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詳細(xì)介紹
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實驗服,、儀器,、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用,；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭,；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解,，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機(jī)檢測,；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理,。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照,。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心,。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置,；不同批號試劑不能混用,。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None,。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄,。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：蝦源性成分核酸檢測試劑盒48T0.2PCR管
產(chǎn)品貨號：FS-02R6410
產(chǎn)品規(guī)格：48T 0.2PCR管
產(chǎn)品分類：PCR-熒光探針法
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,，而不能從無到有，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物,。可以是DNA也可以是RNA,，一般20多bp,，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二,、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,，不加或添加石蠟油,。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次,，zui后在72℃ 保溫7min,。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油,；否則,，直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加。
4.除空白孔外,，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。
6.每孔加入底物A、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值,。
TRAIL-R1(Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 1) ELISA Kit 人壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1Multi-class antibodies： 48T
TNFRSF18 糖皮質(zhì)誘導(dǎo)壞死因子受體抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Goat IgG/PE PE標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
MLC(Human Myosin light Chain) ELISA Kit 人肌球蛋白輕鏈 96T
RAD50 DNA修復(fù)蛋白Rad50抗體 0.2ml
phospho-CREB-1(Ser121) 磷化CREB-1抗體 0.1ml
TNFRSF18 糖皮質(zhì)誘導(dǎo)壞死因子受體抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
BAFF-R(Human B cell activation factorr from the tumor necrosis factor family receptor) ELISA Kit 人B細(xì)胞活化因子受體Multi-class antibodies： 48T
GFP 綠色熒光蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Guinea pig IgG/AP 性磷(AP)標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
HSP-40(Human Heat Shock Protein 40) ELISA Kit 人熱休克蛋白40 96T
RGAG4 RGAG4蛋白抗體 0.2ml
Phospho-CHK2 (ser33) 磷化細(xì)胞周期檢測點激2抗體 0.1ml
GFP 綠色熒光蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit Goat IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
GTF2B 通用轉(zhuǎn)錄因子GTF2B抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AEG-1/LYRIC AEG-1抗體 0.2ml
LI-cadherin/FITC 熒光標(biāo)記肝腸鈣粘連蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗狗IgG 0.1ml
StAR/StARD1/FITC 熒光標(biāo)記促黃體誘導(dǎo)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
蝦源性成分核酸檢測試劑盒48T0.2PCR管豬S100鈣結(jié)合蛋白B （S100B）elisa檢測試劑盒
豬轉(zhuǎn)膠蛋白（TAGLN）elisa檢測試劑盒
豬脫氫表雄酮S7（DHEA-S7）elisa檢測試劑盒
豬內(nèi)皮蛋白C受體（EPCR）elisa檢測試劑盒
豬髓分化因子88（MYD88）elisa檢測試劑盒
豬胰島樣生長因子結(jié)合蛋白7（IGFBP-7）elisa檢測試劑盒
豬速肽受體3（TACR3）elisa檢測試劑盒
豬半乳凝集4（GAL4）elisa檢測試劑盒
豬血管內(nèi)皮生長因子受體2（VEGFR-2/KDR）elisa檢測試劑盒
豬二氫嘧啶脫氫（DPYD）elisa檢測試劑盒
豬鈣調(diào)磷結(jié)合蛋白1（CABIN1）elisa檢測試劑盒
豬成纖維生長因子受體底物2（FRS2）elisa檢測試劑盒
豬核因子κB受體活因子配基（RANκL）elisa檢測試劑盒
豬抑制蛋白β1（ARRβ1）elisa檢測試劑盒
豬血小板活因子ib3（PAFAHIB3）elisa檢測試劑盒
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