化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T 0.2PCR管 | FS-02R6432 |
組成及試劑配制:
1,、酶標板：一塊（96孔）
2,、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解,，其濃度為200 U/L,，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋）,，分別配制成200 U/L,，100 U/L,，50 U/L，25 U/L,，12.5 U/L,，6.25 U/L，3.12 U/L,，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可,，其余濃度以此類推,。
3、 樣品稀釋液：1×20ml,。
4,、 檢測稀釋液A：1×10ml。
實驗外包:
1.基因組學：基因芯片,、SNP檢測,、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學：microRNA芯片,、LncRNA芯片,、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學：2D-DIGE,、SILAC,、iTRAQ、TMT,、Label-free,、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot,、Co-ip EMSA、CHIP,、免疫熒光,、ELISA
6.病理檢測：HE染色、特殊染色,、組織切片,、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學：GC-MS,、LC-MS,、NMR
8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型,、動物模型構(gòu)建
使用方法：
一,、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例） 1. 注意：由于標準品濃度非常高,，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）,。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照,。 2. 標記6個離心管,，分別為7，6,，5,，4，3,，2,。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）,。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。 5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),，充分震蕩1分鐘,，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。 6. 換槍頭,，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘,，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。 7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照,。放冰上待用,。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品,，必須設置N+2個提取,， 多出的一個是PC（樣品制備陽性對照）， 一個是NC（樣品制備陰性對照）,。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL,，10μL相當于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,，以此作為PC,。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL,。 9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒,。 | 三,、設置qPCR反應（20 μL體系，在樣品制備室進行） 10. 如果只做1次重復,，則標記N+9個PCR管,，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照,，6個用于PCR陽性對照,。如果做2-3次重復，則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍,。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復,。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）
|
PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞,，室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋,。手動劇烈振蕩管體15秒后,，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,，混勻后15到30℃孵育10分鐘后,，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液,，每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀,?；靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,，使其*溶解,，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度,。
Phospho-MK1/2 (Ser217/221)/FITC 熒光標記磷化原活化蛋白激激1/2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TM/FITC 熒光標記血栓調(diào)節(jié)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Acetyl-Histone H3(K9) 乙?；M蛋白H3抗體 0.1ml
Rabbit Biotin/AP 性磷(AP)標記的兔抗生物抗體IgG 0.1ml
GPR26 G蛋白偶聯(lián)受體26抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Biotin/APC APC標記的兔抗生物抗體IgG 0.1ml
TM/FITC 熒光標記血栓調(diào)節(jié)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Human IgA antibody ELISA Kit 人抗IgA抗體Multi-class antibodies： 48T
IL-17C 白介-17C抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Lxn/Latexin 羧肽抑制劑抗體 0.1ml
1,5-AG(Human 1,5-anhydroglucitol) ELISA Kit 人1,5-脫葡萄糖醇/1,5-脫山梨 96T
Renin 腎/血管緊張形成Ren1抗體 0.1ml
CCL20/MIP3 alpha 巨噬細胞炎性蛋白MIP-3a抗體 0.1ml
IL-17C 白介-17C抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
GLUT4 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh AGPAT4 溶血磷脂酰基轉(zhuǎn)移D抗體 0.2ml
Phospho-RSK3 (Thr356/Ser360) /FITC 熒光標記磷化核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgG/Cy7 Cy7標記的兔抗羊IgG 0.1ml
52KDa Ro/SSA /FITC 熒光標記核糖核蛋白抗原52kD-Ro/SSA抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
榛果源性核酸檢測試劑盒48T0.2PCR管豬半乳凝集8（GAL8）elisa檢測試劑盒
豬II型前膠原羧基端原肽（PIICP）elisa檢測試劑盒
豬半胱氨酰白三烯受體2（CYSLTR2）elisa檢測試劑盒
猴多肽YY （PYY）elisa檢測試劑盒
猴αL巖藻糖苷（FUCA）elisa檢測試劑盒
猴黑瘤抑制性活性蛋白1（MIA1）elisa檢測試劑盒
兔碳酐IX （CA9）elisa檢測試劑盒
豚鼠低密度脂蛋白（LDL）elisa檢測試劑盒
豚鼠半胱氨酰白三烯受體2（CYSLTR2）elisa檢測試劑盒
豚鼠磷烯醇式丙酮羧1（PCK1）elisa檢測試劑盒
兔滑行蛋白α（TXLNa）elisa檢測試劑盒
豚鼠胰高血糖樣肽1（GLP-1）elisa檢測試劑盒
豚鼠磷脂爬行1（PLSCR1）elisa檢測試劑盒
豚鼠非紅血影蛋白β4 （SPTβN4）elisa檢測試劑盒
兔外顯肽（Extein）elisa檢測試劑盒
化工儀器網(wǎng)