詳細介紹
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2,、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),,分別配制成200 U/L,100 U/L,,50 U/L,,25 U/L,12.5 U/L,,6.25 U/L,,3.12 U/L,,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,其余濃度以此類推,。
3,、 樣品稀釋液:1×20ml。
4,、 檢測稀釋液A:1×10ml,。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途,!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T 0.2PCR管 | FS-02R6434 |
使用方法:
一,、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照,。 2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,,6,,5,4,,3,,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同),。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。 5. 換槍頭,,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。 6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,,充分震蕩1分鐘,,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照,。放冰上待用,。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品,,必須設(shè)置N+2個提取,, 多出的一個是PC(樣品制備陽性對照), 一個是NC(樣品制備陰性對照),。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,,以此作為PC,。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,,則PC和NC的體積也必須是200μL,。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒,。 | 三,、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行) 10. 如果只做1次重復(fù),,則標(biāo)記N+9個PCR管,,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,,6個用于PCR陽性對照,。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍,。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù),。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片,、SNP檢測,、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片,、LncRNA芯片,、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE,、SILAC,、iTRAQ、TMT,、Label-free,、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取,、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot,、Co-ip EMSA,、CHIP、免疫熒光,、ELISA
6.病理檢測:HE染色,、特殊染色,、組織切片,、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS,、LC-MS,、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型,、動物模型構(gòu)建
MK1/ MAPKK 1/FITC 熒光標(biāo)記MK1/ MAPKK 1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
TLR9/CD289/FITC 熒光標(biāo)記Toll樣受體9抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Acetyl-Histone H4(K16) 乙?;M蛋白H4(K16)抗體 0.1ml
Rabbit Biotin/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗生物抗體IgG 0.5ml
GPR3 G蛋白偶聯(lián)受體3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Biotin/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗生物抗體IgG 0.1ml
TLR9/CD289/FITC 熒光標(biāo)記Toll樣受體9抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
ASA(Human Somatic Muscle Antibody) ELISA Kit 人抗骨骼肌抗體Multi-class antibodies: 48T
ILTV 雞傳染性喉氣管炎病毒抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LOXL2 賴氨酰氧化相關(guān)蛋白2抗體 0.2ml
GPC-3(Human Glypican-3) ELISA Kit 人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 96T
Renalase 腎胺抗體 0.2ml
CK15 細胞角蛋白15抗體 0.1ml
ILTV 雞傳染性喉氣管炎病毒抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit Guinea pig IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
Glucocorticoid receptor(GR) 糖皮質(zhì)受體抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh AGPHD1 氨基糖苷類磷結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 0.2ml
Phospho-RSK3 (Thr353/356) /FITC 熒光標(biāo)記磷化核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗羊IgG 0.5ml
SRG5/SPATA12/FITC 熒光標(biāo)記發(fā)生相關(guān)基因5抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
大豆源性成分核酸檢測試劑盒48T0.2PCR管豚鼠神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)elisa檢測試劑盒
兔轉(zhuǎn)錄活因子-1(ATF-1)elisa檢測試劑盒
兔β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)elisa檢測試劑盒
兔端粒相關(guān)蛋白1(TEP1)elisa檢測試劑盒
猴周期依賴性5(CDK5)elisa檢測試劑盒
猴嗜性白血球相關(guān)之RNA解酵家族成員12(EAR12)elisa檢測試劑盒
兔血管緊張III(ANG III)elisa檢測試劑盒
兔鞘磷脂脂質(zhì)蛋白1(PLP1)elisa檢測試劑盒
猴脫氧核糖核I(DNase-I)elisa檢測試劑盒
豚鼠接觸蛋白1(CNTN1)elisa檢測試劑盒
豚鼠球蛋白G Fc段低親和力受體IIIa(FcγR3A)elisa檢測試劑盒
猴纖維蛋白原相關(guān)蛋白1(FGL1)elisa檢測試劑盒
猴GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)elisa檢測試劑盒
猴二肽基肽VI (DPP6)elisa檢測試劑盒
豚鼠周期依賴性4(CDK4)elisa檢測試劑盒
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,,15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,,中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,,于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),,清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,,測定RNA溶液 濃度和純度。