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詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：牛腺病毒3型探針法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013491
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,，而不能從無到有，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物,。可以是DNA也可以是RNA,，一般20多bp,，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二,、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次,，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測,。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服,、儀器,、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用,；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭,；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,，樣本處理在生物安全柜中進行操作,；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解,，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,，且完成實驗后立即上機檢測,；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理,。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰,、陽性對照,。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心,。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記,。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置,；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,，淬滅基因選擇None,。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加,。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）,。
6.每孔加入底物A,、B各50μL，37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值,。
LCAT/FITC 熒光標記卵磷?；D(zhuǎn)移抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
SREBP-1/FITC 熒光標記調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AHSG/Fetuin A/Alpha 2 HS Glycoprotein 胎球蛋白A 0.1ml
Rabbit Guinea pig IgM/AP 性磷(AP)標記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml
Ghrelin 腦腸肽抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM 兔抗羊IgM 1mg
SREBP-1/FITC 熒光標記調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
PDXP(Human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase) ELISA Kit 人吡哆/吡哆醇B6磷Multi-class antibodies： 48T
mucin 5B/Muc5B 粘蛋白-5B抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Influenza A virus (Duck) 鴨流感病毒抗體 0.2ml
Human SS-B/La Antibody ELISA Kit 人抗SS-B/La抗體 96T
PSCA 前列腺干細胞抗原抗體 0.1ml
CCDC74B 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白74B抗體 0.1ml
mucin 5B/Muc5B 粘蛋白-5B抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit MG IgG/PE PE標記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml
Guanylyl Cyclase alpha 2 鳥苷環(huán)化α2/GCS-α-2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AQP2 通道蛋白-2抗體 0.1ml
IL-3/FITC (mouse, rat) 熒光標記白介3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Mink IgG/AP 性磷(AP)標記的兔抗貂IgG 0.1ml
PPIG/FITC 熒光標記親環(huán)蛋白(親環(huán))PPIG抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
牛腺病毒3型探針法熒光定量PCR試劑盒50次鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
胞內(nèi)分枝桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium intracellulare提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法
分枝桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium pyrenivorans提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長條件: 28存儲條件: 真空冷凍干燥法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
甲狀旁腺1-34(PTH 1-34)ELISA試劑盒鄰氨基 98%2-氟-3-甲氧基 97%十溴二
甲狀旁腺(PTH)ELISA試劑盒3，3-二基 99%2-氟-4- 96%氨基雜環(huán)鹽鹽
甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒1-二氫茚酮 99%2-氟-5-三氟 98%春雷霉;春日霉; 克死霉
甲酰甲硫氨(fMet)ELISA試劑盒二酰 97%2-氟-6-甲氧基 98%土拉霉A,，托拉菌A,泰拉霉
甲肟前列腺D2(PGD2-MOX)ELISA試劑盒4-硝基肉桂 98%3-氟-4- 97%土拉霉A(標準品)
甲基化(Methylase)ELISA試劑盒二 98%4-氟 99%拉氧頭孢鈉
甲基化CpG結(jié)合蛋白2(MECP2)ELISA試劑盒3,4,5-氧基肉桂 99%2-氟-4-(三氟甲基) 97%原花青
喋呤(MTX)ELISA試劑盒二基（2,，4，6-?；┭趸?97%3-羥 97%原花青（標準品）
己糖激3(HK3)ELISA試劑盒槲皮,二 97%2-羥基 97%胡椒
己糖激(HK)ELISA試劑盒槲皮 分析標準品,，≥98.5%3-羥基 97%胡椒(標準品)
幾丁質(zhì)3樣蛋白1(YKL-40/CHI3L1)ELISA試劑盒槲皮 97%4-異喹啉鹽鹽 98%紐莫康定B0(肺囊康定)
幾丁質(zhì)1(殼三糖)(CHIT1)ELISA試劑盒槲皮,二 分析標準品，≥98% (HPLC)4-異基 98%福莫特羅
集落激因子(CSF)ELISA試劑盒L-鼠李糖,，一 99%4-異氧基 98%溴甲后馬托品
集蛋白亞家族成員11(COLEC11)ELISA試劑盒二氧化硫脲 98%6-甲氧基-2-萘 97%乙阿比特龍酯
低密度脂蛋白受體(VLDLR)ELISA試劑盒4,5-二鄰二 98%4-甲氧基-2-三氟 96%溴莫尼定
低密度脂蛋白(VLDL)ELISA試劑盒甲酰肼 90%3-甲氧基羰基 97%磺草靈
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