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詳細介紹
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,，各區(qū)實驗服、儀器,、耗材應(yīng)獨立使用,，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭,；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理,。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰,、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,，并應(yīng)瞬時離心,。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放,。
6.為防止熒光干擾,，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記,。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置,；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,，淬滅基因選擇None,。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：豬源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號：FS-P013367
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一,、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有,，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA,，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計,。因此,，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中,，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油,。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次,，zui后在72℃ 保溫7min,。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油,；否則,，直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加。
4.除空白孔外,，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）,。
6.每孔加入底物A、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值。
ACE I ELISA Kit 大鼠血管緊張Ⅰ轉(zhuǎn)化Multi-class antibodies： 48T
Tat 細胞酪轉(zhuǎn)氨抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Chicken IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的羊抗雞IgG 0.1ml
ACA-IgA ELISA Kit 大鼠抗心磷脂抗體IgA 96T
NXPH2 神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白2抗體 0.2ml
CD238 凱爾血型糖蛋白CD238抗體 0.2ml
Tat 細胞酪轉(zhuǎn)氨抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
IL-18(Human Interleukin 18) ELISA KIT 人白介18Multi-class antibodies： 48T
GFAP 膠質(zhì)纖維性蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Guinea pig IgG/Bio 生物標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
MYS(Human Myosin) ELISA Kit 人肌球蛋白 96T
RAD51C 癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗體 0.2ml
Phospho-cdc25A (Ser293) 磷化細胞分裂周期蛋白25抗體 0.1ml
GFAP 膠質(zhì)纖維性蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit MK IgM/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.1ml
GLO1 乙二1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ANKRD11 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體 0.2ml
Phospho-IRAK1 (Thr387) /FITC 熒光標(biāo)記磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG F(ab')2 whole serum 兔抗人IgG F(ab')2抗血清 1ml
SCF/FITC 熒光標(biāo)記干細胞生長因子抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
豬源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒人質(zhì)膜膜泡關(guān)聯(lián)蛋白 （PLVAP）elisa檢測試劑盒
人叉頭框蛋白O4（FOXO4）elisa檢測試劑盒
人成骨生長肽/成骨多肽（OGP）elisa檢測試劑盒
人成纖維生長因子23（FGF23）elisa檢測試劑盒
人角質(zhì)轉(zhuǎn)谷氨酰（TGM1）elisa檢測試劑盒
人信號7A（SEMA7A）elisa檢測試劑盒
人叉頭框蛋白C1（FOXC1）elisa檢測試劑盒
人促甲狀腺釋放（TRH）elisa檢測試劑盒
人半乳凝集8（GAL8）elisa檢測試劑盒
人肝配蛋白A3 （EFNA3）elisa檢測試劑盒
人丙酮脫氫α（PDHα）elisa檢測試劑盒
人成纖維生長因子結(jié)合蛋白1（FGFBP1）elisa檢測試劑盒
人促睡眠肽α（δSIP-α）elisa檢測試劑盒
人表面膜球蛋白D（mIgD）elisa檢測試劑盒
人雌受體α（ERα）elisa檢測試劑盒
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