詳細(xì)介紹
檢測(cè)原理:
產(chǎn)品僅用于科研試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),。往預(yù)先包被抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度,。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
Bovine citrate synthase (CS) ELISA Kit | FS-B5864 |
ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn):
1,、*抗體----高效、靈敏,、特異
2,、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,,空白值低,,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,,可靠性強(qiáng)
4,、購(gòu)買本公司的ELISA試劑盒,免費(fèi)代測(cè)
5,、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),,規(guī)范,高效
6,、適用于體液,、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7,、可檢測(cè)動(dòng)物類型豐富:人,、猴、大鼠,、小鼠、豚鼠,、黃金地鼠,、兔、豬,、犬,、牛、綿羊,、山羊,、鵝、雞,、蝦,、河蟹、鱸魚,、斑馬魚等
8,、可檢測(cè)指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素,、動(dòng)脈粥樣硬化因子,、趨化因子、生長(zhǎng)因子基質(zhì)金屬蛋白酶,、脂肪因子等等
9,、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠,、可靠,,完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,,科研隊(duì)伍,,良好的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,是您可靠的合作伙伴,。?
操作要點(diǎn):
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清),、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液,、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份,。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液),,有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物),。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑,、蒸餾水,、去離子水、自配的緩沖液,;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,,加底物,。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后,??乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過程稱為溫育,。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動(dòng)洗滌儀外,,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的后一步溫育反應(yīng),,此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物,。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中,。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀,。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定。
pertussis,,whooping cough百日咳種屬: Streptoverticillium│lilacinoverticillatum丁香輪絲鏈輪絲菌
Carboxylesterase type AA型羧酸酯酶種屬: Streptomyces│europaeiscabiei歐洲瘡痂鏈霉菌
muscarinic acetylcholine receptor毒蕈堿型乙酰膽堿受體種屬: Phytophthora│hibernalis冬生疫霉屬
Mhyopneumoniae antibody肺炎支原體抗體種屬: Salmonella│enterica subsp. enterica serotype Wandsworth腸沙門氏菌腸亞種旺茲沃思血清型
advanced oxidation protein products晚期氧化蛋白產(chǎn)物種屬: PsychrobacillusinsolitusPsychrobacillusinsolitus
Acid antibody脫落酸抗體種屬: Jeotgalibacillus│marinus海洋咸海鮮芽孢桿菌
Lymphocyte factor淋巴細(xì)胞因子種屬: Saccharomycopsislipolytica(YarrowYarrowialipolytica)解脂復(fù)膜孢酵母(亞羅解脂酵)
Leptin Receptor1瘦素受體1種屬: Halorubrum│alkaliphilum嗜堿鹽紅菌
Leptin Receptor2瘦素受體2種屬: Comamonas│terrae從毛單孢菌(加詞待譯)
phospho calcium;calmodulin-dependent protein kinase-Ⅱ磷酸化鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2種屬: Salinicoccus│albus白色鹽水球菌
hydatid disease Ab包蟲病抗體種屬: Halomonas│eurihalina廣鹽鹽單胞菌
Trichinella IgG antibody旋毛蟲IgG抗體種屬: Rothia│amarae溝羅斯氏菌
Chemokine-like receptor 1 antibody趨化樣因子受體1抗體種屬: Pseudonocardia│benzenivorans解假諾卡氏菌
paraoxonase對(duì)氧磷酶種屬: Hericium│erinaceus猴頭菌(猴頭蘑,、刺猬菌)
Recombinant Human Chemerin重組人脂肪因子種屬: Williamsia│sterculiaeWilliamsia sterculiae
牛檸檬酸合成酶ELISA檢測(cè)試劑盒人睪酮(T)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Actinoplanes missouriensis
小鼠睪酮(T)ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: Escherichia coli
豬睪酮(T)ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: Lactobacillus paracasei
大鼠睪酮(T)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Chaetomium cuniculorum
兔子睪酮(T)ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: Streptomyces sp.
牛孕激素/孕酮(PROG)ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: Purpureocillium lilacinum
犬孕激素/孕酮(PROG)ELISA Kit,48T/96T 用途: 代謝產(chǎn)物具有弱的抗細(xì)菌活性,。
人孕激素/孕酮(PROG)ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: Auricularia auricula
ELISA試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,,待檢樣品應(yīng)作一式二份,,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,,說明有非特異性反應(yīng),,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉,。
2. 產(chǎn)品僅用于科研在ELISA中,,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,,如聚氯乙烯,、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板,、試管,、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,,據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間,。吸附溫度,,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1,、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值,。選擇OD值而蛋白量少的濃度,。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份),。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉,、安全,、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,,應(yīng)注意防護(hù),。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時(shí)間,,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,,尤其是H2O2在臨用前加入 ,。