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詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1,、酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2,、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,，蓋好后室溫靜置大約10分鐘,，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L,，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋）,，分別配制成200 U/L，100 U/L,，50 U/L,，25 U/L，12.5 U/L,，6.25 U/L,，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,，混勻即可，其余濃度以此類推,。
3,、 樣品稀釋液：1×20ml。
4,、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途,！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
50次 | FS-P013360 |
使用方法：
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例） 1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,，分別為7,，6，5,，4,，3，2,。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭,，下同）。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,，充分震蕩1分鐘,，得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用。 5. 換槍頭,，在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用,。 6. 換槍頭，在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,，充分震蕩1分鐘,，得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用,。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用。 | 二,、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,，必須設(shè)置N+2個(gè)提取， 多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽(yáng)性對(duì)照）,， 一個(gè)是NC（樣品制備陰性對(duì)照）,。 可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝）或第5號(hào)（濃度為1×10E5 拷貝/μL,，10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,，以此作為PC。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品,，則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒,。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系,，在樣品制備室進(jìn)行） 10. 如果只做1次重復(fù),，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,，6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍,。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加）
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實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué)：基因芯片,、SNP檢測(cè),、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片,、LncRNA芯片,、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE,、SILAC,、iTRAQ、TMT,、Label-free,、MRM
4.基因檢測(cè)：DNA/RNA提取、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè)：Western blot,、Co-ip EMSA、CHIP,、免疫熒光,、ELISA
6.病理檢測(cè)：HE染色、特殊染色,、組織切片,、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS,、LC-MS,、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型：原代細(xì)胞、細(xì)胞模型,、動(dòng)物模型構(gòu)建
CDT ELISA Kit 大鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白Multi-class antibodies： 48T
TBX2/T-box2 新型抑癌基因抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Bovine IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的羊抗IgG 0.3ml
F VIII Ag(Mouse Factor VIII -related Antigen) ELISA Kit 小鼠第八因子相關(guān)抗原 96T
NCoR1 核受體輔助抑制因子1抗體 0.1ml
BAGE4 /抗原2.4抗體 0.2ml
TBX2/T-box2 新型抑癌基因抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
PR3 Ab-IgG(Human proteinase 3 antibody IgG) ELISA Kit 人抗蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies： 48T
Insulin Receptor Beta 胰島受體β抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Livin 凋亡抑制蛋白抗體 0.1ml
CH(Human cholesterol) ELISA Kit 人血清總 96T
RAG2 重組激活基因2蛋白抗體 0.2ml
C12ORF53 12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框53抗體 0.2ml
Insulin Receptor Beta 胰島受體β抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit Monkey IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.1ml
Giantin 高爾基體相關(guān)蛋白GM130抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ANGPTL5 血管生成相關(guān)蛋白5 0.2ml
IRF7 /FITC 熒光標(biāo)記干擾調(diào)節(jié)因子7抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit horse IgM/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml
Secretin/FITC 熒光標(biāo)記分泌抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
小鼠源性成分熒光定量PCR試劑盒人蛋白Cα相互作用蛋白α1（PICK1）elisa檢測(cè)試劑盒
人類胰蛋白（TPS）elisa檢測(cè)試劑盒
人甘露糖結(jié)合蛋白（MBP/MBL）elisa檢測(cè)試劑盒
人核孔蛋白214kda（NUP214）elisa檢測(cè)試劑盒
人核孔蛋白50kda（NUP50）elisa檢測(cè)試劑盒
人蛋白C-β1（PKCβ1）elisa檢測(cè)試劑盒
人蛋白抑制劑α（PKIα ）elisa檢測(cè)試劑盒
人蛋白抑制劑β（PKIβ）elisa檢測(cè)試劑盒
人多肽YY （PYY）elisa檢測(cè)試劑盒
人發(fā)動(dòng)蛋白1（DNM1）elisa檢測(cè)試劑盒
人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B（SPB）elisa檢測(cè)試劑盒
人血清淀粉樣蛋白A3（SAA3）elisa檢測(cè)試劑盒
人S100鈣結(jié)合蛋白A8（S100A8）elisa檢測(cè)試劑盒
人肝癌抗原（PHC）elisa檢測(cè)試劑盒
人核孔蛋白160kda（NUP160）elisa檢測(cè)試劑盒
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,，15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,，中間層以及無(wú)色水相上層,。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液，每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),，清洗RNA沉淀,。混勻后,，4℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解,，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
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