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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：菜豆莢斑駁病毒RT-PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號：FS-P013389
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一,、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,，而不能從無到有，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物,。可以是DNA也可以是RNA,，一般20多bp,，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二,、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,，不加或添加石蠟油,。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上,，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min,。 3．結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油；否則,，直接取5-10μl電泳檢測,。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,，各區(qū)實驗服,、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,，不能混用,；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作,；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理,。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰,、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,，并應(yīng)瞬時離心,。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放,。
6.為防止熒光干擾,，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記,。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置,；不同批號試劑不能混用,。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None,。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄,。
LRIG2/FITC 熒光標(biāo)記抗LRIG2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
SYVN1/FITC 熒光標(biāo)記滑膜細(xì)胞凋亡抑制物1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Adenylate Kinase 1/AK1 腺苷激-1抗體 0.2ml
Rabbit dog IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗狗IgG 0.1ml
GYPB 血型糖蛋白δ抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgM/APC APC標(biāo)記的兔抗雞IgM 0.1ml
SYVN1/FITC 熒光標(biāo)記滑膜細(xì)胞凋亡抑制物1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
AnuA-IgG(Human nucleosome antibody IgG) ELISA Kit 人抗核小體抗體IgGMulti-class antibodies： 48T
Integrin Alpha 3 + Beta 1 整合α3β1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Lipophilin B 親脂性蛋白B抗體 0.2ml
PSA(Human prostate specific antigen) ELISA Kit 人前列腺特異性抗原 96T
Rab5b RAS相關(guān)蛋白Rab5B抗體 0.2ml
CCAP 心動加速蛋白多肽抗體 0.2ml
Integrin Alpha 3 + Beta 1 整合α3β1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit mouse IgG/APC APC標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
phospho-GSK3 Beta (Tyr216) 磷化糖原合激3β抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ANKS1B/AIDA1 β淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
Inhibin BetaA/FITC 熒光標(biāo)記抑制βA抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml
ROS/FITC 熒光標(biāo)記活性氧簇ROS抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
菜豆莢斑駁病毒RT-PCR試劑盒肺炎克雷伯氏菌種屬: Klebsieela│pneumoniae分離基物: 禾本科牧草圓果雀稗根提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: 0003生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法,；真空冷凍干燥法
曲霉種屬: Aspergillus│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 311生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
居沉積物海桿菌種屬: Marinobacterium│sediminicola分離基物: 沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 2216E海瓊脂生長條件: 30℃,好氧,，24h存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Pantoeastewartiisubsp.stewartii種屬: Pantoeastewartiisubsp.stewartii安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28℃
誘導(dǎo)型一氧化合成(iNOS)ELISA試劑盒2,2'-二喹啉-4,4'-二羧 90%6-甲氧基-2-乙酰萘 98%氟比洛芬(進(jìn)口)
誘導(dǎo)型一氧化氮合成(iNOS)ELISA試劑盒二三(1,10-鄰二氮雜菲)釕(Ⅱ)，合 98%五化 CP,，95.0%氟比洛芬（標(biāo)準(zhǔn)品）
有絲分裂原活化蛋白激14(MAPK14)ELISA試劑盒2,6-二-3-(三氟甲基)吡啶 98%五化 AR,，98.0霉鈣（溶）
游離脂肪(FFA)ELISA試劑盒1,3-二四甲基二硅氧 97%二乙酮 98%霉鈉
游離原卟啉(FEP)ELISA試劑盒2,3-二甲 分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析五化 99.998% metals basis加替沙星
游離血紅蛋白(f-Hb)ELISA試劑盒2,5-二甲 分析標(biāo)準(zhǔn)品鄰二甲 99%加替沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）
游離狀腺原氨(Free-T3)ELISA試劑盒3,4-二 分析標(biāo)準(zhǔn)品2-甲基噻吩 99%吉非替尼
游離肉(Free Carnitine)ELISA試劑盒2,2'-二硫雙(4-甲基噻唑) 97%噻吩-2-乙 98%吉非替尼(標(biāo)準(zhǔn)品)
游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒地美環(huán)鹽鹽 分析標(biāo)準(zhǔn)品乙酰氧肟 98%鹽吉西他濱
游離甲狀腺(FT4)ELISA試劑盒地美環(huán)鹽鹽 ≥90% (HPLC)雙(2-乙基)鹽鹽 98%鹽吉西他濱（標(biāo)準(zhǔn)品）
游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯乙酯 90%羧甲氧基半鹽鹽 98%甲磺吉米沙星
游離蛋白S(FP-S)ELISA試劑盒順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯乙酯 99%楊羥肟 99%甲磺吉米沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）
游離雌三(FE3)ELISA試劑盒6,7-二羥基 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%二甲基二硅 CP,掃尾劑膽鈉
游離β絨毛膜促性腺(f-βhCG)ELISA試劑盒四丁基氫氧化銨,30 98%二甲基二硅 >98.5%(GC)醋胰高血糖
幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒p, p’-DDE 分析標(biāo)準(zhǔn)品亞麻乙酯 80%,，天然醋戈那瑞林
幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA試劑盒2,4-滴異辛酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品亞麻乙酯 98%鹽格拉司瓊
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加,。
4.除空白孔外,，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）,。
6.每孔加入底物A,、B各50μL，37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值,。
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