詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產品名稱:諾如病毒GⅡ型RNAPCR檢測試劑盒
產品貨號:FS-02R6338
產品規(guī)格:48T
產品分類:恒溫熒光法
產品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物,??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,,需要根據(jù)你的模板鏈設計,。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP,、dCTP,、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二,、操作步驟 1.在冰浴中,,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油,。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min,。 3.結束反應,,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測,。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,,各區(qū)實驗服,、儀器,、耗材應獨立使用,,不能混用,;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭,;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解,,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理,。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照,。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),,并單獨存放,。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,,并應避免在PCR反應管上進行任何標記,。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置,;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,,淬滅基因選擇None,。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL,;空白孔不加。
4.除空白孔外,,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板),。
6.每孔加入底物A、B各50μL,,37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,,在450nm波長處測定各孔的OD值,。
CD44v4 /FITC 熒光標記兔抗人、大,、小鼠CD44V4抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
TRT/TERT/PE 熒光PE標記端??贵wIgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CD7 CD7抗體 0.1ml
PARP(poly ADP-ribose polymerase)N-Terminus 多腺苷二磷多聚抗原(N端) 0.5mg
I-309 嗜粒細胞趨化蛋白CCL1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh TAP2/ABCB3 ATP結合轉運因子2抗體 0.2ml
TRT/TERT/PE 熒光PE標記端粒抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
MCP-3/CCL7(Human monocyte chemotactic protein 3) ELISA kit 人單核細胞趨化蛋白3Multi-class antibodies: 48T
Glycodelin A/PP14 胎盤蛋白14抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Bov IgG/Cy7 Cy7標記的小鼠抗IgG 0.1ml
Tn-T(Human Troponin T) ELISA Kit 人肌鈣蛋白T 96T
RNF157 環(huán)指蛋白157抗體 0.2ml
C1GALT1 N-乙酰半乳糖胺糖蛋白3,、β-半乳糖轉移1抗體 0.2ml
Glycodelin A/PP14 胎盤蛋白14抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit Bovine IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗IgM 0.1ml
GGA3 γ-銜接蛋白相關蛋白3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Actin α/alpha-SMA 肌動蛋白α(α-SMA)抗體 0.1ml
MCM5/CDC46/FITC 熒光標記染色體維持缺陷蛋白5抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bov IgG/Cy5 Cy5標記的兔抗IgG 0.1ml
Rarres3/TIG3/Chemerin/FITC 熒光標記視黃受體應答蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
諾如病毒GⅡ型RNAPCR檢測試劑盒通用型野油菜黃單孢菌柑桔致病變種(Xanthomonas campestris pv.citri,;Xccit) 基因檢測試劑盒20次豬表皮生長因子elisa檢測試劑盒
通用型野油菜黃單胞萬年青致病變種(Xanthomonas campestris pv.dieffenbachiae;Xcd)基因檢測試劑盒20次兔抗內皮抗體elisa檢測試劑盒
通用型稻白葉枯病野油菜假單孢菌稻變種(Xanthomonas campestris pv.oryzae,;Xco)基因檢測試劑盒20次兔子血小板活化因子elisa檢測試劑盒價格
通用型野油菜黃單胞菌菜豆疫病致病變種(Xanthomonas campestris pv.pelargonii,;Xcp)基因檢測試劑盒20次豬血小板衍生生長因子elisa檢測試劑盒
通用型野油菜黃單胞菌菜豆疫病致病變種(Xanthomonas campestris pv.phaseoli;Xcph)基因檢測試劑盒20次兔子球蛋白Gelisa檢測試劑盒
通用型番茄瘡痂病辣椒斑點病菌(Xanthomonas campestris pv.vesicatoria;Xcv)基因檢測試劑盒20次綿羊白介2受體elisa檢測試劑盒
通用型角胡麻葉斑病嗜麥芽黃黃單胞菌(Xanthomonas maltophilia,;Xm)基因檢測試劑盒20次犬C肽elisa檢測試劑盒
通用型柑桔枯萎病茍養(yǎng)木桿菌(Xylella fastidiosa,;Xf)20次兔子內皮抑elisa檢測試劑盒
基因檢測試劑盒兔子表皮生長因子elisa檢測試劑盒
通用型甘薯黑斑病(Ceratocystis fimbriata)基因檢測試劑盒20次鴨病性腸炎病elisa檢測試劑盒
體液乳果糖(lactulose)含量偶聯(lián)反應比色法檢測試劑盒20次兔子內皮1elisa檢測試劑盒
食品乳果糖(lactulose)含量偶聯(lián)反應比色法檢測試劑盒20次山羊白介10elisa檢測試劑盒
糖漿乳果糖(lactulose)含量偶聯(lián)反應比色法檢測試劑盒20次犬5羥色elisa檢測試劑盒
乳果糖待測樣品處理試劑盒20次鴨白介8elisa檢測試劑盒
體液甘露醇含量比色法檢測試劑盒20次猴胰島elisa檢測試劑盒