化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服,、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用,；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭,；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作,；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè),；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰,、陽(yáng)性對(duì)照,。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心,。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置,；不同批號(hào)試劑不能混用,。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None,。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄,。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：創(chuàng)傷弧菌核酸檢測(cè)試劑盒48T 0.1PCR管
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-02R6344
產(chǎn)品規(guī)格：48T 0.1PCR管
產(chǎn)品分類：PCR-熒光探針法/PCR法
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,，而不能從無(wú)到有，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物,。可以是DNA也可以是RNA,，一般20多bp,，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二,、操作步驟 1．在冰浴中,，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,，不加或添加石蠟油,。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上,，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min,。 3．結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油；否則,，直接取5-10μl電泳檢測(cè),。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL,；空白孔不加,。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。
6.每孔加入底物A,、B各50μL，37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi),，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
Phospho-MK6 (Ser202)/FITC 熒光標(biāo)記磷化原活化蛋白激MKK6抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TRAF3/CD40bp /FITC 熒光標(biāo)記CD40結(jié)合蛋白/CD40受體相關(guān)因子1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ABHD3 肺α/β解蛋白3抗體 0.2ml
Rabbit Avidin/AP 性磷(AP)標(biāo)記的兔抗親和 0.1ml
GRB10 生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白10抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh RAB8 ras癌基因家族Rab8蛋白抗體(原癌基因c MEL) 0.1ml
TRAF3/CD40bp /FITC 熒光標(biāo)記CD40結(jié)合蛋白/CD40受體相關(guān)因子1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Human Amylin ELISA Kit 人胰淀Multi-class antibodies： 48T
Iba1 離子鈣接頭蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAPK organizer 1/Morg1 原活化蛋白激組織蛋白1抗體 0.1ml
WARS(Human tryptophanyl-tRNA synthetase) ELISA Kit 人色酰tRNA合成 96T
RIP3 受體結(jié)合絲蘇激3抗體 0.2ml
phospho-Caldesmon (Ser789) 磷化鈣介質(zhì)抗體 0.1ml
Iba1 離子鈣接頭蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit dog IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗狗IgG 0.5ml
Cancer/testis antigen family 4 member 7 /抗原家族4亞型7抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADCK4 ADCK4蛋白抗體 0.2ml
Lysozyme/FITC 熒光標(biāo)記溶菌抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗雞IgG 0.3ml
phospho-Tau protein (Ser396)/FITC 熒光標(biāo)記磷化微管相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
創(chuàng)傷弧菌核酸檢測(cè)試劑盒48T 0.1PCR管通用型總番茄斑萎病毒（Total Tospo Virus,；TOSPO）基因檢測(cè)試劑盒 20次大鼠生長(zhǎng)釋放多肽elisa檢測(cè)試劑盒
通用型南瓜黃化花葉病毒（Zucchini Yellow Mosaic Virus；ZYMV）20次大鼠抗內(nèi)皮抗體elisa檢測(cè)試劑盒
基因檢測(cè)試劑盒大鼠白介23elisa檢測(cè)試劑盒
通用型瓜類性果斑?。ㄎ鞴瞎撸?/span>Acidovorax avenae subsp. citrulli,；Watermelon Fruit Blotch）基因檢測(cè)試劑盒20次大鼠骨橋elisa檢測(cè)試劑盒
通用型胡蘿卜性葉斑病（Xanthomonas campestris pv. Carotae,；Xccar）基因檢測(cè)試劑盒20次大鼠周期D3elisa檢測(cè)試劑盒
通用型野油菜黃單胞菌（Xanthomonas campestris pv. Pelargonii,；Xcp）20次大鼠甲狀旁腺elisa檢測(cè)試劑盒
基因檢測(cè)試劑盒大鼠血管生長(zhǎng)elisa檢測(cè)試劑盒
通用型加拿大低菜籽油黑脛病/油菜腐爛病/甘藍(lán)黑莖病菌（Blackleg of Canola/Leptosphaeria maculans/Phoma lingam）基因檢測(cè)試劑盒20次大鼠血紅氧合2elisa檢測(cè)試劑盒
通用型疫病菌種（Phytophthora species）基因檢測(cè)試劑盒20次大鼠前列腺E1elisa檢測(cè)試劑盒
通用型絲核菌種（Rhizoctonia species）基因檢測(cè)試劑盒20次小鼠活化蛋白Celisa檢測(cè)試劑盒
通用型腐霉屬種（Pythium species）基因檢測(cè)試劑盒20次大鼠色Celisa檢測(cè)試劑盒
通用型灰斑病灰梨孢菌（Grey Leaf Spot Pyricularia grisea）20次小鼠骨形成蛋白elisa檢測(cè)試劑盒
基因檢測(cè)試劑盒小鼠胰島elisa檢測(cè)試劑盒
通用型蘇云金桿菌（Bacillus thuringiensis）基因檢測(cè)試劑盒20次小鼠磷化蛋白Celisa檢測(cè)試劑盒
通用型籽瓜性果斑病（Acidovorax avenae subsp.citrulli,；Aac）20次小鼠同型半胱elisa檢測(cè)試劑盒
化工儀器網(wǎng)