詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2,、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),,分別配制成200 U/L,100 U/L,,50 U/L,,25 U/L,12.5 U/L,,6.25 U/L,,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,其余濃度以此類推,。
3,、 樣品稀釋液:1×20ml。
4,、 檢測稀釋液A:1×10ml,。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途,!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T 0.1PCR管 | FS-02R6411 |
使用方法:
一,、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照,。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,,分別為7,6,,5,,4,3,,2,。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同),。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。 5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩1分鐘,,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。 6. 換槍頭,,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對照,。放冰上待用,。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對照),。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,,以此作為PC,。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,,則PC和NC的體積也必須是200μL,。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒,。 | 三,、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,,1個(gè)用于PCR陰性對照,6個(gè)用于PCR陽性對照,。如果做2-3次重復(fù),,則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù),。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測,、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片,、LncRNA芯片,、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE,、SILAC,、iTRAQ、TMT,、Label-free,、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot,、Co-ip EMSA、CHIP,、免疫熒光,、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色,、組織切片,、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS,、LC-MS,、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型,、動物模型構(gòu)建
CA(Mouse carbonic anhydrase) ELISA Kit 小鼠碳酐Multi-class antibodies: 48T
TNFRSF13B/TNFRSF14B/TACI/FITC 熒光標(biāo)記壞死因子受體超家族成員13B抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey human IgG 驢抗人IgG 1mg
5-HT (Rabbit 5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit 兔子5羥色胺 96T
MLX 轉(zhuǎn)化因子樣蛋白4抗體 0.2ml
ARSB 芳基酯B抗體 0.2ml
TNFRSF13B/TNFRSF14B/TACI/FITC 熒光標(biāo)記壞死因子受體超家族成員13B抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
GDH/GLDH(Human Glutamate dehydrogenase) ELISA Kit 人谷脫氫Multi-class antibodies: 48T
Phospho-HSP27 (Ser78) 磷化熱休克蛋白27抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAS1 GTP結(jié)合蛋白MAS1抗體 0.1ml
ACE I (Human Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit 人血管緊張Ⅰ轉(zhuǎn)化 96T
RFX4 轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子RFX4抗體 0.2ml
Calcitonin receptor 降鈣受體抗體 0.1ml
Phospho-HSP27 (Ser78) 磷化熱休克蛋白27抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit Goat IgM/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
phospho-gp130 (Ser782) 磷化gp130抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh AER61 未知糖基化轉(zhuǎn)移AER61抗體 0.2ml
LHRH/GNRH /FITC 熒光標(biāo)記黃體釋放抗體/促性腺釋放抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗狗IgG 0.3ml
STEAP1/FITC 熒光標(biāo)記前列腺跨膜上皮抗原1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
魚源性成分核酸檢測試劑盒48T0.1PCR管豬核孔蛋白98kda(NUP98)elisa檢測試劑盒
豬核孔蛋白35kda(NUP35)elisa檢測試劑盒
豬纖維蛋白肽B(FPB)elisa檢測試劑盒
豬前列腺內(nèi)過氧化物合1(PTGS1)elisa檢測試劑盒
豬甲狀旁腺樣蛋白(PLP)elisa檢測試劑盒
豬α肌動蛋白(α Actin)elisa檢測試劑盒
豬骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)elisa檢測試劑盒
豬胱天蛋白11(CASP11)elisa檢測試劑盒
豬卵泡受體(FSHR)elisa檢測試劑盒
豬β甘露糖苷(β Manase)elisa檢測試劑盒
豬核轉(zhuǎn)錄因子Y亞基γ(NFYC)elisa檢測試劑盒
豬基膜聚糖(LUM)elisa檢測試劑盒
豬促甲狀腺(TSH)elisa檢測試劑盒
豬非紅血影蛋白β4 (SPTβN4)elisa檢測試劑盒
豬色氨酰tRNA合成(WARS)elisa檢測試劑盒
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,,蓋緊管蓋,。手動劇烈振蕩管體15秒后,,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液,,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀,?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,,測定RNA溶液 濃度和純度,。