詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:鵝源性核酸檢測試劑盒48T0.2PCR管
產(chǎn)品貨號:FS-02R6398
產(chǎn)品規(guī)格:48T 0.2PCR管
產(chǎn)品分類:PCR-熒光探針法
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一,、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,,而不能從無到有,,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物,??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,,需要根據(jù)你的模板鏈設計,。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP,、dCTP,、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二,、操作步驟 1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油,。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min,。 3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,,各區(qū)實驗服、儀器,、耗材應獨立使用,,不能混用,;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,,樣本處理在生物安全柜中進行操作,;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理,。
3.每次實驗應該設置陰,、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,,并應瞬時離心,。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放,。
6.為防止熒光干擾,,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記,。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置,;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,,淬滅基因選擇None,。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
HABP ELISA Kit 大鼠透明質(zhì)結(jié)合蛋白Multi-class antibodies: 48T
TOPO II Alpha (Ser1106) 磷化DNA拓普西異構(gòu)Ⅱ抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GLMN/FK506 binding protein associated protein FK506結(jié)合蛋白相關蛋白抗體(他克莫司相關蛋白) 0.2ml
AMA(Mouse Monocyte antibody) ELISA KIT 小鼠抗單核細胞抗體 96T
Ninjurin 2 神經(jīng)損傷誘導蛋白2抗體 0.2ml
ASB13 含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族13抗體 0.2ml
TOPO II Alpha (Ser1106) 磷化DNA拓普西異構(gòu)Ⅱ抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
SP-C(Human Pulmonary surfatcant-associated protein C) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關蛋白CMulti-class antibodies: 48T
HPV18 E6 人類狀瘤病毒18 E6抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MCG10 RNA相關結(jié)合蛋白MCG10抗體 0.2ml
ILK-1(Human integrin-linked kinase 1) ELISA Kit 人整合連接激1 96T
RHCG RH血型C糖蛋白抗體 0.2ml
Collagen I Ⅰ型膠原/1型膠原a1抗體 0.1ml
HPV18 E6 人類狀瘤病毒18 E6抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit Goat IgG/RBITC 羅丹明標記的兔抗羊IgG 0.3ml
GPR126 G蛋白偶聯(lián)受體126抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADORA1 腺苷A1A受體抗體 0.2ml
LKB1/FITC 熒光標記一種抑癌基因IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG 兔抗狗IgG 1mg
Phospho-Syk (Tyr525/526) /FITC 熒光標記磷化非受體型酪蛋白激抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
鵝源性核酸檢測試劑盒48T0.2PCR管紫蘇子Zi Suzi
大腹皮Pericarpium Arecae
使君子(使君子仁)Idolkimi
桃仁(山桃)Peach?(Prunus)
阿米卡星Amikacin
高山紅景天Rhodiola sachalinensis
鹿茸(馬鹿)Pilose antler?(red deer)
豨薟草(豨薟)Herba Siegesbeckiae?(Herba Siegesbeckiae)
桿菌肽Bacitracin
白頭翁Pulsatilla chinensis
牛角粉Water buffalo horn?powder
人參莖葉Ginseng stem leaf
紅霉Erythromycin
環(huán)己烷Cyclohexane
乙醇Ethanol
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL,;空白孔不加。
4.除空白孔外,,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板),。
6.每孔加入底物A,、B各50μL,37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值,。