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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：杏仁源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號：FS-P013381
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,，而不能從無到有，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA,，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計,。因此,，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中,，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油,。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上,，執(zhí)行擴(kuò)增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次,，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油,；否則,，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,，各區(qū)實驗服、儀器,、耗材應(yīng)獨立使用,，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭,；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解,，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機(jī)檢測,；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理,。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照,。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),，并單獨存放,。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記,。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用,。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄,。
MAP-2/FITC 熒光標(biāo)記微管相關(guān)蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
T7 tag/FITC 熒光標(biāo)記T7 tag標(biāo)簽抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADAMTS1 整合樣金屬蛋白與1型抗體 0.1ml
Rabbit chicken IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗雞IgM 0.1ml
phospho-Gria2 (Ser880) 磷化谷受體2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bovine IgM/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗IgM 0.1ml
T7 tag/FITC 熒光標(biāo)記T7 tag標(biāo)簽抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
BECN1/FITC 熒光標(biāo)記一種抑癌基因抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
GLUR3/FITC 熒光標(biāo)記谷受體3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh CK6 細(xì)胞角蛋白6抗體 0.1ml
DISC1(disrupted in schizophrenia1)(NT) DISC1 N端抗原 0.5mg
Rabbit IgG heavy chain constant region 兔抗人γ-鏈 0.1ml
Rhesus antibody Rh TRAF7 壞死因子受體相關(guān)因子7抗體 0.2ml
GLUR3/FITC 熒光標(biāo)記谷受體3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rabbit mouse IgG/AP 性磷(AP)標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
GPD1 甘油三磷脫氫1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ANKRD40 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體 0.2ml
Integrin Alpha2/CD49b/FITC 熒光標(biāo)記整合α2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG F(ab')2/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 0.1ml
RPS6/FITC 熒光標(biāo)記S6核糖體蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
杏仁源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒鏈球菌種屬: Streptococcus│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: K Lancefield培養(yǎng)基: CM0109生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
米曲霉種屬: Aspergillus oryzae (Ahlburg) Cohn提供形式: 凍干管,，斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究；,。產(chǎn)糖化,，淀粉，酒精糖化菌。培養(yǎng)基: Czapek's 瓊脂：蔗糖 30.0 g,NaNO3 3.0 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,KCl 0.5 g,FeSO4·4H2O 0.01 g,K2HPO4 1.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾 1.0 L,pH 6.0-6.5,，121℃,，15min。傳代方法: ①凍干管：75%酒精擦拭管壁,，后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,，掰斷，用200μL無菌或培養(yǎng)基充分溶解,，平板涂布,，活化培養(yǎng)。
②斜面：試管口用75%酒精擦拭后,，火焰灼燒,，后用無菌接種鏟切塊，挑取接入平板或斜面,，培養(yǎng),。生長條件: 25-28℃，好氧存儲條件: 2-8℃冷藏
福氏志賀氏菌種屬: Shigella│flexneri提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: B 5 V 7...培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
黃微球菌種屬: Micrococcus│flavus分離基物: 沉積物/活性污泥提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株,，用于分類學(xué)研究,。培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法,；真空冷凍干燥法
周期依賴性激1(CDK-1)ELISA試劑盒甲 無級, 99.8%乙乙酯 AR,99%聯(lián)芐唑(標(biāo)準(zhǔn)品)
重組激活基因2(RAG-2)ELISA試劑盒乙基叔丁基 分析標(biāo)準(zhǔn)品乙乙酯 for HPLC, >99.0%(GC)膽紅(標(biāo)準(zhǔn)品)
重組激活基因1(RAG-1)ELISA試劑盒4-叔丁基吡啶 98%甲溶液 AR,含10-15% 甲穩(wěn)定劑膽紅
重去甲腎上腺(NE-B)ELISA試劑盒鄰二甲丁芐酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品甲 Standard for GC,，>99.9%比伐盧定(TFA)
腫瘤血管生長因子(TAF)ELISA試劑盒甲 Standard for GC，≥99.5%（GC)甲 AR,，99.5%比馬前列腺/貝美前列
腫瘤相關(guān)抗原(TAA)ELISA試劑盒聚氧乙烯月桂 高純級，Brij-35甲 CP,，99.5%比馬前列腺/貝美前列（標(biāo)準(zhǔn)品）
腫瘤特異性移植抗原(TSTA)ELISA試劑盒2-溴乙 分析標(biāo)準(zhǔn)品甲 AR,無級鹽平陽霉
腫瘤特異性生長因子(TSGF)ELISA試劑盒2-溴-5-氟吡啶 99%甲 for HPLC, ≥99.9%硫博萊霉/博來霉/爭光霉
腫瘤特異性抗原(TSA)ELISA試劑盒溴代硝 90%甲 農(nóng)殘級, ≥99.9%替佐米/保特佐米
腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)ELISA試劑盒雙(4-)酯 99%甲 ≥99.9%(GC)替佐米(標(biāo)準(zhǔn)品)
腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)ELISA試劑盒2-環(huán)己基溴乙 98%甲 ACS博舒替尼
腫瘤壞死因子誘導(dǎo)基因6蛋白(TNFAIP6)ELISA試劑盒5-溴-2-氟 97%甲 分析標(biāo)準(zhǔn)品,，99.9%布地奈德
腫瘤壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子(TWEAK)ELISA試劑盒5-溴-5-硝基-1,3-二惡 98%甲 電子級布地奈德（標(biāo)準(zhǔn)品）
腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子(TRANCE)ELISA試劑盒Nα-甲酰-DL-精氨酰-β-萘 97% 甲 ACS 光譜級, ≥99.9%亞葉鈣
腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒赫斯特?zé)晒馊剂希?3258 98%甲 LC-MS，≥99.9%亞葉鈣（標(biāo)準(zhǔn)品）
腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體2(TRAIL-R2/DR5)ELISA試劑盒并[e]芘 分析標(biāo)準(zhǔn)品甲 色譜級+, ≥99.9%喜樹
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加。
4.除空白孔外,，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。
6.每孔加入底物A,、B各50μL，37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值,。
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