詳細介紹
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途,!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T 0.1PCR管 | FS-02R6371 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2,、 標準品(凍干品): 2瓶,,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),,分別配制成200 U/L,100 U/L,,50 U/L,,25 U/L,12.5 U/L,,6.25 U/L,,3.12 U/L,,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,,其余濃度以此類推。
3,、 樣品稀釋液:1×20ml,。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml,。
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片,、SNP檢測、DNA甲基化檢測,、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片,、LncRNA芯片、表達譜芯片,、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE,、SILAC、iTRAQ,、TMT,、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取,、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA,、CHIP,、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色,、特殊染色,、組織切片、免疫組化,、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS,、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞,、細胞模型,、動物模型構(gòu)建
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標準品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照,。 2. 標記6個離心管,分別為7,,6,,5,4,,3,2,。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同)。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩1分鐘,,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。 5. 換槍頭,,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。 6. 換槍頭,,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。 7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用,。 | 二,、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,, 多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),, 一個是NC(樣品制備陰性對照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC,。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL,。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒,。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,,在樣品制備室進行) 10. 如果只做1次重復,,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,,1個用于PCR陰性對照,,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,,則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍,。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,,蓋緊管蓋,。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),,清洗RNA沉淀,。混勻后,,4℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,,測定RNA溶液 濃度和純度,。
BMP-6 ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白6Multi-class antibodies: 48T
TPH 色羥化抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GLIPR2 腦膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白2抗體 0.2ml
ON ELISA Kit 大鼠骨粘連蛋白 96T
Ninjurin 1 神經(jīng)損傷誘導蛋白1抗體 0.2ml
beta-Amyloid 1-40 (CT) β淀粉樣肽1-40 C端/Aβ1-40 C端抗體 0.1ml
TPH 色羥化抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
IGFBP-1(Human insulin-like growth factors binding protein 1) ELISA Kit 人胰島樣生長因子結(jié)合蛋白1Multi-class antibodies: 48T
Phospho-GRM2/GLUR2 (Tyr869/873/876) 磷化促代謝型谷受體2抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MOBK1B/C2orf6 2號染色體開放閱讀框6抗體 0.2ml
Alpha1-MG(Human Alpha1-microglobulin) ELISA Kit 人α1微球蛋白 96T
RIL 抑癌基因PDLIM4抗體 0.1ml
phospho-Crkl (Tyr207) 磷化接頭蛋白CrkL抗體 0.1ml
Phospho-GRM2/GLUR2 (Tyr869/873/876) 磷化促代謝型谷受體2抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit dog IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗狗IgG 0.1ml
GYPB 血型糖蛋白δ抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Adenylate Kinase 1/AK1 腺苷激-1抗體 0.2ml
LRIG2/FITC 熒光標記抗LRIG2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgM/APC APC標記的兔抗雞IgM 0.1ml
SYVN1/FITC 熒光標記滑膜細胞凋亡抑制物1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
空腸彎曲菌核酸檢測試劑盒48T 0.1PCR管山楂(山里紅)Hawthorn?(Crataegus pinnatifida)
肉蓯蓉(管花肉蓯蓉)Rou
白附子(獨角蓮)Rhizoma typhonii?(Typhonium Giganteum)
蓮須Lotus stamen
鷓鴣菜Tanaka
見血飛See blood fly
旋復花Inula
火麻仁Fructus cannabis
防風Water wind
厚樸Magnolia officinalis
白土苓(華南肖菝葜)Clay?Ling?(Southern China?Heterosmilax)
地瓜藤Sweet potato vine
薯莨Dioscorea cirrhosa
花椒(青椒)Pepper?(pepper)
麥芽Malt