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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：綠如藍(lán)核酸染料（UV型）
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-P013325
產(chǎn)品規(guī)格： 1.5 mL
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,，而不能從無(wú)到有，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物,。可以是DNA也可以是RNA,，一般20多bp,，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二,、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次,，zui后在72℃ 保溫7min,。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。 4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油,；否則,，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器,、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭,；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解,，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè),；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理,。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照,。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),，并單獨(dú)存放,。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記,。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用,。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄,。
HBME-1 /FITC 熒光標(biāo)記間質(zhì)細(xì)胞HBME1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TFAR19/PDCD5 /FITC 熒光標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白TFAR19抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Batroxobin 蛇毒巴曲抗體 0.2ml
5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4) 5-羥色胺受體4抗原 0.5mg
GRO Alpha 生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因-1抗體GROa 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit rat IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
TFAR19/PDCD5 /FITC 熒光標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白TFAR19抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TGM2(human transglutaminase 2C polypeptide) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)谷氨酰胺2C多肽Multi-class antibodies： 48T
HRH4/GPCR105 組織胺H4受體抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Matriptase 蛋白裂解(一種新的癌基因)抗體 0.1ml
DAO(Human diamine oxidase) ELISA Kit 人二胺氧化 96T
RARRES1 視黃受體應(yīng)答蛋白1抗體 0.1ml
COX7A2 氧化7A2抗體 0.1ml
HRH4/GPCR105 組織胺H4受體抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit human sIgA/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml
GNGT1 G蛋白γ 1/Gγ 1 抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AMID/AI 線粒體凋亡誘導(dǎo)因子2抗體 0.2ml
Phospho-Jak3 (Tyr980/981)/FITC 熒光標(biāo)記磷化蛋白酪激JAK-3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit horse IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml
SHP2/PTPN11/FITC 熒光標(biāo)記蛋白酪磷2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
綠如藍(lán)核酸染料（UV型）人嗜粒趨化因子受體（ECFR）elisa檢測(cè)試劑盒
人熱休克蛋白90（HSP-90）elisa檢測(cè)試劑盒
人L1粘附分子（L1CAM/CD171）elisa檢測(cè)試劑盒
人補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白1（CFHR1）elisa檢測(cè)試劑盒
人胎盤蛋白14 （PP14）elisa檢測(cè)試劑盒
人胎盤蛋白13 （PP13）elisa檢測(cè)試劑盒
人糖化白蛋白（GA）elisa檢測(cè)試劑盒
人生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43（GAP43）elisa檢測(cè)試劑盒
人生長(zhǎng)分化因子1（GDF1）elisa檢測(cè)試劑盒
人胎兒血紅蛋白（HBF）elisa檢測(cè)試劑盒
人糖磷脂酰肌醇（GPI）elisa檢測(cè)試劑盒
人糖皮質(zhì)受體β（GRβ）elisa檢測(cè)試劑盒
人糖皮質(zhì)受體α（GRα）elisa檢測(cè)試劑盒
人色氨酰tRNA合成（WARS）elisa檢測(cè)試劑盒
人血管活性腸肽受體1（VIPR1）elisa檢測(cè)試劑盒
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,；
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL,；空白孔不加。
4.除空白孔外,，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。
6.每孔加入底物A、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi),，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。
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