特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途,!
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2,、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,,50 U/L,,25 U/L,12.5 U/L,,6.25 U/L,,3.12 U/L,,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,,其余濃度以此類(lèi)推。
3,、 樣品稀釋液:1×20ml,。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml,。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片,、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè),、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片,、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片,、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE,、SILAC、iTRAQ,、TMT,、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取,、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA,、CHIP,、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色,、特殊染色,、組織切片、免疫組化,、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS,、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞,、細(xì)胞模型,、動(dòng)物模型構(gòu)建
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照,。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,,6,,5,4,,3,,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同),。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,,充分震蕩1分鐘,,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用,。 5. 換槍頭,,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用。 6. 換槍頭,,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用,。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用,。 | 二,、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),, 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC,。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒,。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),,則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),,則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍,。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加) |
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,,蓋緊管蓋,。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層,。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),,清洗RNA沉淀,。混勻后,,4℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),,先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度,。
Phospho-LAT (Tyr191) /FITC 熒光標(biāo)記磷化T細(xì)胞活化連接蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SPHK2/FITC 熒光標(biāo)記鞘氨醇激2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AIF1/IBa-1 離子鈣接頭蛋白抗體 0.1ml
Rabbit Guinea pig IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml
GDN 膠質(zhì)源性連接蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
SPHK2/FITC 熒光標(biāo)記鞘氨醇激2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
APCR(Human activated protein C resistance) ELISA Kit 人活化蛋白C抵抗Multi-class antibodies: 48T
Phospho-PLC gamma 1 (Ser1248) 磷化磷酯Cγ1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HHV8/ORF K2 人類(lèi)皰疹病毒8抗體 0.2ml
ET(Mouse endotoxin) ELISA Kit 小鼠內(nèi) 96T
PRRSV-GP5 豬藍(lán)耳病病毒GP5蛋白抗體 0.1ml
C9orf68 9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框68抗體 0.2ml
Phospho-PLC gamma 1 (Ser1248) 磷化磷酯Cγ1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit Mink IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗貂IgG 0.1ml
GDPD1 甘油磷二酯磷結(jié)構(gòu)域4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Arfaptin 1 ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
IL-1ra/FITC 熒光標(biāo)記白介-1受體拮抗劑抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Mink IgG/PE PE標(biāo)記的兔抗貂IgG 0.1ml
PP-1/FITC 熒光標(biāo)記蛋白磷酯-1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
枯草芽孢桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒50次小弧菌種屬: Vibrio mimicus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,,牛肉浸取物 3.0g,,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,,蒸餾 1.0L,,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,,則有利于產(chǎn)生芽孢,。傳代方法: ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,,掰斷,,用200μL無(wú)菌或培養(yǎng)基充分溶解,,平板涂布,,活化培養(yǎng)。
②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,,火焰灼燒,,后用無(wú)菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,,培養(yǎng),。生長(zhǎng)條件: 37℃,好氧生長(zhǎng)特性: 特征特性:G-桿菌,,氧化陽(yáng)性,;賴(lài)氨脫羧、鳥(niǎo)氨脫羧均陽(yáng)性,,精氨雙解陰性,,吲哚陽(yáng)性,尿,、伏-普實(shí)驗(yàn)均陰性,;在無(wú)NaCl的營(yíng)養(yǎng)肉湯中可生長(zhǎng);發(fā)酵葡萄糖,、甘露醇,、麥芽糖產(chǎn)不產(chǎn)氣;不發(fā)酵蔗糖、阿拉伯糖,、楊苷,。兼性厭氧,適pH7.4~7.6,。存儲(chǔ)條件: 2-8℃冷藏,,真空冷凍干燥法
大腸埃希氏菌種屬: Escherichia│coli提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物,;凍結(jié)物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 致病菌檢測(cè)芯片培養(yǎng)基: 51生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
棲污泥鹽土生古菌種屬: Haloterrigena│limicola分離基物: 鹵及底泥提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0212生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
短柄帚霉種屬: Scopulariopsis│brevicaulis提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 防霉。培養(yǎng)基: CM0014生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
胱抑A(CSTA/STF1/STFA)ELISA試劑盒2,6-二氟甲酰 97%鈉 CP蘆丁/蕓香葉苷(標(biāo)準(zhǔn)品)
胱天蛋白激活的脫氧核糖核(CAD)ELISA試劑盒諾氟沙星 98%鈉 ACS,,99.0-101.0% 新橙皮苷二氫查爾酮
胱天蛋白9(Caspase-9)ELISA試劑盒氟化,,無(wú) AR,粉末鉑銨 AR新橙皮苷二氫查爾酮(標(biāo)準(zhǔn)品)
胱天蛋白9(Casp-9)ELISA試劑盒氟化,,無(wú) GR,,粉末亞鉑銨 鉑含量:52.0%氧化苦參
胱天蛋白8(Caspase-8)ELISA試劑盒氟化,無(wú) SP亞鈀銨 Pd ≥36.5%氧化苦參(標(biāo)準(zhǔn)品)
胱天蛋白8(Casp-8)ELISA試劑盒氟化,,無(wú) 99.9% metals basis銥銨 銥含量:43.0%穿心蓮內(nèi)酯
胱天蛋白-5(CASP5)ELISA試劑盒氟化,,無(wú) AR,顆粒氧化金 金含量≥88.6 %穿心蓮內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)
胱天蛋白3(Caspase-3)ELISA試劑盒氟化,,無(wú) 電子級(jí),,粉末反式-雙(三基膦)合化羰基銠(Ⅰ) Rh 14.91%芹菜
胱天蛋白3(Casp-3)ELISA試劑盒13-乙酰基-9-羥基巴卡丁III 分析標(biāo)準(zhǔn)品,,≥99%雙()二鉑(II) Pt ≥41.0%芹菜(標(biāo)準(zhǔn)品)
胱天蛋白12(Casp-12)ELISA試劑盒13-乙?;?9-羥基巴卡丁III 99%二二氨鈀 Pd ≥50% 齊墩果
胱天蛋白10(CASP10)ELISA試劑盒10-脫乙酰基巴卡丁 III 95%銥 Ir 35% in HCl齊墩果(高純98%)
胱天蛋白1(Casp-1)ELISA試劑盒7-乙基-10-羥基喜樹(shù) 98%二氧化銥 Ir 86%齊墩果(標(biāo)準(zhǔn)品)
胱硫β-合(CBS)ELISA試劑盒鬼臼 98%銥粉 99.99% metals basis莽草
胍基丁脲解/凝集(AGMAT)ELISA試劑盒紫杉 分析標(biāo)準(zhǔn)品,,≥98% 銥粉 99.9% metals basis莽草(標(biāo)準(zhǔn)品)
骨織(Ostn)ELISA試劑盒紫杉 98%三化銥 試劑級(jí),Ir>52%羊藿苷
骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒乙甲脒 99%四化銥(IV) 合物 Ir 48.0 - 55.0 %羊藿苷(標(biāo)準(zhǔn)品)