詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1,、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,,請臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),,分別配制成200 U/L,,100 U/L,50 U/L,,25 U/L,,12.5 U/L,6.25 U/L,,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,其余濃度以此類推,。
3,、 樣品稀釋液:1×20ml。
4,、 檢測稀釋液A:1×10ml,。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途,!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
50次 | FS-P013360 |
使用方法:
一,、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照,。 2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,,6,,5,4,3,,2,。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同),。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。 5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩1分鐘,,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。 6. 換槍頭,,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照,。放冰上待用,。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品,,必須設(shè)置N+2個提取,, 多出的一個是PC(樣品制備陽性對照), 一個是NC(樣品制備陰性對照),。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,,以此作為PC,。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,,則PC和NC的體積也必須是200μL,。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒,。 | 三,、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),,則標(biāo)記N+9個PCR管,,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照,。如果做2-3次重復(fù),,則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù),。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測,、DNA甲基化檢測,、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片,、表達(dá)譜芯片,、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC,、iTRAQ,、TMT、Label-free,、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取,、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot,、Co-ip EMSA,、CHIP、免疫熒光,、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色,、組織切片,、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS,、LC-MS,、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型,、動物模型構(gòu)建
CDT ELISA Kit 大鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白Multi-class antibodies: 48T
TBX2/T-box2 新型抑癌基因抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Bovine IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的羊抗IgG 0.3ml
F VIII Ag(Mouse Factor VIII -related Antigen) ELISA Kit 小鼠第八因子相關(guān)抗原 96T
NCoR1 核受體輔助抑制因子1抗體 0.1ml
BAGE4 /抗原2.4抗體 0.2ml
TBX2/T-box2 新型抑癌基因抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
PR3 Ab-IgG(Human proteinase 3 antibody IgG) ELISA Kit 人抗蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies: 48T
Insulin Receptor Beta 胰島受體β抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Livin 凋亡抑制蛋白抗體 0.1ml
CH(Human cholesterol) ELISA Kit 人血清總 96T
RAG2 重組激活基因2蛋白抗體 0.2ml
C12ORF53 12號染色體開放閱讀框53抗體 0.2ml
Insulin Receptor Beta 胰島受體β抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit Monkey IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.1ml
Giantin 高爾基體相關(guān)蛋白GM130抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ANGPTL5 血管生成相關(guān)蛋白5 0.2ml
IRF7 /FITC 熒光標(biāo)記干擾調(diào)節(jié)因子7抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit horse IgM/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml
Secretin/FITC 熒光標(biāo)記分泌抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
小鼠源性成分熒光定量PCR試劑盒人蛋白Cα相互作用蛋白α1(PICK1)elisa檢測試劑盒
人類胰蛋白(TPS)elisa檢測試劑盒
人甘露糖結(jié)合蛋白(MBP/MBL)elisa檢測試劑盒
人核孔蛋白214kda(NUP214)elisa檢測試劑盒
人核孔蛋白50kda(NUP50)elisa檢測試劑盒
人蛋白C-β1(PKCβ1)elisa檢測試劑盒
人蛋白抑制劑α(PKIα )elisa檢測試劑盒
人蛋白抑制劑β(PKIβ)elisa檢測試劑盒
人多肽YY (PYY)elisa檢測試劑盒
人發(fā)動蛋白1(DNM1)elisa檢測試劑盒
人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SPB)elisa檢測試劑盒
人血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)elisa檢測試劑盒
人S100鈣結(jié)合蛋白A8(S100A8)elisa檢測試劑盒
人肝癌抗原(PHC)elisa檢測試劑盒
人核孔蛋白160kda(NUP160)elisa檢測試劑盒
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,,蓋緊管蓋,。手動劇烈振蕩管體15秒后,,15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,,中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,,于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液,,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),,清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,,測定RNA溶液 濃度和純度,。