組成及試劑配制:
1,、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,,100 U/L,50 U/L,,25 U/L,,12.5 U/L,6.25 U/L,,3.12 U/L,,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,,其余濃度以此類(lèi)推。
3,、 樣品稀釋液:1×20ml,。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml,。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
使用方法:
一,、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照,。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,,分別為7,6,,5,,4,3,,2,。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同),。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用,。 5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),,充分震蕩1分鐘,,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用,。 6. 換槍頭,,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用,。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照),。 可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC,。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL,。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。 | 三,、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照,。如果做2-3次重復(fù),,則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù),。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加) |
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè),、DNA甲基化檢測(cè),、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片,、表達(dá)譜芯片,、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC,、iTRAQ,、TMT、Label-free,、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取,、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot,、Co-ip EMSA,、CHIP、免疫熒光,、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色,、特殊染色、組織切片,、免疫組化,、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS,、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞,、細(xì)胞模型,、動(dòng)物模型構(gòu)建
Human tenascin-R,TN-R ELISA Kit 人肌腱蛋白R(shí)Multi-class antibodies: 48T
Socs 2 細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)抑制蛋白2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml
MT(Human Metallothionein) ELISA Kit 人金屬硫蛋白 96T
Neurotensin Receptor 1 神經(jīng)降壓受體1抗體 0.2ml
Phospho-BLNK(Tyr84) 磷化T細(xì)胞連接蛋白抗體 0.1ml
Socs 2 細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)抑制蛋白2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
ALP-B(Human Bone-specific Alkphase B) ELISA Kit 人骨特異性性磷BMulti-class antibodies: 48T
Beta-2-MG β2微球蛋白抗體(單抗)Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Integrin alpha V/CD51 整合αV抗體 0.2ml
HBeAb(Human hepatitis B virus e antibody) ELISA Kit 人抗乙型肝炎病毒e抗體 96T
Proteasome 19S S7 蛋白體PRS7抗體 0.2ml
C7ORF50 7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框50抗體 0.2ml
Beta-2-MG β2微球蛋白抗體(單抗)Multi-class antibodies: 0.1ml
Donkey human IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml
GCC1 高爾基體卷曲螺旋蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ART3 二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移3抗體 0.2ml
ICOS-L/B7-H2/CD275/FITC 熒光標(biāo)記誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子配體CD275抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.1ml
p-PKC beta 1/2/FITC 熒光標(biāo)記磷化蛋白激C β1/β2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
巴貝斯屬蟲(chóng)通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次假絲酵母種屬: Candida│sp.提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
裂褶菌種屬: SchizophyllumcommuneFr.安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)L-蘋(píng)果培養(yǎng)基: 17生長(zhǎng)條件: 26℃
少根根霉種屬: Rhizopus│arrhizus提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 釀造燒酒培養(yǎng)基: 13生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
孢囊放線(xiàn)菌屬種屬: Actinosporangium│sp.提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0014生長(zhǎng)條件: 28C存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥
白介17(IL-17)ELISA試劑盒N-乙基-N-(2-羥基-3-磺基)-3-鈉鹽 99%9, 9′-螺雙芴 98%草一(>98%,BC)
白介16(IL-16)ELISA試劑盒3,3',5,5'-四甲基聯(lián)鹽鹽 98%2,3,5,6-四氟-7,7,8,-四二甲基對(duì)醌 97%過(guò)(>99%,BR)
白介15(IL-15)ELISA試劑盒2,4,6-三溴-3-羥基甲 98%1 3 5-三((3-基)基氨基] 97%氫鈉一(>98%,BR)
白介13(IL-13)ELISA試劑盒三(羥甲基)氨 標(biāo)準(zhǔn)緩沖物質(zhì), ≥99.9% (titration)4,4',4''-基三 98%硫鈉十(>99%,BC)
白介12受體亞基β-1(IL12RB1/IL12R/IL12RB)ELISA試劑盒三(羥甲基)氨醋鹽 99%2,2',7,7'-四溴-9,9'-螺二芴 98%司班40
白介12受體(IL-12R)ELISA試劑盒三異環(huán)酯 98%1,3,5-酰 98%鹽酪
白介12(IL-12/P70)ELISA試劑盒2-叔丁基-6-酚 98%1,1-環(huán)已基二乙 98%糠(>97%,,BR)
白介12(IL-12/P40)ELISA試劑盒3-噻吩甲 98%1,1-環(huán)已基二乙單酰 99%2-甲基咪唑(>98%,BR)
白介12(IL-12)ELISA試劑盒單組分TMB顯色液 組成:TMB,,穩(wěn)定劑。溴 AR6-(>98%,BR)
白介11(IL-11)ELISA試劑盒TMB顯色液A液溴 CP3-[N-(1,1-二甲基-2-)]氨基-2-羥磺
白介10(IL-10)ELISA試劑盒TMB顯色液B液 溴標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml鹽(>99%,BR)
白介1(IL-1)ELISA試劑盒D-α-酚醋酯 96%溴 ACS, 99.5%聯(lián)(>98%,,BR)
白喉抗體(Diphtheria Ab)ELISA試劑盒5-溴-4--3-吲哚神經(jīng)氨 97%溴 ≥99.99% metals basisBig CHAP(>98%,,BR)
白蛋白(ALB)ELISA試劑盒烯, GR,>99.5%(GC)化鉍 98%C12E8 10%溶液
靶向核糖核(TR)ELISA試劑盒乙酮 GCS,≥99.5% (GC)溴標(biāo)準(zhǔn)溶液 100µg/mL氟化鈣(>98%,BR)
八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2B)ELISA試劑盒乙酮 AR,≥98.0% (GC)化亞銅 CP,99.0%硬脂鈣
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,,15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,,中間層以及無(wú)色水相上層,。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,,于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),,清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,,使其*溶解,,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。