化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
實驗外包:
1.基因組學：基因芯片、SNP檢測,、DNA甲基化檢測,、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學：microRNA芯片、LncRNA芯片,、表達譜芯片,、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學：2D-DIGE、SILAC,、iTRAQ,、TMT、Label-free,、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取,、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot,、Co-ip EMSA,、CHIP、免疫熒光,、ELISA
6.病理檢測：HE染色、特殊染色,、組織切片,、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學：GC-MS,、LC-MS,、NMR
8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型,、動物模型構建
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
50次 | FS-P013364 |
組成及試劑配制:
1,、酶標板：一塊（96孔）
2,、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解,，其濃度為200 U/L,，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L,，100 U/L,，50 U/L，25 U/L,，12.5 U/L,，6.25 U/L，3.12 U/L,，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可,，其余濃度以此類推,。
3、 樣品稀釋液：1×20ml,。
4,、 檢測稀釋液A：1×10ml。
使用方法：
一,、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例） 1. 注意：由于標準品濃度非常高,，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）,。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照,。 2. 標記6個離心管,，分別為7，6,，5,，4，3,，2,。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,，充分震蕩1分鐘,，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。 5. 換槍頭,，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘,，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。 6. 換槍頭,，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。 7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用,。 | 二,、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品，必須設置N+2個提取,， 多出的一個是PC（樣品制備陽性對照）,， 一個是NC（樣品制備陰性對照）。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL,，10μL相當于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL,，10μL相當于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC,。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL,。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三,、設置qPCR反應（20 μL體系,，在樣品制備室進行） 10. 如果只做1次重復，則標記N+9個PCR管,，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照,。如果做2-3次重復，則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復,。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）
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PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,，15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,，中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后,，于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,，每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,，使其*溶解,，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度,。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
GnRHR ELISA Kit 大鼠促性腺釋放受體Multi-class antibodies： 48T
Tau protein 微管相關蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Chicken IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的羊抗雞IgG 0.1ml
ACA-IgM ELISA Kit 大鼠抗心磷脂抗體IgM 96T
NR2E1 核受體蛋白NR2E1抗體 0.2ml
Blood Group Antigen Precursor 血型抗原前體蛋白抗體 0.2ml
Tau protein 微管相關蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
AhCGAb(Human chorionic gonadotropin-antibody) ELISA Kit 人抗染色體抗體Multi-class antibodies： 48T
phospho-IKK gamma (Ser85) 磷化KB抑制蛋白激γ抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAGE-1 黑色瘤相關抗原抗體 0.1ml
C I CP(Human cross-linked C-telopeptides of Type I collagen) ELISA Kit 人Ⅰ型前膠原C末端肽 96T
RAD9 細胞周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體 0.1ml
CDKN2A/p16-INK4a 抑癌基因p16抗體 0.1ml
phospho-IKK gamma (Ser85) 磷化KB抑制蛋白激γ抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit Monkey IgM/Cy3 Cy3標記的兔抗猴IgM 0.1ml
Gab2 接頭蛋白Gab 2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ANKLE2 ANKLE2蛋白抗體 0.2ml
IRF-1/FITC 熒光標記干擾調(diào)節(jié)因子抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgA 兔抗人球蛋白A 0.2ml
SCN2A/FITC 熒光標記電壓閥門鈉通道蛋白a2/癲癇相關蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
羊源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒人白共同抗原（LCA/CD45）elisa檢測試劑盒
人丙酮脫氫磷（PDP）elisa檢測試劑盒
人過氧化還原1（PRDX1）elisa檢測試劑盒
人半乳凝集14（GAL14）elisa檢測試劑盒
人肝配蛋白A受體3 （EPHA3）elisa檢測試劑盒
人丙酮脫氫β（PDHβ）elisa檢測試劑盒
人磷脂A2受體1（PLA2R1）elisa檢測試劑盒
人胞漿型磷脂A2（cPLA2）elisa檢測試劑盒
人單核趨化蛋白2（MCP-2/CCL8）elisa檢測試劑盒
人八聚體結合轉(zhuǎn)錄因子4（OCT4）elisa檢測試劑盒
人半胱氨酰白三烯受體2（CYSLTR2）elisa檢測試劑盒
人密封蛋白（OCLN）elisa檢測試劑盒
人轉(zhuǎn)膠蛋白（TAGLN）elisa檢測試劑盒
人靶向核糖核（TR）elisa檢測試劑盒
人白三烯C4（LTC4）elisa檢測試劑盒
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