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詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：鴨源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號：FS-P013362
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,，而不能從無到有，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物,。可以是DNA也可以是RNA,，一般20多bp,，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二,、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次,，zui后在72℃ 保溫7min,。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油,；否則,，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,，不能混用,；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,，樣本處理在生物安全柜中進行操作,；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理,。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰,、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,，并應(yīng)瞬時離心,。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放,。
6.為防止熒光干擾,，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記,。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用,。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄,。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加,。
4.除空白孔外,，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）,。
6.每孔加入底物A、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值,。
Ly-6G/FITC 熒光標記細胞抗原6G抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Tau protein/FITC 熒光標記微管相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADCY10 腺苷環(huán)化10抗體 0.2ml
Rabbit dog IgG/Bio 生物標記的兔抗狗IgG 0.3ml
GALP 神經(jīng)甘丙肽樣肽GALP抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgG/PE PE標記的兔抗雞IgG 0.1ml
Tau protein/FITC 熒光標記微管相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
FAS/CD95(Human Factor-related Apoptosis) ELISA Kit 人凋亡相關(guān)因子Multi-class antibodies： 48T
Phospho-Glycogen synthase 1(Ser641) 磷化葡萄糖合成1抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MMP-26 基質(zhì)金屬蛋白-26抗體 0.2ml
PLAUR/uPAR(Human Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor) ELISA kit 人尿激型纖溶原激活物受體 96T
Radixin 根蛋白抗體 0.1ml
phospho-CDKN1A (Ser146) 磷化p21蛋白抗體 0.1ml
Phospho-Glycogen synthase 1(Ser641) 磷化葡萄糖合成1抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit MK IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗猴IgM 0.1ml
GM-CSFR alpha 粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子受體α抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Anillin 胞環(huán)蛋白肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
Phospho-IRF3 (Ser396)/FITC 熒光標記磷化干擾調(diào)節(jié)因子3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit horse IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗馬IgM 0.1ml
SCP2/NLTP/FITC 熒光標記固醇攜帶蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
鴨源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒人低氧誘導因子1α （HIF-1α）elisa檢測試劑盒
人骨保護（OPG）elisa檢測試劑盒
人蛋白二硫化物異構(gòu)A2（PDIA2）elisa檢測試劑盒
人蛋白Z（PROZ）elisa檢測試劑盒
人胰島樣生長因子1受體3（IGF1R3）elisa檢測試劑盒
人丙酮脫氫同工4（PDK4）elisa檢測試劑盒
人促卵泡（FSH）elisa檢測試劑盒
人成熟促進因子（MPF）elisa檢測試劑盒
人叉頭框蛋白O3（FOXO3）elisa檢測試劑盒
人γ谷氨酰轉(zhuǎn)移1（γGT1）elisa檢測試劑盒
人斑型POZ蛋白（SPOP）elisa檢測試劑盒
人血小板膜糖蛋白IV （GP4/CD36）elisa檢測試劑盒
人表面膜球蛋白M（mIgM）elisa檢測試劑盒
人彈性蛋白（ELN）elisa檢測試劑盒
人調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白（SREBP）elisa檢測試劑盒
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