化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服,、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭,；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解,，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè),；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理,。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照,。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),，并單獨(dú)存放,。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記,。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用,。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄,。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：香菇源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-P013375
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一,、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有,，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA,，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì),。因此,，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中,，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油,。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上,，執(zhí)行擴(kuò)增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次,，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。 4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油,；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè),。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,；
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加,。
4.除空白孔外,，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。
6.每孔加入底物A、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi),，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。
c ELISA Kit 大鼠心肌特異性肌鈣蛋白TMulti-class antibodies： 48T
Talin 踝蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Chicken IgG whole serum 羊抗雞IgG抗血清 1ml
GAD-Ab ELISA Kit 大鼠谷脫羧自身抗體 96T
Nestin 巢蛋白/神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白抗體 0.1ml
B-Raf B Raf抗體 0.1ml
Talin 踝蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
TA(Human teichoic acid antibody) ELISA Kit 人抗磷壁抗體Multi-class antibodies： 48T
IL-9 白介9抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MAFbx/Fbx32 泛蛋白連接抗體 0.2ml
GP-MM(Human Glycogen phosphorylase MM) ELISA Kit 人糖原磷化同工MM 96T
RACK1 受體激活蛋白激C1抗體 0.2ml
Cyclin H 周期H抗體 0.2ml
IL-9 白介9抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit Monkey IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.5ml
GCDGP15 囊性組織液體蛋白15抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ANKRD26 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體 0.2ml
Integrin alpha E2 /FITC 熒光標(biāo)記整合alpha E2 抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG F(ab')2/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 0.1ml
Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) /FITC 熒光標(biāo)記磷化S6核糖體蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
香菇源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒人增殖相關(guān)蛋白2G4 （PA2G4）elisa檢測(cè)試劑盒
人因子Ⅷ（F8）elisa檢測(cè)試劑盒
人XIII型膠原 （COL13）elisa檢測(cè)試劑盒
人間隙連接蛋白31（CX31）elisa檢測(cè)試劑盒
人補(bǔ)體片段3c（C3c）elisa檢測(cè)試劑盒
人FMS樣酪3（Flt3）elisa檢測(cè)試劑盒
人結(jié)腸癌抗原（CCA）elisa檢測(cè)試劑盒
人D-二聚體（D2D）elisa檢測(cè)試劑盒
人XIV型膠原 （COL14）elisa檢測(cè)試劑盒
人EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成抗體（EJ/GlyRS）elisa檢測(cè)試劑盒
人DNA結(jié)合蛋白（DBP）elisa檢測(cè)試劑盒
人Dickkopf 相關(guān)蛋白2（DKK2）elisa檢測(cè)試劑盒
人Bκ 輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε（Nfkbie）elisa檢測(cè)試劑盒
人分泌粒蛋白II （SCG2）elisa檢測(cè)試劑盒
人B因子（BF）elisa檢測(cè)試劑盒
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