詳細介紹
組成及試劑配制:
1,、酶標板:一塊(96孔)
2,、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,,其濃度為200 U/L,,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,,100 U/L,,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,,6.25 U/L,,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,,其余濃度以此類推,。
3、 樣品稀釋液:1×20ml,。
4,、 檢測稀釋液A:1×10ml。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途,!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T 0.1PCR管 | FS-02R6401 |
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標準品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標記6個離心管,,分別為7,,6,5,,4,,3,2,。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同)。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩1分鐘,,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。 5. 換槍頭,,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,,充分震蕩1分鐘,,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。 7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照,。放冰上待用。 | 二,、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品,,必須設置N+2個提取, 多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),, 一個是NC(樣品制備陰性對照),。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,,以此作為PC。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品,,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒,。 | 三、設置qPCR反應(20 μL體系,,在樣品制備室進行) 10. 如果只做1次重復,,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,,1個用于PCR陰性對照,,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍,。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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實驗外包:
1.基因組學:基因芯片,、SNP檢測、DNA甲基化檢測,、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片,、LncRNA芯片、表達譜芯片,、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE,、SILAC、iTRAQ、TMT,、Label-free,、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot,、Co-ip EMSA、CHIP,、免疫熒光,、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色,、組織切片、免疫組化,、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS,、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞,、細胞模型,、動物模型構(gòu)建
Phospho-MSK1 (Thr581) /FITC 熒光標記磷化有絲分裂原和應激活化型蛋白激1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
TNK1/FITC 熒光標記非受體型酪蛋白激Tnk1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
5-羥色胺抗體 5-HT 0.1ml
Mouse Rabbit IgM/Cy5.5 Cy5.5標記的小鼠抗兔IgM 0.1ml
GDAP1 神經(jīng)節(jié)苷脂誘導分化相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PSD95 突觸后密度蛋白95抗體 0.1ml
TNK1/FITC 熒光標記非受體型酪蛋白激Tnk1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
CVNPF(Human Cobra venom neuronal protective factor) ELISA Kit 人神經(jīng)保護因子Multi-class antibodies: 48T
GADD153 GADD153抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse human IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的小鼠抗人IgG 0.1ml
PPARGC1(Human peroxisome proliferative activated receptor gama coactivator 1 alpha) ELISA Kit 人過氧化物體增殖激活物受體γ輔激活因子1α 96T
RGS5 G蛋白信號轉(zhuǎn)導調(diào)節(jié)因子5抗體 0.2ml
CAPS1 鈣依賴分泌激活蛋白1抗體 0.2ml
GADD153 GADD153抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit Goat IgG/Gold 膠體金標記的兔抗羊IgG 0.5ml
GPCR6A G蛋白偶聯(lián)受體33抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADORA3 腺苷受體A3抗體 0.1ml
LIS1/FITC 熒光標記無腦回的致病基因LIS1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗狗IgG 0.1ml
SUR1/FITC 熒光標記磺酰脲類受體1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
狐貍源性核酸檢測試劑盒48T0.1PCR管頭孢噻肟Cefotaxime
美他環(huán)Metacycline
諾氟沙星Norfloxacin
4-差向金霉4 -?ECTC
頭孢哌酮雜質(zhì)A(降B)Cefoperazone impurity A?(reduced?B)
克林霉Clindamycin
3-甲基利福霉SV3 - methyl?rifamycin SV
頭孢哌酮S異構(gòu)體Cefoperazone?S isomers
阿莫西林Amoxicillin
脫環(huán)Tetracycline
環(huán)丙沙星Ciprofloxacin
霉二醇物Glycols
頭孢拉定Cefradine
3-乙氧基-4-羥基3- ethoxy?- 4 -?hydroxy?benzaldehyde
α-對羥基甘Alpha?D-p-hydroxyphenylglycine
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,,15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,,中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,,于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),,清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,,測定RNA溶液 濃度和純度。