12 U/L,，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可,，其余濃度以此類推,。
3、 樣品稀釋液：1×20ml,。
4,、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué)：基因芯片,、SNP檢測(cè),、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片,、LncRNA芯片,、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE,、SILAC,、iTRAQ,、TMT、Label-free,、MRM
4.基因檢測(cè)：DNA/RNA提取,、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè)：Western blot,、Co-ip EMSA,、CHIP、免疫熒光,、ELISA
6.病理檢測(cè)：HE染色,、特殊染色、組織切片,、免疫組化,、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS,、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型：原代細(xì)胞,、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
使用方法：
一,、稀釋PCR陽性對(duì)照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例） 1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）,。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照,。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,，分別為7，6,，5,，4，3,，2,。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）,。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照,。放冰上待用,。 5. 換槍頭，在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),，充分震蕩1分鐘,，得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照,。放冰上待用。 6. 換槍頭,，在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照,。放冰上待用,。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用,。 | 二,、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品，必須設(shè)置N+2個(gè)提取,， 多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽性對(duì)照）， 一個(gè)是NC（樣品制備陰性對(duì)照）,。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)（濃度為1×10E4 拷貝/μL,，10μL相當(dāng)于1萬拷貝）或第5號(hào)（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,，以此作為PC,。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,，則PC和NC的體積也必須是200μL,。 9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒,。 | 三,、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系，在樣品制備室進(jìn)行） 10. 如果只做1次重復(fù),，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,，6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照,。如果做2-3次重復(fù)，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍,。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù),。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照，并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加）
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PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞,，室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋,。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,，15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,，中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后,，于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,，每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,，使其*溶解,，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度,。
Phospho-MEF2A (Ser408) /FITC 熒光標(biāo)記磷化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TLR5/CD285 /FITC 熒光標(biāo)記Toll樣受體5抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Acetyl-Histone H4(K8) 乙?；M蛋白H4抗體 0.1ml
Rabbit Bov IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗IgG 0.3ml
GPR32 G蛋白偶聯(lián)受體32抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Biotin/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗生物抗體IgG 0.1ml
TLR5/CD285 /FITC 熒光標(biāo)記Toll樣受體5抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
IL-23(Human Interleukin 23) ELISA Kit 人白介23Multi-class antibodies： 48T
CXCL7/NAP-2/PPBP 中性粒細(xì)胞趨化蛋白2抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse human IgG ascites 小鼠抗人IgG腹 1ml
SFT(Human sulfatide) ELISA Kit 人腦苷酯 96T
RelB 核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體 0.2ml
Cyclin A1 周期A1蛋白抗體 0.1ml
CXCL7/NAP-2/PPBP 中性粒細(xì)胞趨化蛋白2抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit Guinea pig IgM/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml
GHRH 生長釋放抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh AGXT2L2 AGXT2L2蛋白抗體 0.2ml
Phospho-Lck (Tyr505) /FITC 熒光標(biāo)記磷化細(xì)胞特異性蛋白酪激抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗羊IgG 0.1ml
Phospho-SRC-3 (Thr24)/FITC 熒光標(biāo)記磷化類固醇受體輔助活化因子-3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
大麥源性成分核酸檢測(cè)試劑盒48T0.2PCR管猴趨化因子CCL4樣蛋白1（CCL4L1）elisa檢測(cè)試劑盒
猴前列腺E合2（PTGES2）elisa檢測(cè)試劑盒
猴鈣腔蛋白（CALU）elisa檢測(cè)試劑盒
猴胱天蛋白9（CASP9）elisa檢測(cè)試劑盒
兔趨化因子CC受體樣蛋白1（CCRL1）elisa檢測(cè)試劑盒
兔血小板衍生生長因子BB（PDGF-BB）elisa檢測(cè)試劑盒
猴鳥苷結(jié)合蛋白4（GBP4）elisa檢測(cè)試劑盒
猴游離睪酮（F-TESTO）elisa檢測(cè)試劑盒
猴胞漿磷蛋白1（STMN1）elisa檢測(cè)試劑盒
兔前列腺性磷（ACP3/PAP）elisa檢測(cè)試劑盒
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