化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
實驗外包:
1.基因組學(xué)：基因芯片,、SNP檢測,、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片,、LncRNA芯片,、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE,、SILAC,、iTRAQ、TMT,、Label-free,、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot,、Co-ip EMSA、CHIP,、免疫熒光,、ELISA
6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片,、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS,、LC-MS,、NMR
8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型,、動物模型構(gòu)建
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
50次 | FS-P013363 |
組成及試劑配制:
1,、酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶,，請臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘,，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋）,，分別配制成200 U/L,，100 U/L，50 U/L,，25 U/L,，12.5 U/L，6.25 U/L,，3.12 U/L,，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,，混勻即可,，其余濃度以此類推。
3,、 樣品稀釋液：1×20ml,。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml,。
使用方法：
一,、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例） 1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）,。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照,。 2. 標(biāo)記6個離心管，分別為7,，6,，5,，4，3,，2,。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）,。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。 5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),，充分震蕩1分鐘,，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。 6. 換槍頭,，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘,，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照,。放冰上待用,。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品,，必須設(shè)置N+2個提取,， 多出的一個是PC（樣品制備陽性對照）， 一個是NC（樣品制備陰性對照）,。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL,，10μL相當(dāng)于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,，以此作為PC,。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,，則PC和NC的體積也必須是200μL,。 9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒,。 | 三,、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系，在樣品制備室進行） 10. 如果只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個PCR管,，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照,。如果做2-3次重復(fù),，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù),。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）
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PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞,，室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋,。手動劇烈振蕩管體15秒后,，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,，混勻后15到30℃孵育10分鐘后,，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液,，每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀,?；靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度,。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
LY-86/MD-1/FITC 熒光標(biāo)記MD-1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Tau protein/FITC 熒光標(biāo)記微管相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADCY1 腺苷環(huán)化1抗體 0.2ml
Rabbit dog IgG/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗狗IgG 0.1ml
GLRB 甘受體β/GlyR β抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgG/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗雞IgG 0.1ml
Tau protein/FITC 熒光標(biāo)記微管相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
HPA(Human Heparanase) ELISA kit 人乙酰肝Multi-class antibodies： 48T
HSD11B2/HSD2 羥基類固醇脫氫11β2抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MASP2 甘露聚糖結(jié)合凝集絲肽2抗體 0.1ml
ADAM10(Human A Disintegrin And Metalloprotease 10) ELISA Kit 人解整合樣金屬蛋白10 96T
Radical Fringe β1,3-N-乙酰糖基轉(zhuǎn)移抗體 0.2ml
CCL26 C-C元件趨化因子26抗體 0.2ml
HSD11B2/HSD2 羥基類固醇脫氫11β2抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit MK IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.1ml
GSTP1 谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移pi基因抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ANKHD1 艾滋病病毒制約錨定蛋白抗體 0.2ml
IRF3 /FITC 熒光標(biāo)記干擾調(diào)節(jié)因子3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit horse IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml
SCN9A/NAV1.7/FITC 熒光標(biāo)記電壓開啟的鈉離子通道SCN9AIgGMulti-class antibodies： 0.2ml
鴨源性成分PCR檢測試劑盒人八聚體轉(zhuǎn)錄因子2A（OTF2A）elisa檢測試劑盒
人大腦糖原磷化（PYGB）elisa檢測試劑盒
人血管內(nèi)皮生長因子受體1（VEGFR1/FLT1）elisa檢測試劑盒
人叉頭框蛋白O2（FOXO2）elisa檢測試劑盒
人白三烯E4（LTE4）elisa檢測試劑盒
人促有絲分裂因子（MF/MPF）elisa檢測試劑盒
人單氧化A（MAOA）elisa檢測試劑盒
人叉頭框蛋白P3（FOXP3）elisa檢測試劑盒
人叉頭框蛋白O1（FOXO1）elisa檢測試劑盒
人彈性蛋白4（ELA4）elisa檢測試劑盒
人肝配蛋白A受體1 （EPHA1）elisa檢測試劑盒
人長效甲狀腺（LATS）elisa檢測試劑盒
人垂體腺苷環(huán)化活肽受體 （PACAPR）elisa檢測試劑盒
人單核趨化蛋白4（MCP-4/CCL13）elisa檢測試劑盒
人XII B組磷脂A2（PLA2G12B）elisa檢測試劑盒
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