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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱(chēng)：蕎麥源性成分核酸檢測(cè)試劑盒48T0.2PCR管
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-02R6436
產(chǎn)品規(guī)格：48T 0.2PCR管
產(chǎn)品分類(lèi)：PCR-熒光探針?lè)?/span>
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一,、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有,，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA,，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì),。因此,，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二,、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次,，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。 4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油,；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè),。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服,、儀器,、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用,；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭,；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作,；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線(xiàn)殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè),；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照,。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),，并單獨(dú)存放,。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記,。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用,。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄,。
Megsin/SER—PINB7 /FITC 熒光標(biāo)記絲(或半胱)蛋白抑制劑B7抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TLR6/CD286/FITC 熒光標(biāo)記Toll樣受體6抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Acetyl-Histone H4(K5) 乙?；M蛋白H4抗體 0.1ml
Rabbit Biotin/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗生物抗體IgG 0.1ml
GPR31 G蛋白偶聯(lián)受體31抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Biotin/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗生物抗體IgG 0.1ml
TLR6/CD286/FITC 熒光標(biāo)記Toll樣受體6抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
AACT(Human Alpha1 Antichymotrypsin) ELISA Kit 人α1抗胰糜蛋白Multi-class antibodies： 48T
HSA 人血清白蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MBD1/PCM1 甲基化CpG結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
PLC Gamma1(Human Phospholipase C Gamma1) ELISA Kit 人磷酯Cγ鏈 96T
RELM alpha 抵抗樣分子α抗體 0.2ml
C10orf62 10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框62抗體 0.2ml
HSA 人血清白蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit Guinea pig IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.3ml
GLUT3 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh AGT 血管緊張?jiān)贵w 0.1ml
Phospho-RSK2 (Ser227) /FITC 熒光標(biāo)記磷化核糖體S6激RSK2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgG/PE PE標(biāo)記的兔抗羊IgG 0.1ml
SRG2 /FITC 熒光標(biāo)記突觸結(jié)合蛋白相關(guān)基因2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
蕎麥源性成分核酸檢測(cè)試劑盒48T0.2PCR管猴血管活性腸肽（VIP）elisa檢測(cè)試劑盒
猴活化蛋白C（APC）elisa檢測(cè)試劑盒
猴腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2（ABCG2）elisa檢測(cè)試劑盒
猴鈣調(diào)結(jié)合蛋白（CALD）elisa檢測(cè)試劑盒
豚鼠補(bǔ)體C5轉(zhuǎn)化（C5c）elisa檢測(cè)試劑盒
兔球蛋白G Fc片段（Fcγ）elisa檢測(cè)試劑盒
猴I型膠原交聯(lián)氨基端肽（NTXI）elisa檢測(cè)試劑盒
猴抗胰島受體抗體（AIRA）elisa檢測(cè)試劑盒
兔緊密連接蛋白Claudin 4（CLDN4）elisa檢測(cè)試劑盒
猴三葉因子1（TFF1）elisa檢測(cè)試劑盒
猴血型糖蛋白E（GYPE）elisa檢測(cè)試劑盒
猴趨化因子C-C-基元配體1（CCL1）elisa檢測(cè)試劑盒
兔因子XI（F11）elisa檢測(cè)試劑盒
兔α平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）elisa檢測(cè)試劑盒
兔磷脂A2活蛋白（PLAA）elisa檢測(cè)試劑盒
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL,；空白孔不加,。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿(mǎn)洗滌液（350μL），靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。
6.每孔加入底物A,、B各50μL，37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。
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